东北红豆杉愈伤组织培养研究

以东北红豆杉幼茎为培养材料诱导出愈伤组织，并分析了不同的激素组合、糖浓度、培养条件对愈伤组织诱导的影响。结果表明，NAA激素组合比2，4－D组合更有利于愈伤组织的诱导，在25℃、2％蔗糖、0．7％琼脂、每天光照12h条件下愈伤组织诱导率达100％。     

东北红豆杉愈伤组织诱导及组织培养研究

东北红豆杉扦插苗幼茎愈伤组织的诱导频率B5－B组（86．7％）＞MS－A组（60．2％）＞MS－B组（37．0％）。MS培养基中2，4－D和NAA同时存在时，愈伤组织诱导效果比不含NAA的要好1．5－2倍。MS培养基是 愈伤组织生长的适宜培养基。经过几代的继代培养，愈伤组织的生长周期由35－40d缩短为15－18d。红豆杉树与扦插苗间、树的不同个体间，甚至同一树不同部位的幼茎在愈伤组织诱导及生长方面都存在较大差异。     

东北红豆杉细胞悬浮培养研究

东北红豆杉（Taxus cuspidata sieb et zucc)幼茎诱导的愈伤组织经多次继代培养，选择生长旺盛，紫杉醇含量高的愈伤组织进行细胞悬浮培养，建立了东北红豆杉细胞悬浮系，同时，对影响愈伤组织进行细胞悬浮培养，建立了东北红豆杉细胞悬浮系，同时，对影响愈伤组织继代培养及细胞悬浮培养的条件进行了研究，确定了适合愈伤组织生长的条件以及影响细胞悬浮培养的主要因素。     

东北红豆杉培养细胞系的建立（Ⅰ）

东北红豆杉愈伤组织诱导的最佳培养基为Ｂ５和ＷＨ。维持愈伤组织正常快速生长的培养基为Ｂ５．２．４－Ｄ对东北红豆杉愈伤组织的诱导和形成起关键作用，其浓度为２ｍｇ／Ｌ。嫩茎作外植本的愈伤组织诱导率高于针叶。添加适当浓度的有机物会促进愈伤组织的生长速度。     

根癌农杆菌介导的骏枣愈伤组织遗传转化体系的研究

采用农杆菌介导法,对骏枣愈伤组织遗传转化体系进行研究.结果表明：进行遗传转化的合适条件为：愈伤诱导培养基MS＋6-BA 0.4 mg/L＋2,4-D 1.2 mg/L;浸染之前对愈伤组织进行6d的避光培养可提高愈伤组织在共培养过程中的成活率;愈伤组织在OD600=0.4～0.6的农杆菌菌液中浸染10 min,农杆菌LBA4404的生长情况最好;在28℃黑暗条件下共培养放置16 d对转化最适宜;头孢霉素的抑菌浓度为250 mg/L;卡那霉素的筛选浓度为125 mg/L.经PCR检测,初步证明外源目的基因已整合到骏枣基因组中,初步实现了农杆菌介导的骏枣愈伤组织遗传转化,与以骏枣茎叶外植体建立的遗传转化体系相比,以骏枣愈伤组织为外植体共培养时间长,有利于转化.     

东北红豆杉的愈伤组织诱导

提取并检测东北红豆杉茎和叶中紫杉醇的含量,茎和叶中均含有微量紫杉醇,茎中含量稍高一些。以茎和叶为外植体,MS为基础培养基,采用10种激素配比在黑暗条件下诱导愈伤组织。综合愈伤组织诱导率、愈伤组织生长状态和愈伤组织传代过程中的褐化情况,2,4-D 1.0 mg.L-1和6-BA1.0 mg.L-1为东北红豆杉茎愈伤诱导和传代的最佳激素配比。低温预处理外植体有利于减轻愈伤组织的褐化情况,但却降低了愈伤组织诱导率。在愈伤组织及培养基中未检测到紫杉醇。     

红豆杉愈伤组织的诱导培养及紫杉醇的产生

研究了红豆杉愈伤组织的诱导,培养及愈伤组织中紫杉醇的产生,结果表明,在以１／２ＭＳ培养基为基本培养基的条件下,在一个较宽的生长素浓度范围内,均可诱导发生红豆杉的愈伤组织;不同类型的植物生长素ＩＡＡ、ＩＢＡ,ＮＡＡ及２,４－Ｄ和６－ＢＡ的组合均可使红豆杉外植体３０ｄ的愈伤组织发生率达６０％以上;     

应用农杆菌介导法的多年生黑麦草遗传转化研究

以草坪型多年生黑麦草Lolium perenne L.成熟种子为外植体,经过愈伤组织诱导和植株再生研究,建立了该草种的遗传转化体系,并成功地应用农杆菌介导法将克隆自辽宁碱蓬的甜菜碱醛脱氢酶基因(BADH)转移进多年生黑麦草,获得的转基因株系Gsc-LP5通过PCR检测证明了目的基因的存在,通过叶片离体检测法证明了作为检测基因随同质粒一同转入的抗潮霉素基因的表达,通过盆栽耐盐试验证明了转基因植株具有较强的耐盐能力.     

东北红豆杉的研究进展

本文从东北红豆杉的化学成分,药理作用等方面阐述了东北红豆杉的研究进展.系统论述了东北红豆杉的开发前景、存在问题及发展对策.     

土壤农杆菌C58遗传转化东北红豆杉的初步研究

This paper demonstrates that callus of Taxus cuspidata could be transformed genetically by Agrobacterium tumefaciens C₅₈ and the bacterial genes transformed into the plant genome could express. Explants and calli of T.cuspidata were inoculated with C₅₈ for different time and the highest crown gall formation frequency (15.0%) was achieved with 20-day-old callus inoculated for 5 minutes. Explants were less susceptibility than calli. In contrast to untransformed callus tissue, the crown gall could proliferate on hormone-free medium and produced nopaline. By HPLC analysis, gall cells were able to synthesize taxol (0.0013% dry weight.)     

两种红豆杉离体细胞中紫杉醇含量的调节

以矮壮素、水杨酸和甘露醇为诱发子,研究了短叶红豆杉(Taxus brevifolia)和墨西哥红豆杉(Taxus globosa)离体细胞中紫杉醇含量的变化.实验结果表明:矮壮素、水杨酸和甘露醇不同程度地提高离体细胞中紫杉醇含量.短叶红豆杉的紫杉醇含量比墨西哥红豆杉的高,但诱发子诱导墨西哥红豆杉紫杉醇相对增加量大.0.5 mg*L-1水杨酸和0.5 mg·L-1矮壮素分别使短叶红豆杉和墨西哥红豆杉细胞中紫杉醇含量达到最高,分别是对照的1.8和15倍.还讨论了紫杉醇含量与愈伤组织生长的关系.     

禾木科作物基因转化研究进展

本文从四个方面对禾本科作物特别是水稻的基因转化的新近研究成果进行了评述。作者认为，研究工作取得了不少成果，但尚未建立起一整套具体的操作模式．     

人工栽培南方红豆杉紫杉醇的含量分析

采用高效液相色谱法对人工栽培南方红豆杉枝、叶、皮、种子中紫杉醇的含量进行测定,并与文献报道的东北红豆杉、南方红豆杉、云南红豆杉的紫杉醇含量比较．结果表明,人工栽培南方红豆杉种子、枝条、叶和皮中的紫杉醇含量分别是0．01256％,0．00193％,0．00102％和0．01483％,它们均有开发利用价值,研究为合理开发利用人工栽培南方红豆杉枝提供了依据．     

根癌病土壤杆菌诱导转化毛状根能力的评价

以鸟头(Aconitum carmichaeli)、Bidens sulphureus和洋金花Datura metal)三个植物种为材料(用A.rhizogenes的九个菌株和A tumefaciens的一个突变系为感染源.诱导出转化毛状根.根据所诱导出的转化毛状根数量来评价各菌株诱导产生转化毛状根的能力.结果表明同一菌株对不同植物和同一植物接受不同菌株的感染力有明显差异.A. rhizogenes ATCC15834、ATCC 25818、A 42017和A.tumefaciens、TMR 338诱导产生转化毛状根的能力最强,A.rhizogenes R1000、TR 105次之.ATCC 11325、ATCC 13332、ATCC 13333和Melon;2—1较差 作者认为,目前仍可依照Dawso (1942)、在烟草Nicotiana tabacum离体根培养 得出的结论 按生长率、干重和分枝数作为建立转化毛状根无性系的初选形态学标准.     

农杆菌介导的花生抗线虫基因遗传转化体系初步研究

白皮秋花生1012种子萌发3d,获得花生无菌苗,切取子叶、胚轴、子叶柄作为外植体。用农杆菌介导法将外植体侵染20-30分钟转入培养基MS+5mg/L BA+0.5mg/L NAA+100μmol/L AS暗光共培养3d,转至加有280mg/L Cef的培养基P2或P2上诱导芽伸长,长至1-2cm时转至促根培养基MS+0.2mg/L BA+75mg/L Kan+280mg/L Cef上促根,经27天观察有5株再生苗长根。结果表明培养基P2上芽诱导率较高,长势也较好,同时乙酰丁香酮对芽诱导率起促进作用。     

重组人成纤维细胞生长因子21对胡萝卜遗传转化的研究

人成纤维细胞生长因子21(FGF21)是肝脏合成的一种可分泌多肽,对糖脂代谢的调控具有重要作用。以胡萝卜(Daucus carota L.)七寸人参品种为试验材料,用含重组人成纤维细胞生长因子21(rh FGF21)质粒p1390RⅡ的根癌农杆菌LBA4404对胡萝卜进行了遗传转化实验。PCR扩增和Western blot结果表明外源基因FGF21已成功转入胡萝卜基因组中。此研究为今后用胡萝卜产业化表达生产FGF21提供参考。