液相色谱法分离胃蛋白酶原

首次应用高压凝胶过滤色谱和中压阴离子交换色谱提纯胃蛋白酶原,得到抗原ＰＧⅠ和ＰＧⅡ,一次提纯仅需５０ｍｉｎ。与以往文献报道的胃蛋白酶原纯化方法相比,具有简易、快速、高效的特点。     

高速逆流色谱结合制备液相色谱法分离制备葡萄籽中的多酚

采用高速逆流色谱结合制备液相色谱法从葡萄籽乙醇提取物中分离得到了8种多酚。高速逆流色谱以上相为固定相,下相为流动相,主机转速为900 r/min,流速为2 mL/min,分离温度为25℃,检测波长为280 nm,利用正向和反向洗脱相结合的模式,在正丁醇-乙酸乙酯-水（1∶14∶15,v/v/v）和正己烷-乙酸乙酯-水（1∶10∶10,v/v/v）溶剂系统下从葡萄籽提取物中分离得到了5种多酚。原花青素B₁、原花青素B₂、没食子酸、表儿茶素没食子酸酯和儿茶素的纯度分别为98.5%、97.2%、98.3%、98.9%和96.7%。利用制备液相色谱法对高速逆流色谱分离成分进一步分离纯化,获得了表儿茶素、表没食子儿茶素没食子酸酯和没食子儿茶素没食子酸酯,纯度分别99.2%、99.3%和99.2%。该方法单次制备量均达到毫克级,简便、快速、分离纯度高,适合于葡萄籽中多酚的分离制备。     

高速逆流色谱法分离茶叶中的生物碱

以氯仿－甲醇－磷酸二氢钠缓冲液（２３ｍｍｏｌ／Ｌ,ｐＨ５．６）（体积比４∶３∶２）为溶剂系统,上相为固定相,下相为移动相,从茶叶的总生物碱中分离出三个成分,其中一个是咖啡碱,一个是茶碱,另一个待定。将分离结果与ＴＬＣ分离结果相比较,证实了高速逆流色谱法的有效及实用性。     

离子液体高速逆流色谱法分离蛋白质

蛋白质是人体不可或缺的营养物质,目前蛋白质的研究仅局限于分析检测,分离检测手段不多,寻求有效提纯蛋白质的新方法具有重要意义.离子液体是21世纪绿色溶剂的主流研究方向之一~([1]).高速逆流色谱的应用已日趋广泛,尤其是分离科学方面.根据各蛋白质极性的不同,使离子液体结合高速逆流色谱~([2])进行蛋白质的分离提纯成为可能.     

双水相萃取结合液相色谱法分离蛋白质

建立了PEG/( NH4)2SO4双水相体系萃取富集,结合液相色谱分离分析多种蛋白质的方法.考察了无机盐种类和浓度、PEG分子量、pH值和温度等因素对双水相形成以及对细胞色素C、肌红蛋白、牛血清白蛋白、溶菌酶、胰蛋白酶分配行为的影响.结果表明,上述5种蛋白在室温、pH 3.5～9.0范围内,可在15％ PEG-4000/10％ (NH4)2SO4双水相体系中得到富集,且主要集中在下相.同样条件下,血清中的高丰度蛋白在上下相均有分配,下相分配量较大.通过双水相萃取分离蛋白质及对液相色谱一定时间段的色谱峰收集,可初步实现血清中高丰度蛋白质的分离去除.     

高效液相色谱法手性分离二茂铁衍生物

建立了4个单手性和3个双手性(含有手性中心和面手性)的二茂铁衍生物在Chiralpak IC(纤维素-三(3,5-二氯苯基氨基甲酸酯))和Chiralpak IE3(直链淀粉-三(3,5-二氯苯基氨基甲酸酯))手性固定相上的高效液相色谱分离方法。4个单手性二茂铁衍生物中有3个可以在Chiralpak IE3固定相上实现基线分离,另外1个则在Chiralpak IC手性固定相上实现基线分离。3个双手性二茂铁衍生物可在Chiralpak IC手性固定相上实现基线分离。研究表明,这两种手性固定相对二茂铁衍生物具有较好的手性识别作用,并且具有互补作用。这一研究结果可为手性二茂铁化合物的分离提供借鉴和参考。     

毛细管液相色谱法分离植物内源激素

建立了毛细管液相色谱法(CLC)同时分离测定4种植物内源激素的方法.采用硅胶基质ODS整体柱(27 cm×100 μm i.d.)作为分离柱,以带有光程为3 mm的光纤检测池的紫外检测器作为检测手段,在室温下以含10 mmol/L乙酸(pH 3.0)的V(甲醇):V(水)＝35:65为流动相,以0.6 μL/min的流速进行等度洗脱.采用溶剂梯度效应和扩展光程的检测池来提高检测灵敏度,该方法测定4种植物内源激素的检出限(S/N=3)在27.7～196.1 ng/mL之间,峰面积和保留时间的相对标准偏差(RSD)小于2.8%.方法已用于不同种类玉米样品的测定.     

液相色谱法分离金属螯合物的进展

综述了用薄层液相色谱法和柱液相色谱法分离金属螯合物的进展及其在金属离子分析方面的应用。     

高效液相色谱法测定猪油甘油三酯中的脂肪酸位置分布

 建立了一种采用高效液相色谱法(HPLC)分析猪油甘油三酯中的脂肪酸组成及其位置分布的方法。利用sn-1,3位专一性脂肪酶对甘油三酯sn-1,3位上的脂肪酸进行水解,形成sn-2位甘油单酯和游离脂肪酸；之后,通过甘油三酯中脂肪酸总含量和sn-1,3位上脂肪酸含量之间的差值计算出sn-2位上的脂肪酸含量。利用2-溴苯乙酮仅同游离脂肪酸作用的特点,将脂肪酸酯化为苯乙酰甲酯,然后进行HPLC分析。分析所用色谱柱为ZORBAX SB C18柱,以十七酸作为内标，甲醇-乙腈-水为流动相,采用梯度洗脱(梯度洗脱程序为甲醇-乙腈-水由80∶10∶10（体积比，下同）在35 min内线性变化到86∶10∶4,然后在5　min内恢复到起始比例，流动相流速为1 mL/min),通过测定苯乙酰甲酯在254 nm处的吸光度值来测定脂肪酸含量。结果表明,猪油甘油三酯中的脂肪酸主要是棕榈酸和油酸(分别占总量的26.61%和43.18%),其中油酸主要分布于sn-1,3位上,而棕榈酸分布于sn-2位上。这些测定结果与传统气相色谱法的测定结果相吻合。该方法简单可行,省去了传统测定中费时的薄层色谱分离步骤,可成为一种有效的实验室分析方法。     

微柱高效液相色谱法分离八角茴香挥发油成分

利用微柱高效液相色谱法(μ-HPLC)对八角茴香果实挥发油成分进行了分离,对固定相类型、流动相组成及流速等条件进行了优化。结果表明,选用氰基分析柱(250mm×0.32mmi.d.,5μm),正己烷-乙腈-二氯甲烷(80∶8∶12,体积比)为流动相,流速为2μL·min-1,八角茴香果实挥发油成分在微柱液相色谱上分离效果最好。在优化的实验条件下,对实际样品中反式-茴香醚、茴香醛等成分进行了定量。本实验为以后的μ-HPLC与毛细管气相色谱联用分析植物挥发油奠定了基础。     

高效液相色谱法同时分离检测食品添加剂

建立了一种同时分离检测没食子酸丙酯(PG)、特丁基对苯二酚(TBHQ)、二丁基羟基甲苯(BHT)和苯甲酸等食品添加剂的高效液相色谱(HPLC)分析方法.通过对流动相、流速、柱温、检测波长等色谱条件的优化,确定了最佳的分离检测条件:甲醇(B)和水(A)(0.1%的乙酸溶液)作为流动相,梯度洗脱:0~6 min,60%B,流速0.3 m L/min;6~9 min,60%~100%B,流速0.6 m L/min,柱温维持在25℃,检测波长280 nm(PG、TBHQ、BHT),230 nm(苯甲酸).在最佳的色谱条件下,方法的线性范围分别为1~200、2~400、2~400、0.5~400 mg/L,检出限(LOD)为0.02~0.06 mg/L,相关系数(R2)均大于0.999 4,加标回收率在77.76%~106.27%之间.该方法还成功应用于话梅、薯片、方便面实际样品中食品添加剂的分析检测.     

高效离子交换液相色谱法分离绿脓杆菌外膜蛋白

 利用高效ＤＥＡＥ离子交换液相色谱法分离纯化了绿脓杆菌标准菌株ＰＡＯ１外膜蛋白。流动相为ｐＨ８．０Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ缓冲液,色谱柱为ＴＳＫｇｅｌ－ＤＥＡＥ－５ＰＷ（０．７５ｃｍ×７．５ｃｍｉ．ｄ．）。通过纯化外膜蛋白,可以为研究绿脓杆菌外膜通透性与抗生素耐药性之间的关系及缩短研究周期提供有效的方法。     

制备液相色谱法分离纯化碘帕醇

基于制备液相色谱法,开发与优化了碘帕醇的分离纯化工艺,制备得到高纯度碘帕醇样品。实验首先在分析水平发展碘帕醇的反相分离方法,考察了两种不同键合量的反相C18固定相、柱温和上样量对碘帕醇的保留、分离度和峰形等的影响。结果表明,碘帕醇在键合量为13.7%的反相C18-1分析柱（250 mm×4.6 mm,10 μm）上保留较好,且可与杂质有效分离;柱温升高,碘帕醇保留变弱,和杂质之间的分离度降低,最终选用20~25℃作为分离纯化的温度;上样量增加,碘帕醇出峰时间提前,不利于前杂的去除。在制备水平上,以水和甲醇为洗脱剂,在20℃条件下使用装填C18-1固定相的制备柱（270 mm×50 mm,10 μm）对碘帕醇进行分离纯化,制备的碘帕醇样品的色谱纯度可达98.97%,回收率为93.44%,各项有关物质均符合限量规定。该方法可以在保证高回收率的条件下有效降低杂质水平,为碘帕醇分离纯化生产工艺的开发提供新方法。     

反相高效液相色谱法分离蛋白质的研究

采用反相高效液相色谱法考察了几种大孔硅胶烷基键合固定相在等度淋洗条件下进行蛋白质分离的色谱性能。研究了冲洗剂中有机溶剂异丙醇的浓度、离子对酸（ＴＦＡ）浓度对蛋白质保留时间的影响。探讨了蛋白质在ＲＰ－ＨＰＬＣ中的保留机理。结果表明,大孔硅胶（２０～３０ｎｍ）短链（Ｃ４和Ｃ８）烷基键合固定相适合蛋白质的分离。     

反相高效液相色谱法分离测定酪胺

 建立了分离酪胺与酪氨酸及其它杂质的反相键合相高效液相色谱法,讨论了流动相添加剂对色谱分离的影响和离子相互作用的分离机理。在C8烷基键合相分离柱上,以含Tris-高氯酸盐(20mmol/LTris,用HClO4调节pH为7.9,并添加KClO4,使总高氯酸盐浓度为30mmol/L)的甲醇-水溶液(体积比为40∶60)作为流动相,以对甲苯磺酰胺为内标物,测定了p-酪氨酸脱羧工艺产物——酪胺的质量分数。酪胺样品质量分数测定的准确度和重现性数据为(96.40±0.633)(n=11,RSD=0.66),加样回收率为99.33～100.38。方法可用于工艺条件的选择和酪胺产品质量的检测。     

高效液相色谱法分离和测定甜菊甙

〕本文研究了应用反相高效液相色谱法分离甜菊糖甙,对其中主要成分甜菊甙进行了鉴定和定量测定。分析条件如下：柱,YWG-C18H37;流动相,甲醇-水（75:25,体积／体积）;紫外检测波长205nm,甜菊甙最小检知量：0.2μg。分析了18个甜菊糖甙样品,定量测定结果：甜菊甙含量在43.80～60.39%,相对标准偏差为1.6%。     

高效离子交换液相色谱法分离绿脓杆菌外膜蛋白

利用高效ＤＥＡＥ离子交换液相色谱法分离纯化了绿脓杆菌标准菌株ＰＡＯ１外膜蛋白。流动相为ｐＨ８．０Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ缓冲液,色谱柱为ＴＳＫｇｅｌ－ＤＥＡＥ－５ＰＷ（０．７５ｃｍ×７．５ｃｍｉ．ｄ．）。通过纯化外膜蛋白,可以为研究绿脓杆菌外膜通透性与抗生素耐药性之间的关系及缩短研究周期提供有效的方法。