基于发光共振能量转移的比率型上转换荧光纳米探针检测次硝酸

次硝酸（Nitroxyl,HNO）由一氧化氮（NO）经单电子还原和质子化作用产生,在生理和病理过程中都有着重要作用.本工作构建了一种基于发光共振能量转移（Luminescence resonance energy transfer,LRET）的比率型上转换纳米探针用于检测生物体系中HNO含量.该探针以上转换纳米颗粒（Upconversion nanoparticles,UCNPs）为能量供体,有机染料Fl-TP为能量受体构建.Fl-TP能特异性识别HNO并与之反应生成Fl-HNO,Fl-HNO在400～500 nm处具有明显的吸收峰,与UCNPs的蓝色发射光谱重叠,从而发生LRET过程.随着HNO浓度增加,Fl-HNO的荧光强度（F_{525 nm}）逐渐增强,UCNPs的荧光强度（F_{480 nm}）逐渐下降,比率信号（F_{525 nm}/F_{480 nm}）逐渐增加,并与HNO浓度对数呈良好的线性关系,该探针的线性检测范围为3～100 μmol·L^－1,检出限23.4 nmol·L^－1.实验结果表明该比率探针特异性强,灵敏度高,并可成功实现在活细胞和生物组织中HNO的检测.     

基于上转换纳米粒子-金纳米棒的荧光共振能量转移免疫分析法用于癌胚抗原检测

构建了一种基于上转换纳米粒子(Upconversion nanoparticles, UCNP)-金纳米棒(Gold nanorods, GNR)的荧光共振能量转移(Fluorescence resonance energy transfer, FRET)免疫分析方法用于灵敏检测癌胚抗原(Carcinoembryonic antigen, CEA)。以UCNP作为供体,GNR作为受体,将CEA抗体通过共价偶联的方式分别修饰在UCNP和GNR表面,形成抗体偶联物UCNP-cAb和GNR-dAb,当引入CEA后,通过抗原-抗体相互作用形成“三明治”夹心复合物,导致UCNP与GNR相互靠近发生FRET,并且荧光淬灭效率与CEA浓度呈正相关。基于此建立了检测CEA的FRET免疫分析方法,线性范围为0.01～100 ng/mL,检出限(S/N=3)为0.01 ng/mL。采用构建的FRET免疫分析方法实现了对缓冲溶液和人血清样本中的CEA的检测。本方法具有良好的选择性,有望用于临床检测,为相关癌症的早期诊断、治疗及预后监测等提供了新方法。     

基于上转换荧光纳米粒子和金纳米粒子间荧光共振能量转移的高灵敏赭曲霉毒素A检测方法研究

制备了水溶性的上转换荧光纳米材料,在其表面修饰赭曲霉毒素A(OTA)适配体作为能量供体探针;在金纳米粒子表面修饰OTA适配体互补链作为能量受体探针,构建了OTA适配体传感器。在最优条件下,OTA的检测范围为0.001~10 ng/mL,检出限可达0.001 ng/mL。将其应用于啤酒样品中OTA的检测,当加标水平为0.01、0.1、1.0 ng/mL时,回收率为100%~119%,相对标准偏差为4.3%~4.9%,表明该方法可用于实际样品检测。该方法具有灵敏度高、特异性好、操作简单、成本较低等优点。     

基于纳米银-曙红Y-DNA的荧光共振能量转移探针

以曙红Y-DNA为荧光探针,运用紫外可见光谱法、荧光光谱法和电泳法研究了纳米银与曙红Y-DNA之间的共振能量转移,并应用能量共振转移的原理解释了纳米银及曙红Y与DNA之间的相互作用。结果表明,曙红Y与DNA的作用方式为嵌插作用,纳米银与DNA的作用方式为静电作用,曙红Y和纳米银结合到DNA上以后,导致了DNA结构的改变。     

荧光共振能量转移技术在生物分析中的应用

对荧光共振能量转移技术及其应用较全面的综述，介绍了Ｆｏｅｒｓｔｅｒ原理，ＦＲＥＴ实验技术，及其在生物大分子结构与功能研究，免疫分析和核酸杂交分析等几方面的应用，并对其将来的发展作出一些评价与展望。     

基于罗丹明B和金纳米粒子荧光共振能量转移检测卡托普利

基于罗丹明B(RhB)与金纳米粒子(AuNPs)的荧光共振能量转移,建立了一种简单、灵敏、快速测定药物卡托普利的新方法。初步探讨了方法机理,并对pH值、反应时间、AuNPs和RhB的浓度等实验条件进行了优化。优化实验条件下,方法的线性范围为9.2×10~(-8)~1.8×10~(-6) mol/L,检出限(S/N=3)为6.9×10~(-8) mol/L。该方法用于卡托普利药品中卡托普利的测定,获得了满意结果。     

荧光共振能量转移测定杀虫单

1引言 研究了钙黄绿素（Calcein）与酚藏花红（PF）的荧光共振能量转移现象，并且将其作为探针用来测定杀虫单，扩大了荧光共振能量转移的应用领域。该方法准确、简便，灵敏度高，检出限低，同时能消除仪器噪音影响，结果令人满意。     

基于氧化碳球的上转换荧光传感新方法检测银离子

本文构建了以上转换纳米粒子(Upconversion Phosphors,UCPs)为供体,氧化碳球为受体的荧光共振能量转移新体系用于Ag+的检测。氧化碳球对上转换荧光供体的发射具有良好的猝灭效果,当氧化碳球的浓度达到0.038mg/mL时,猝灭效率最大,达到78%。向该体系中加入Ag+后,在浓度为1～100nmol/L范围内,UCPs的荧光恢复程度与Ag+的浓度呈线性关系。该方法测定Ag+的检出限为0.98nmol/L。本实验首次尝试构建以氧化碳球为受体的荧光共振能量转移(FRET)传感器来检测Ag+,结合了UCPs的上转换发光特性和氧化碳球优良的猝灭能力以及良好的分散性,为Ag+的检测提供了一个新的方法。     

半导体纳米粒子与金纳米粒子间荧光共振能量转移研究

采用水相法合成的CdTe半导体纳米粒子作为能量给体, 通过Schiff碱反应将单链DNA连接到表面. 采用柠檬酸钠还原氯金酸法制取的Au纳米粒子作为能量受体, 通过Au—S键将单链DNA连接到表面. 通过DNA链间的杂交, 构建了荧光共振能量转移体系(FRET). 测定了CdTe-DNA、 探针体系和探针体系+目标DNA的荧光强度. 结果表明, 探针体系的荧光强度最弱, 加入目标DNA后, 体系荧光增强, 表明该体系的构建是成功的.     

基于聚间苯二胺为受体的UC-FRET传感器检测凝血酶

本文以上转换发光材料(UCPs)为供体,聚间苯二胺(PMPD)为受体,构建了基于荧光共振能量转移(FRET)的传感平台,并将其用于凝血酶的检测。一定浓度的PMPD加入到标记单链DNA的UCPs体系中,对上转换发光的猝灭效率可以达到70%。当加入浓度在0.2~5.0nmol/L范围内的目标物凝血酶时,其荧光恢复程度与浓度呈线性关系,检出限为0.18nmol/L。PMPD因其良好的水溶性、荧光猝灭能力及免标记的特点为基于FRET技术的生物样品检测提供了新的平台。     

荧光共振能量转移猝灭法测定加替沙星

在pH=7.00的Britton-Robinson (B-R)缓冲溶液,及十二烷基硫酸钠(SDS)介质中,吖啶橙(AO)-罗丹明 (RB)能够发生有效的能量转移,使RB荧光增强.加替沙星(Gatifloxacin, GTFX)的加入又使得RB的荧光猝灭,据此建立了测定加替沙星的新方法.将此方法用于加替沙星片剂和粉针剂的测定,结果满意.实验表明,该方法简单、快速、灵敏、准确.     

A Highly Selective and Sensitive Ratiometric Fluorescent Probe for pH Measurement Based on Fluorescence Resonance Energy Transfer

Fluorescein-rhodamine 6G(Flu-Rh) was synthesized and used as the fluorescence probe for pH measurement based on fluorescence resonance energy transfer(FRET). In the probe, fluorescein fluorophore and pH-sensitive rhodamine 6G hydrazide were used as FRET donor and acceptor, respectively. The values of acidity constant(pK_a) and fluorescence quantum yield(Φ) of Flu-Rh were 3.71 and 0.72, respectively. The fluorescence efficiency of Flu-Rh remains almost constant when the pH value of the sample solution changed 10 times in a range of 4.78-7.03 continuously. The present probe is simple and easy-to-use for the pH measurement in acidic media.     

荧光共振能量转移猝灭法测定片剂中莫西沙星含量

基于在pH 6.50的B-R缓冲溶液,十二烷基硫酸钠(SDS)介质中,吖啶橙(AO)-罗丹明B(RB)能够发生有效的能量转移,使RB荧光增强,而加入莫西沙星(MXFC)后使得RB的荧光猝灭,且其荧光淬灭程度与莫西沙星的质量浓度在1.00～10.0mg.L-1范围内呈线性关系,据此提出了利用AO-RB荧光共振能量转移,荧光淬灭法间接测定片剂中莫西沙星含量的方法。方法的检出限(3S/N)为0.039mg.L-1。方法用于莫西沙星片剂的分析,测定值与高效液相色谱法测定值相一致,加标平均回收率为99%,相对标准偏差(n=5)均小于0.9%。     

Determination of Salmonella typhimurium by a Fluorescence Resonance Energy Transfer Biosensor Using Upconversion Nanoparticles as Labels

A Salmonella typhimurium (S. typhimurium) biosensor based on a fluorescence resonance energy transfer between upconversion and gold nanoparticles is reported. NaYF₄:Yb,Er nanoparticles were synthesized and modified with a S. typhimurium target DNA complementary sequence to form the sensor. Gold nanoparticles were modified with a S. typhimurium target DNA complementary sequence to constitute the quenching probe. In the presence of S. typhimurium target DNA, gold and upconversion nanoparticles formed a sandwich complex, and the upconversion fluorescence resonance energy transfer occurred. Under the optimal conditions, the relative fluorescence was proportional to the concentration of S. typhimurium target DNA in the range of 0.001 pmol/L to 1 pmol/L with a limit of detection of 1 fM. S. typhimurium was detected from 30 cfu/mL to 5150 cfu/mL with a detection limit of 3 cfu/mL. The procedure was successfully applied to determine S. typhimurium in milk and validated by a traditional plate counting method. The developed upconversion fluorescence resonance energy transfer method is simple, fast, sensitive, specific, and incorporates nanomaterials in biosensor design.     

基于聚多巴胺纳米粒子的荧光共振能量转移法检测microRNA

基于聚多巴胺纳米粒子(PDA NPs)对Cy5标记单链DNA(Cy5-ssDNA)探针的荧光猝灭效应以及脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNaseⅠ)选择性切割DNA/RNA杂合结构中单链DNA的特性,建立了一种用于微小核糖核酸(miRNA)检测的新型恒温信号放大方法.在优化的实验条件下,体系的相对荧光强度(FR)与miR-21浓度的对数值成正比;对miR-21检测的线性范围为10 pmol/L~100 nmol/L,检出限达7 pmol/L.血清加标实验结果表明,该方法可用于生理环境下miR-21的检测.     

胶束溶液中钙黄绿素-荧光桃红间荧光共振能量转移的研究及应用

研究了钙黄绿素-荧光桃红体系的荧光共振能量转移机理及其在蛋白质测定中的应用.实验表明:在聚乙烯醇存在下,于HAc-NaAc缓冲液(pH 5.30)中,钙黄绿素与荧光桃红之间能发生有效的能量转移.根据Frster理论,探讨了钙黄绿素与荧光桃红分子间能量转移机理.结果表明:蛋白质的加入使钙黄绿素-荧光桃红体系发生荧光猝灭...