超高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定蜂蜜中12种糖组分

建立了蜂蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖、松二糖、麦芽酮糖、麦芽糖、曲二糖、异麦芽糖、吡喃葡糖基蔗糖、松三糖、蜜三糖和麦芽三糖含量的超高效液相色谱－蒸发光散射测定方法。试样经去离子水溶解,乙腈定容,用0.22 μm滤膜过滤后,采用Amide色谱柱分离,蒸发光散射检测器检测,外标法定量。在优化实验条件下,12种糖得到良好分离,线性相关系数为0.997 7～0.999 8,果糖和葡萄糖的检测结果与示差折光检测法无显著性差异,其余10种糖的平均回收率为90.0 %～105 %,相对标准偏差为0.70%～5.8%。该方法灵敏度高,准确度高,重复性好,适用于蜂蜜中多种糖组分的同时定量分析。用于72批不同蜜种蜂蜜样品中糖组分的检测,发现中国主要蜜源蜂蜜中普遍含有松二糖、麦芽酮糖、麦芽糖等糖组分。该方法和检测数据可为蜂蜜品质和质量评价提供重要支撑。     

高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定烟草中水溶性糖

采用水浴浸取法提取烟草中的糖,以Zorbax糖分析柱(柱温为30℃)、乙腈:水(80：20,V／V)为流动相和蒸发光散射检测器分离测定烟草中果糖、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖的含量。4种糖在含量80～l000mg／L范围内与其色谱峰面积之间具有良好的线性关系,检出限分别为2．0mg／L,1．6mg／L,1．6mg／L,2．0mg／L。     

高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定蛋黄卵磷脂的含量

建立了蛋黄磷脂中卵磷脂（即磷脂酰胆碱,PC)的高效液相色谱-蒸发光散射检测（HPLC-ELSD）的测定方法。以Nov a-Pak Silica 60A硅胶柱(3.9 mm i.d.×150 mm,4 μm)为分离柱,正己烷-异丙醇-3%冰醋酸水溶液(体积比为35∶65 ∶8)为流动相，等度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温30 ℃。蒸发光散射检测器漂移管温度50 ℃,雾化气(空气)压力350 kPa。在上述条件下测得PC在0.16~1.61 g/L范围内线性关系良好(r2=0.9979),检测限为0.64 μg,方法的精密度为3.2%(n=5),回收率为98.2%~128.2%。将该方法用于实际样品的测定,获得了令人满意的结果。该方 法预处理简单,分析速度快,可用于蛋黄磷脂中卵磷脂的测定。     

高效液相色谱/蒸发光散射检测法同时测定饲料中12种甜味剂

建立了饲料中鼠李糖、木糖、果糖、葡萄糖、甜菊双糖苷、蔗糖、麦芽糖、乳糖、蔗果三糖、棉籽糖、蔗果四糖、水苏糖共12种甜味剂的高效液相色谱同时分离检测方法。采用XB-NH2柱分离,以乙腈-水为流动相梯度洗脱,蒸发光散射检测器进行测定。结果表明,12种甜味剂在0.05~5 g/L范围内均具有良好的线性关系,相关系数为0.996 3~1.000 0,检出限不大于0.04 g/L,方法的回收率为86.6%~112%,相对标准偏差(RSD)为0.5%~6.7%。该方法简单快速,定量准确可靠,适用于饲料中甜味剂的日常检测。     

高效液相色谱-蒸发光散射法测定皂荚壳多糖的单糖组分及其含量

提出了高效液相色谱法测定皂荚壳多糖的单糖组分及其含量的方法。皂荚壳样品经乙醇-水(95+5)溶液提取,滤液经分级沉淀除去蛋白质,过中空纤维膜净化。以ZORBAX Carbohy-drate色谱柱(4.6mm×250mm,5μm)分离,以不同体积比的乙腈和水为流动相进行梯度洗脱,用蒸发光散射检测器检测。鼠李糖、核糖、木糖、阿拉伯糖、果糖、甘露糖、葡萄糖、山梨醇和半乳糖等9种单糖的质量浓度分别在一定的范围内与其峰面积呈线性关系,方法的检出限(3S/N)在0.010～0.048g.L-1之间。采用标准加入法做回收试验,平均回收率在99.3%～101%之间,测定值的相对标准偏差(n=8)均小于0.2%。     

高效液相色谱-蒸发光散射检测器测定五种甾醇含量

建立了一种采用高效液相色谱－蒸发光散射检测器分离、测定五种甾醇含量的方法。该方法采用Supecol Discovery C18色谱柱，以甲醇作流动相，在75－5920ng/L范围内，甾醇峰面积的对数值与其含量对数值间有良好的线性关系，相关系数r的0.9983以上，相对标准偏差RSD小于0.45%，甾醇的平均回收率为98.3%－101％。该法简便，快速，准确可靠。     

高效液相色谱分离-蒸发光散射检测法测定海藻糖的纯度

用反相高效液相色谱法分离－蒸发光散射检测法测定了海藻糖的纯度,检测下限为5mg/L。在30－1000mg/范围内,海藻糖浓度的对数与ELSD测得的峰面积对数具有良好的线性关系。     

超高效合相色谱-质谱法快速分离测定4种单脂肪酸甘油酯

采用超高效合相色谱-质谱(UPC² -MS)技术,建立了一种快速分离植物油单脂肪酸甘油酯中单软脂酸甘油酯、单硬脂酸甘油酯、单油酸甘油酯和单亚油酸甘油酯4种单甘酯的测定方法。以葵花籽油为原料,通过脂肪酶催化甘油解反应制备单甘酯。样品用正己烷/异丙醇(体积比7:3)溶解,采用超临界CO₂-甲醇/乙腈(体积比1:1)梯度洗脱,经ACQUITY UPC² BEH 2-EP(100 mm×2.1 mm,1.7 μm)色谱柱分离,通过质谱检测器在正离子电喷雾模式下对目标化合物进行分析,外标法定量。结果表明,4种单甘酯化合物在线性范围内线性关系良好,线性相关系数(R²)均大于0.9983;目标物的检出限(S/N≥3)为0.036~0.093 mg/L;3个加标水平下的回收率在88.50%~110.00%之间,相对标准偏差为1.01%~4.04%。本方法具有检出限低、分析速度快、分离效果好、分析成本低等优点,为脂肪酸酯类物质的分离测定提供了新的色谱技术平台。     

高效液相色谱-蒸发光散射法测定食品中的单糖、双糖、低聚果糖和糖醇

建立了食品中常用的木糖、果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖、蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖、赤藓糖醇、木糖醇、甘露糖醇、麦芽糖醇等13种单糖、双糖、低聚果糖和糖醇的高效液相色谱同时分离检测的方法。该法采用NH₂色谱柱,以乙腈-水为流动相梯度洗脱,蒸发光散射检测器检测;13种糖在0.1~5 g/L内均具有良好的线性关系,检出限均在0.1 g/L以下,精密度(RSD)为2.69%~7.21%,回收率为96.1%~105.2%,结果较为理想。将该法用于实际样品检测,结果显示食品标签明示和实际成分相差较大。     

高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定番茄中的番茄皂苷A

建立了测定番茄原料中的番茄皂苷A含量的高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD)。将实验条件优化后,运用该方法分离番茄皂苷A。结果表明,该方法在番茄皂苷A的质量为0.61～3.05 mg范围内具有良好的线性相关性(r=0.9995),平均回收率为97.9%～104.8%,相对标准偏差(RSD)≤4.14%(n=5)。该方法快速、准确,样品处理简单,可用于番茄原料及其提取物中番茄皂苷A的含量测定与质量控制。     

高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定烟草中的水溶性糖

采用Waters高效糖分析柱,梯度洗脱分离,建立了高效液相色谱-蒸发光散射检测法（HPLC—ELSD）同时测定烟草中水溶性糖的新方法。乙腈-水为流动相,流速1．0mL／min,柱温30℃,蒸发光散射检测器漂移管温度80℃,氮气作载气,流速2．00L／min。水溶性糖的线性范围：鼠李糖、果糖、葡萄糖、蔗糖0．5—30μg,检出限低于12．5ng;木糖、阿拉伯糖、甘露糖、麦芽糖0．5—20μg,检出限低于25．0ng。8种水溶性糖的加标回收率范围为86．0％～102．4％;相对标准偏差（n=5）皆小于4．1％。     

微流蒸发光散射检测器的研制及评价

构建了适用于纳升级到微升级流量的毛细管分离体系的微流蒸发光散射检测器(μELSD),实现了其与毛细管液相色谱(eLC)的联用.对雾化器孔径和雾化毛细管内径、蒸发管内径和长度、光散射池尺寸、雾化毛细管位置和辅助载气流量等参数进行了优化.在最优条件下,微流蒸发光散射检测器检出限为直接进样葡萄糖1 ng(S/N＞ 10),线性范围0.01～1.0 μg,重复性好,峰面积RSD(n=6)为0.4％,峰高RSD(n=6)为0.3％.本检测器已成功应用cLC-μELSD平台,使用C18毛细管色谱柱(内径250 μm),0.1％甲酸铵溶液(pH 4.5)-甲醇(60∶40,V/V)为流动相,分离检测了3种常用甜味剂,表明本研究构建的系统可以应用于实际分离检测中,具有分析时间快、溶剂消耗量少、样品需求量小的优点.     

Determination of Brassinolide Analogs by High-Performance Liquid Chromatography with Evaporative Light Scattering Detection

An efficient method based on high-performance liquid chromatography with evaporative light scattering detection was developed for the separation and determination of four brassinolide analogs [24-epibrassinolide, (22S, 23S)-24-epibrassinolide, 28-homobrassinolide, and (22S, 23S)-28-epihomobrassinolide] without prior derivatization. The optimized analysis was carried out on a C₁₈ reversed-phase column (150 mm × 4.60 mm, 3 µm) at 30°C using isocratic elution of acetonitrile and water (38:62, v/v). The drift tube temperature of the detector was 60°C and the auxiliary gas (nitrogen) pressure was 360 kPa. The regression equations revealed linear relationships (R² = 0.9984–0.9994) within the test ranges. The limits of detection and quantification were in the ranges of 0.12 to 0.17 µg and 0.24 to 0.33 µg, respectively. The fully validated method was applied to quantify the active ingredient content in technical material and formulations and provides an alternative approach for quality control.     

高效液相色谱/挥发激光散射检测器测定奶粉和鸟粪中的甾体化合物

利用反相高效液相色谱／挥发激光散射检测器发展了分析甾体化合物的新方法,采用甲醇和水溶液为冲洗体系,梯度淋洗,12种甾体类化合物在35min内得到很好的分离。方法简单快速,不需衍生,样品经固相萃取预处理,回收率介于84.0％～102.8％之间,响应值和浓度不呈简单的线性关系,在5～50mg／L浓度范围内对峰面积与浓度进行对数线性回归分析,得回归系数大于0.99。     

高效液相色谱仪蒸发光散射检测器校准用标准物质的选择

对高效液相色谱蒸发光散射检测器(ELSD)校准用标准样品蔗糖–甲醇溶液和对乙酰氨基酚–甲醇溶液进行了研究。实验表明,用蔗糖–甲醇溶液和对乙酰氨基酚–甲醇溶液校准具有ELSD的高效液相色谱仪,其保留时间、峰面积、最低检测浓度3个参数均符合检定校准用标准物质要求。但蔗糖–甲醇溶液色谱峰的对称性差且响应值明显低于对乙酰氨基酚–甲醇溶液,因此用后者作为ELSD检校用标准物质更适合。     

高效液相色谱-蒸发光散射检测器测定食品中胆固醇含量

建立了可满足各类食品（包括动物性食品、动植物混合食品）中胆固醇的HPLC—ELSD快速测定方法。样品经50％（w）KQH直接皂化和石油醚萃取后进行色谱分析。色i普柱为ODS柱,流动相为乙醇和乙脯,通过优化梯度洗脱条件,在20min内实现了胆固醇与干扰物质（如植物甾醇）的有效分离,分离度月大于1．5。胆固醇色谱峰面积的自然对数与浓度的自然对数呈良好的线性关系（r〉0．9996）,检出限（LOD）为0.20μg（S／N=3）,定量下限（LOQ）为0．56μg（S／N=10）,回收率为93％-96％（n=6）,重复性RSD〈3．0％（n=6）。     

应用高效液相色谱-二极管阵列检测器-蒸发光散射检测器联用技术同时测定清开灵注射液中的五类有效成分

建立了复方清开灵注射液中5类主要有效成分的定量测定方法。应用高效液相色谱-二极管阵列检测器-蒸发光散射检测器联用技术(HPLC-DAD-ELSD),根据各类成分紫外吸收光谱的差异,分别在240,254,280和330 nm波长下检测栀子苷、核苷(包括尿苷和腺苷)、黄芩苷和有机酸(包括绿原酸和咖啡酸)等4类成分,同时使用ELSD测定胆酸、熊去氧胆酸和猪去氧胆酸等3种甾体化合物,从而实现了清开灵注射液中5类有效成分(共9个化合物)的同时分离和定量测定。用该法测定了3个不同厂家的19批清开灵注射液成品。该法快速、准确,操作相对简单,为中药复方复杂体系的多组分定量测定和质量控制提供了一种可靠、合理且简便、易行的方法模式。     

高效液相色谱/蒸发光散射法测定多黏菌素类原料药中主成分含量

建立了高效液相色谱/蒸发光散射法测定多黏菌素B和多黏菌素E原料药中主成分含量的分析方法。采用Phenomenex Kinetex Biphenyl色谱柱(50 mm×4.6 mm i.d.,5μm)分离,甲醇和20 mmol/L乙酸铵水溶液(含0.6%甲酸)为流动相,梯度洗脱,流速为0.5 mL/min;蒸发光散射检测器参数为:漂移管温度55℃,气体压力20 psi,增益250。结果表明,多黏菌素B和多黏菌素E在10～200μg/mL质量浓度范围内线性良好,检出限分别为0.8μg/mL和1.2μg/mL,定量下限分别为2.6μg/mL和4.0μg/mL。批内回收率分别为100%～104%和101%～103%,批内相对标准偏差(RSD)分别为0.90%～2.4%和0.90%～2.6%,批间回收率分别为101%～103%和101%～102%,批间RSD分别为1.1%～1.9%和1.3%～1.7%。与微生物检定法相比,该方法简便,能够更准确地反映原料药中目标分析物含量,精密度更高,可用于多黏菌素B和多黏菌素E两种原料药的质量控制。