基质辅助激光解析电离质谱和电喷雾质谱共同快速确证达托霉素结构

运用基质辅助激光解析电离-飞行时间串联质谱(MALDI-TOF/TOF MS)和电喷雾-四级杆-飞行时间质谱(ESI-Q-TOF MS)快速确证环脂肽达托霉素的结构。首先,ESI检测达托霉素相对分子量为1619.7107,与理论值偏差0.0007。选择其双电荷峰m/z 809.848作为母离子进行ESI串联质谱(MS/MS)测定,成功匹配了达托霉素环外氨基酸序列C9H19CO-Trp-Asn-Asp。其次,优化Li OH裂解达托霉素的实验条件,以MALDITOF/TOF MS监测开环效果,获得95%以上的开环样本后,分别运用MALDI和ESI进行MS/MS测定,达托霉素开环产物的b+和y+全部被匹配,达托霉素全部氨基酸序列得到确证。最后,对开环产物的ESI-MS/MS条件进一步优化,获得了丰富的低端碎片离子,解析了脂肪酸链结构,并绘制了脂肪酸链的裂解图。本方法快速、简便、准确,是确证环脂肽类化合物结构的可靠方法。     

应用超滤液相色谱和电喷雾质谱技术筛选MMP-2活性成分

采用超滤液相色谱和电喷雾质谱技术,结合基质金属蛋白酶-2体外抑制实验,对葛根素、大豆苷和大豆苷元3种异黄酮类化合物抑制基质金属蛋白酶-2抑制活性进行了研究.研究结果表明,3种异黄酮类化合物均可抑制基质金属蛋白酶-2活性,其中葛根素抑制基质金属蛋白酶-2活性最强,其次为大豆苷和大豆苷元.     

硅胶柱层析-电喷雾多级质谱快速分析两头尖中的三萜皂苷类成分

建立了电喷雾多级质谱结合硅胶柱层析快速、全面分析中药两头尖中三萜皂苷成分的方法.取两头尖粉末30 g,在60℃下以300 mL 70%甲醇溶液提取6次,合并提取液,减压浓缩得提取物3.3 g,提取物悬浮于20mL,水中,先用乙酸乙酯(20 mL×3)萃取除脂,再用正丁醇(20 mL×6)萃取.取正丁醇萃取物1.5 g进...     

溴化氰裂解结合电喷雾串联质谱测定电泳分离蛋白的C端序列

C端测序是蛋白质及多肽一级结构确认的重要组成部分,也是重组蛋白药物质量控制的重要依据。建立了溴化氰裂解结合电喷雾串联质谱测定蛋白质C端序列的方法,并应用于重组人肿瘤坏死因子受体和纽兰格林的C端测序。首先根据待测蛋白序列进行溴化氰理论裂解,如果C-端肽段理论分子量在500~5000U之间,则将待测样品进行SDS-PAGE分离,考马斯亮兰染色,然后进行胶内溴化氰裂解,最后应用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)测定C-端肽段的分子量,电喷雾串联质谱对C端肽段进行测序。应用本方法分别测定了这两个蛋白质C端19个和11个氨基酸残基序列。研究结果表明:本方法灵敏、有效、实用性较强,可适用于部分重组蛋白药物的质量控制和蛋白质的结构确证,是对目前蛋白质C端测序方法的有效补充。     

HS-SPME/GC-MS结合化学计量学分析不同产地路路通中的挥发性成分

采用顶空固相微萃取结合气相色谱-质谱技术(HS-SPME/GC-MS)分析了不同产地路路通中的挥发性成分,采用正交试验设计优化了影响顶空固相微萃取技术的各项因素,以主成分分析、聚类分析两种化学计量学方法分析评价了8个产地路路通的挥发性成分。优化实验结果为1 g样品量在80℃下提取40 min,解析1 min。8个产地的路路通共鉴定出48种挥发性组分,不同产地的化学成分大致相同,含量差异较大。两种统计分析方法均表明,湖南、江苏、四川、辽宁4个产地的路路通挥发性成分比较相似,贵州、广西、安徽、河北4个产地的路路通比较接近。主成分分析结果表明,氧化石竹烯、δ-杜松烯、橙花叔醇可作为区分两大类路路通的代表性化合物。HS-SPME/GC-MS结合化学计量学方法可以有效地对不同产地的路路通进行质量评价,从而为中药路路通的药物开发和科学栽培管理提供重要参考。     

电喷雾飞行时间质谱与大气压化学电离质谱法分析烟叶中茄尼醇的比较

采用反相高效液相色谱(RP-HPLC-UV)和电喷雾飞行时间质谱(ESI-TOF/MS)、大气压化学电离质谱(APCI-MS),分析烟叶中的茄尼醇.使用反相G4色谱柱,以V(甲醇):V(水)=9:1为流动相,茄尼醇和烟草中的其它成分分离良好;茄尼醇在ESI正离子全范围扫描中主要形成[M-H2O H] 和[M NH4] 离子,只有微弱的[M H] 离子,同时会产生一些碎片离子;而在APCI正离子全范围扫描中主要形成[M-H2O H] 离子,检测不到[M H] 离子,碎片离子也很少;通过对茄尼醇的ESI-TOF/MS和APCI-MS的质谱分析特征比较可以发现,茄尼醇在ESI源分析中的信号强度远远小于在APCI源分析中的信号强度,说明APCI源更适于茄尼醇的定量分析.     

UHPLC/Q-Orbitrap-MS结合化学计量学方法研究酸枣仁入血成分

建立了一种基于超高效液相色谱-质谱联用技术结合化学计量学快速分析酸枣仁入血成分的方法。以腹腔注射对氯苯丙氨酸(PCPA)建立失眠大鼠模型,给药组连续灌胃给予酸枣仁水提物(30 g/kg)5 d后,分别收集模型组和给药组的血清样品。采用Oasis PRIME HLB 96孔板对血清样品预处理,以超高效液相色谱-静电场轨道离子阱质谱(UHPLC/Q-Orbitrap-MS)进行数据采集,最后采用主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)及变量投影重要性分析(VIP)筛选差异性的原型化合物及代谢产物。共鉴定和推断了20个入血成分,包括11个原型成分及9个代谢产物。研究结果为进一步深入探讨酸枣仁改善失眠的效应物质提供了基础。     

液相色谱-电喷雾串联质谱法同时测定蜂胶保健品中的活性成分和降糖西药

采用超高效液相色谱-电喷雾串联四极杆质谱仪(UPLC-ESI-MS/MS)同时测定蜂胶保健品中14种活性成分和9种违禁降糖西药。蜂胶保健品样品用甲醇稀释,超声波提取,样品溶液经高速离心后过滤。使用ACQUITY UPLC C18反相柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm);流动相为0.3%甲酸溶液和乙腈,在梯度条件下分析,目标分析物在多反应监测(MRM)模式下以保留时间和离子对(母离子和两个碎片离子)信息比较进行定性和定量分析。本方法的活性成分检出限(LOD)为0.7～42.0 mg/kg;定量限(LOQ)为2.2～140 mg/kg;活性成分的加标回收率为77.8%～113.6%;违禁降糖西药的LOD为0.1～0.9 mg/kg,LOQ为0.3～2.5 mg/kg;违禁降糖西药的平均回收率为79.3%～108.5%。本方法简便、有效、灵敏,为评价蜂胶保健品质量提供了新的检测方法。     

合成多肽的电喷雾质谱研究

利用电喷雾多极串联质谱对3种合成多肽进行了系统的鉴定和分析研究。首先通过全扫描模式测定了其分子量，然后选择[M H]^ 或[M 2H]^2 离子通过串联质谱(MS／MS)得到碎片离子，采用y离子和b离子互补的方法测定了多肽序列。利用文献数据对这种方法进行了验证，实验结果表明，该方法简便、快速、实用。     

芹菜素的电喷雾萃取电离串联质谱

采用实验室自制的电喷雾萃取电离源(EESI),结合串联质谱(MSn)技术,对芹菜素这一典型的黄酮类活性化合物的质谱行为进行了研究。实验表明,在正、负离子检测模式下,该化合物均能得到较好的EESI-MS信号,且在负离子检测模式下灵敏度更高。通过对比芹菜素的EESI-MS和电喷雾电离质谱(ESI-MS)谱图发现,芹菜素在EESI-MS和ESI-MS中的裂解规律相似,但是EESI是一种比ESI更软的电离模式。根据对芹菜素EESI-MS特征碎片离子的分析,提出了芹菜素在EESI-MS中裂解的基本规律,为EESI-MS技术用于分析、鉴定复杂基质中痕量芹菜素奠定了理论和实验基础。     

草乌中二萜类生物碱的电喷雾串联质谱研究

利用电喷雾质谱技术对传统中药草乌中的二萜类生物碱进行直接分析鉴定.通过实验数据并对比文献发现,草乌中含有单酯型、双酯型、三酯型和脂类等共4种类型生物碱,其中三酯型和脂类生物碱在草乌中为首次发现.由于这些生物碱的结构相似,在电喷雾串联质谱中碎裂方式相同,因此根据电喷雾串联质谱结果确定了这些生物碱的结构.     

有机盐类化合物醋酸钠的电喷雾质谱研究

利用电喷雾质谱技术研究了有机盐类化合物醋酸钠(NaAc)的特征质谱行为,实验结果表明,在全扫描电喷雾正负离子谱中都出现了质量数相差82的质谱峰簇．这与醋酸钠的相对分子质量相一致,正负质谱峰簇分别对应于簇合物离子Na^ (NaAc)n和Ac^-(NaAc)m:簇合物离子的多级串联质谱进一步证明了簇合物离子的存在。该结果为类似结构的盐类化合物的表征提供了一种新的质谱证据。     

刺五加寡糖的电喷雾多级串联质谱研究

采用小柱层析法从刺五加中分离得到刺五加寡糖类系列化合物(刺五加二糖刺五加六糖).实验结果表明,在正离子模式下的ESI-MS谱中,此类化合物呈现出特征的加合离子峰簇[M+Na]⁺/[M+K]⁺或[M+H₂O+Na]⁺/[M+H₂O+K]⁺,可以确定其分子量;在负离子模式下的ESI-MS谱中,刺五加寡糖易形成[M-H]^-/[M+nH₂O-H]^-(n<3).还利用电喷雾多级串联质谱(ESI-MSⁿ)对刺五加三糖进行了系统的研究,推断出刺五加三糖的组成与结构.     

乌头碱的代谢产物去氧乌头碱的生物转化及其电喷雾串联质谱

采用人肠内细菌和乌头碱体外温孵的方法, 探讨去氧乌头碱在人肠内的生物转化. 利用离子阱和傅里叶变换离子回旋共振质谱直接分析去氧乌头碱的转化产物. 乌头类生物碱及其代谢产物在正离子电喷雾质谱条件下形成质子化分子([M+H]+), 通过多级串联质谱进行结构表征. 去氧乌头碱可被人肠内细菌转化, 通过脱酰基、脱甲基脱羟基以及酯化反应产生新型的单酯型、双酯型和脂类生物碱等10余种代谢产物. 双酯型的去氧乌头碱的毒性较高, 当它被肠内细菌转化为单酯型和脂类生物碱时会使其毒性降低.     

电喷雾离子化接口及其在毛细管电泳／质谱法中的应用

论述了ＥＳＩ的工作原理，结构和ＣＥ－ＥＳＩ－ＭＳ的应用。     

Fragmentation of Moxifloxacin and Its Analogs by Electrospray Ionization Time-of-Flight Mass Spectrometry

The fragmentation of patterns of moxifloxacin, 2-N-methylated moxifloxacin (analog 1), and 1-cyclopropyl-6,7-difluoro-8-methoxy-4-oxo-3-quinolinecarboxylic acid (analog 2) were investigated by electrospray ionization quadrupole time-of-flight tandem mass spectrometry in the positive-ion mode. Many unusual ions were detected in the tandem mass spectra of moxifloxacin. Although the structures of moxifloxacin and analog 1 were similar, the relative abundances of products varied greatly. Comparison of the relative abundances of the product ions that lost CO₂ or H₂O and complementary product ions resulting from sequential four-membered hydrogen rearrangement showed that the differences were related to the protonation sites. The loss of HF, probably though the formation of an ion/neutral complex, is of scientific interest. The identities of the major product ions were confirmed by deuterium-labeling experiments that demonstrated an unusual loss of a deuterium atom. The major differences in fragmentation patterns were compared to previous reports in the literature.     

气相条件下金属离子/肽复合物电喷雾串联质谱研究

研究蛋白质与金属离子之间的相互作用的本质一直是生物学家感兴趣的课题。但蛋白结构的复杂性使得二者之间相互作用的研究难度很大,常选用氨基酸或小肽作为模型化合物进行研究^[1-4]。目前该方法的研究甩缺乏系统性。