高效液相色谱-电化学检测法研究大蒜素对百草枯中毒小鼠脑组织中单胺类神经递质含量的影响

建立了单胺类神经递质的高效液相色谱-电化学检测方法,探讨了大蒜素对百草枯中毒小鼠脑组织内的单胺类神经递质及其代谢产物的影响。健康ICR小鼠随机分为4组:正常对照(Con)组、大蒜素(DAS)组、百草枯染毒(PQ)组和大蒜素治疗(PQ+DAS)组,每组6只。PQ组灌胃PQ 35 mg/kg建立中毒模型,Con组和DAS组灌服同体积生理盐水。DAS组和PQ+DAS组小鼠于造模2、26、50 h后腹腔内各注射1次DAS(25 mg/kg),PQ组和正常组小鼠腹腔内注射等量无菌生理盐水。造模12 h后处死小鼠。收集小鼠脑组织样品并称重,处理后进样。色谱分析采用Acclaim 120 C18(150 mm×2.1 mm,3μm)色谱柱,以离子对缓冲盐溶液-甲醇(93∶7,体积比)为流动相,流速为0.27 m L/min;电化学检测器检测,工作电压为450 m V。结果表明,与正常组和DAS组比较,PQ组部分神经递质水平降低;DAS治疗后能够改变上述生化指标的变化;与PQ组相比,PQ+DAS组神经递质含量增高,差异均具有统计学意义(P0.05)。脑组织样品中5-HT、DA、5-HIAA、DOPAC和HVA低、中、高3水平的加标回收率均为79.8%~112.1%,相对标准偏差(RSD)小于10%。实验表明,大蒜素对百草枯中毒后小鼠体内含量降低的神经递质有明显的上调作用。     

大鼠脑组织中不同部位单胺类神经递质含量的HPLC测定

单胺类神经递质,多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NA)和肾上腺素(A)是哺乳动物和人类中枢重要的信息传递物质。了解脑组织中各部位单胺类神经递质的含量对于研究其生理功能、有关疾病的诊断和药物及手术疗效的评价均有重要的意义。     

高效液相色谱同时检测生物样本中8种单胺类神经递质

建立一种快速、准确测定生物样品中左旋多巴(L-DOPA)、去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(E)、多巴柯(DOPAC)、多巴胺(DA)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)、高香草酸(HVA)及5-羟色胺(5-HT)8种递质含量的高效液相色谱- 电化学检测方法.使8种物质在25 min于单一流动相、单流速、单通道检测器情况下达到良好的分离效果.采用ESA MD-150色谱柱 (150 mm×3.2 mm, 3 μm),流动相为50 mmol/L柠檬酸、50 mmol/L无水乙酸钠、0.5 mmol/L 1-庚烷磺酸钠、0.5 mmol/L乙二胺四乙酸二钠、5 mmol/L三乙胺,pH 3.5,在甲醇浓度为5%～10%,流速0.3～0.5 mL/min, 柱温为30 ℃时,都能使8种物质很好分离,其中在甲醇浓度8%,流速0.4 mL/min,检测到前5种物质线性范围为0.005～10 nmol/L; 后3种0.001～10 nmol/L,8种物质相关系数在0.994～0.999之间,检出限在pmol/L水平;回收率在80.3%～102.1%之间,相对偏差在1.4%～4.8%之间.且对样本处理和保存方法进行了探讨.     

UPLC-Q-TOF-MS法测定小鼠大脑中4种单胺类神经递质的含量

建立了超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)对小鼠大脑中的多巴胺(DA)、5-羟色氨(5-HT)、二羟基苯乙酸(DOPAC)和高香草酸(HVA)4种单胺类神经递质的含量进行同时测定。样品以30%乙醇溶液(甲酸调至p H 5.0)匀浆处理后,冷冻离心,过滤。在优化色谱-质谱条件下,采用ESI和APCI复合源,正/负离子扫描方式进行数据采集。4种单胺类神经递质在0.5~1 000μg/L范围内呈良好线性关系,相关系数(r)大于0.999 3,方法的检出限为0.5~5.0μg/L,平均回收率为93.3%~101.8%,相对标准偏差为1.1%~3.3%。该方法具有操作简便、高效快速、回收率良好、灵敏度高、重现性好和准确度高等优点,可用于小鼠脑组织内4种单胺类神经递质的含量测定。     

高效液相色谱-荧光检测法同时测定大鼠不同脑区中的8种单胺类神经递质

采用高效液相色谱-荧光检测法同时测定了大鼠不同脑区中的左旋多巴、去甲肾上腺素、肾上腺素、多巴胺、二羟基苯乙酸、5-羟色胺、5-羟基吲哚乙酸及高香草酸8种单胺类神经递质的含量。样品经组织裂解液(0.60 mol/L高氯酸、0.50 mmol/L Na2EDTA、0.1 g/L L-半胱氨酸的混合水溶液)处理后,冷冻离心得到上清液;上清液中加入高氯酸沉淀剂(1.20 mol/L K2HPO4、2.00 mmol/L Na2EDTA的混合水溶液)处理后,冷冻离心、过滤。在该优化的色谱条件下,8种单胺类神经递质在1.25～5000 μg/L范围内线性关系良好(r＞0.9999),最低检出限在0.20～5.00 μg/L之间,平均回收率在94.83%～99.19%之间,相对标准偏差在0.08%～2.51%之间。该方法具有操作简便、快捷、回收率高、检出限低、分离度好、结果准确可靠等优点,可以用于体内8种单胺类神经递质的同时检测与分析。     

高效液相色谱/电化学法测定大鼠血液和脑组织中单胺类物质的含量

建立了高效液相色谱／电化学检测法测定大鼠脑组织和血液中单胺递质及其代谢产物的方法。能同时测定去甲肾上腺素（NE）、肾上腺素（E）、3,4-二羟基苯乙酸（DOPAC）、多巴胺（DA）、高香草酸（HAV）、5-羟色胺（5-HT）,并能和内标3,4-二羟卞胺（DHBA）分离良好。本方法快速、简便,回收率为92％-105％,线性范围2．8-680ng／mL,检出限为0．05ng（S／N=3）。本方法已应用在服用中药的大鼠下丘脑组织及血液的测定中,数据显示,本法能满足测定要求。     

高效液相色谱法测定小鼠脑组织单胺递质及其相关化合物

采用苯基柱等度洗脱分离,自然荧光检测法,直接测定小鼠脑组织匀浆中单胺递质及其相关化合物。优化出了最佳色谱条件,流动相为２０ｍｍｏｌ／Ｌ柠檬酸三钠（ｐＨ４．５０）－甲醇（９５：５,Ｖ／Ｖ）;柱温为３５℃。该方法能同时检测８种化合物。最低检测限为１．０－２．５μｇ／Ｌ,回收率均在９３５以上;线性范围为１．０μｇ／Ｌ－１．０ｍｇ／Ｌ。     

雄黄对大鼠脑组织中单胺类神经递质及其代谢产物的影响

将32只Wistar大鼠随机分为对照组(口服0.5%羧甲基纤维素钠溶液)以及低剂量(0.3g/kg)、中剂量(0.9g/kg)和高剂量(2.7g/kg)雄黄混悬液处理组,通过4周连续灌胃给服雄黄混悬液;采用高效液相色谱-电化学法测定了大鼠脑组织中单胺类神经递质及其代谢产物的含量,研究了雄黄对大鼠脑组织单胺类神经递质及其代谢产物的影响.结果表明,与对照组比较,雄黄染毒组大鼠脑组织中NE、DOPAC和DA含量均呈增加趋势,而5-HIAA呈降低趋势.雄黄可对大鼠脑组织单胺类神经递质及其代谢产物产生影响,单胺类神经能系统可能是雄黄毒性作用的靶点之一.     

高效液相色谱-脉冲安培检测法测定脑微透析溶液中单胺类神经递质

详细对比了脉冲安培与恒电位安培检测单胺类神经递质的响应值,结果表明冲安培检测上述物质的响应值是恒电位安培检测的1.2倍。建立了以3.4 -二羟基苄胺（DHBA）为内标的定量方法。在微透析溶液中的微量神经递质的回收率在74％－101％之间。     

柴胡皂苷A对抑郁模型大鼠脑中单胺类神经递质及其代谢产物含量的影响

在酸性条件下, 利用高效液相色谱法研究了柴胡皂苷A对抑郁模型大鼠脑中单胺类神经递质及其代谢物含量的影响. 实验结果表明, 柴胡皂苷A可使抑郁型大鼠脑中的高香草酸、去甲肾上腺素、多巴胺及5-羟色胺的含量升高, 这一结果有利于对柴胡皂苷治疗抑郁症的物质基础及相关机理进行更深入了解.     

柱前衍生-高效液相色谱法同时测定血清中氨基酸类及单胺类神经递质

以邻苯二甲醛（o-phthalaldehyde，OPA）为衍生试剂，建立了柱前衍生-高效液相色谱（HPLC）同时测定血清中氨基酸类神经递质牛磺酸（Tau）、谷氨酸（Glu）、甘氨酸（Gly）、γ-氨基丁酸（γ-GABA）和单胺类神经递质多巴胺（DA）含量的分析方法。血清与乙醇以1：2的体积比混合，进行蛋白质沉淀后离心，取其上清液，氮吹至近干。前处理后的样品与OPA进行柱前衍生，衍生化产物采用Luna 5u C18色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）分离，以柠檬酸-乙酸钠缓冲溶液（pH 3.73）为流动相A、乙腈为流动相B进行梯度洗脱，流速为1.0 mL/min，柱温为30℃，检测波长为338 nm。5种神经递质在各自范围内线性关系良好（r²≥0.9866），检出限为0.10~0.40 μmol/L，不同加标水平下目标物的加标回收率为87.57%~115.31%，相对标准偏差均低于7.80%。方法操作简单，灵敏度高，精密度、线性关系和回收率等方法学指标较好，可实现血清中氨基酸类及单胺类神经递质的同时检测。     

雄黄染毒后大鼠脑组织中氨基酸类神经递质含量的变化

研究了雄黄对大鼠脑组织氨基酸类神经递质含量的影响.将32只Wistar大鼠随机分为对照组(0.5%CMC-Na)以及低剂量(0.3g/kg)、中剂量(0.9g/kg)、高剂量(2.7g/kg)雄黄染毒组,通过连续灌胃给予雄黄混悬液两周.采用高效液相色谱-柱前衍生化法测定了大鼠脑组织中氨基酸类神经递质含量的变化.结果表明,与对照组比较,低剂量组大鼠脑组织中丝氨酸、甘氨酸和γ-氨基丁酸含量明显增加.中、高剂量组大鼠脑组织中同型半胱氨酸、谷氨酰胺、丝氨酸和天冬氨酸含量明显比对照组的低.总体而言,雄黄可对大鼠脑组织氨基酸类神经递质产生影响,氨基酸类神经递质可能是雄黄毒性作用的靶点之一.     

高效液相色谱法测定食品添加剂中水杨酸

提出了高效液相色谱法测定食品添加剂中水杨酸含量的方法。样品采用含0.1%(体积分数)甲酸的甲醇-水(9+1)混合溶剂溶解,超声提取后经0.22μm滤膜过滤,滤液供高效液相色谱荧光仪测定。采用ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6mm×250mm,3.5μm)分离,用不同配比的(A)甲酸-乙腈(0.1+99.9)和(B)甲酸-水(0.1+99.9)的混合溶液为流动相梯度洗脱,在激发波长为290nm、发射波长为400nm处检测。水杨酸的质量浓度在41.60～1 664μg·L-1范围内与其对应的峰面积呈线性关系,检出限(3S/N)为1.55μg·L-1,方法的回收率在90.4%～101.7%。     

微渗析活体取样-高效液相色谱电化学检测法测定鼠脑中的单胺类神经递质

采用微渗析活体取样技术和高效液相色谱电化学检测法,测定了鼠脑纹状体中的3种单胺类神经递质多巴胺(DA)、3,4二羟基苯乙酸(DOPAC)和5羟吲哚乙酸(5HIAA)。在3.0×10-8～1.0×10-5mol/L浓度范围内,DA、DOPAC和5HIAA的浓度分别与氧化峰的峰电流呈良好的线性关系。通过在灌流液中加入1.0×10-5mol/L的NO释放剂硝普钠(SNP),研究了NO对DA释放的影响,结果表明:受NO刺激后纹状体中DA的量为基础水平的150%。     

反相高效液相色谱法测定实验动物血液和脑组织中川芎嗪

 用反相高效液相色谱法测定了川芎药材、实验动 物血液和脑匀浆中的川芎嗪,方法简便快速。在270 nm检测波长下,不经浓缩可检测动物体 内1 mg/L的川芎嗪,川芎嗪在5～500 mg/L范围内具有良好的线性关系,线性相关系数为0.99 9。川芎嗪的加标回收率为98%～103％。川芎提取物样品、处理后的动物血清和脑匀浆样品具 有较好的稳定性,室温下可放置1星期。     

高效液相色谱法测定苹果汁中8种酚类化合物

提出了高效液相色谱法同时测定苹果汁中儿茶素、绿原酸、咖啡酸、表儿茶素、香豆酸、阿魏酸、槲皮素和根皮素等8种酚类化合物的方法,并考察了光照、保存时间等因素对酚类化合物的稳定性的影响.选用Eclipse XDB C18色谱柱(150 mm×4.6mm,5μm),以甲醇和乙酸-水(1+99)溶液作为流动相进行梯度洗脱,利用二极管阵列检测器,在各种酚类物质的最大吸收波长下进行紫外光度检测.对各化合物工作曲线的线性范围作了试验,并推导得到相应的线性回归方程,其相关系数均为0.999 9,在苹果汁样品的基础上用标准加入法各进行7次测定,测得平均回收率均在96.0%～100.8%之间,相对标准偏差(n=7)小于等于3.0%,8种化合物的检出限(3S/N)分别为20,10,4,20,5,8,30和7μg·L-1.     

高效液相色谱法测定化妆品中5种荧光增白剂

采用高效液相色谱法测定化妆品中5种荧光增白剂的含量。样品经甲醇超声提取,以C18色谱柱为分离柱,以甲醇和5mmol·L-1四丁基硫酸氢铵溶液以不同比例混合的溶液为流动相进行梯度洗脱,用荧光检测器测定。5种荧光增白剂在一定的质量浓度范围内与其峰面积呈线性关系,方法的测定下限(10S/N)在0.1~2.0μg·g-1之间。以空白样品为基体进行加标回收试验,所得回收率在85.1%~97.1%之间,测定值的相对标准偏差(n=6)在1.4%~5.7%之间。     

反相高效液相色谱法测定大鼠脑组织中高能核苷酸及其代谢物

在缺氧和缺血性疾病中,机体能量代谢障碍的程度可用组织中高能核苷酸及其代谢物的含量变化来反映。3-硝基丙酸(3-NPA)是引起变质甘蔗中毒的主要毒素,它可抑制参与三羧酸循环的琥珀酸脱氢酶,使有氧氧化受阻而导致能量代谢障碍。本文参照Hull-Ryde方法建立了一个重复性好、灵敏度高的高能核苷酸及其代谢物的反相高效液相色谱测定方法,并将它用于3-NPA染毒大鼠大脑皮层中能     

高效液相色谱法测定灭鼠毒饵中溴敌隆

采用紫外检测器波长为265mm，Cl8不锈钢柱，丙酮为溶剂萃取样品中的有效成分，对灭鼠毒饵中的溴敌隆进行了测定。回收率为97．5％-100．6％，相对标准偏差为1．5％-3．6％。     

苯硼酸双柱固相微萃取-超高效液相色谱-串联质谱分析单胺类神经递质

本文构建了苯硼酸双柱固相微萃取-超高效液相色谱-串联质谱分析3种单胺类神经递质的方法.苯硼酸固相微萃取柱以4-乙烯基苯硼酸和甲叉双丙烯酰胺原位聚合法制备,该介质对含有顺式二羟基分子的化合物能够进行特异性捕获,并采取扫描电镜,红外光谱对其进行表征,研究了影响富集的各种条件.在优化条件下,线性度好,相关系数大于0.9971...