十八烷基键合硅胶整体柱的制备及其色谱性能评价

选用十八烷基二甲基氯硅烷作为硅烷化试剂,制备十八烷基反相键合硅胶整体柱,并用元素分析进行了表征。以苯、甲苯、联苯、萘、菲混合物作为测试溶质,在以甲醇和水为二元流动相的反相色谱条件下评价了该键合整体柱的色谱性能,考察了该整体柱适用的pH范围,以及柱压降、柱效与流速的关系。结果表明,该硅胶整体柱键合效果良好,具有较好的反相色谱性能,且在pH 2~8之间稳定性好,柱压降、柱效受流速影响较小,对5种心血管系统用药可以达到快速、有效的分离。     

整体柱的制备方法及其应用

整体柱具有渗透性好、制备简单、无需塞了制作等优点,从而避免了由塞了所引起的问题,已引起人们越来越多的关注。本文对整体柱的制备方法、结构表征及其应用作一评述。     

整体柱制备技术的新进展及其在蛋白质组学中的应用

整体柱是通过在柱管内原位聚合或固化的方法制备得到的具有多孔结构的整体棒状固定相,与传统的填充柱相比,具有通透性好、传质速率快、容易制备等优点,因此在分离分析领域特别是生物分离分析中发挥的作用日益增大。整体柱的制备及应用近年来也得到了快速发展,层出不穷的新型整体柱已被广泛用于色谱高效分离分析、固相萃取及酶反应器等方面,大大推动了分离分析科学的发展。本文主要总结了近五年来整体柱的制备技术及其在蛋白质组学应用中的一些最新研究进展。     

新型连续棒状疏水色谱柱的制备及其色谱性能研究

采用连续棒柱制备技术,制备了一种甲基丙烯酸缩水甘油酯-甲基丙烯酸丁酯-已二酸二甲基丙烯酸酯三元共聚物连续棒疏水色谱柱。考察了聚合条件对聚合物孔结构及介质疏水性的影响。应用该色谱柱对标准蛋白混合样及基因工程药物γ-INF和胰岛素的前驱体Pro-insulin提取液进行了分离纯,效果良好。     

温敏性整体柱的制备及应用研究进展

整体柱是一种用有机或无机聚合方法在色谱柱内进行原位聚合的连续床固定相。将温敏凝胶引入到整体柱体系中制备得到的温敏性整体柱,不仅可以使分离过程调控简单,还可以避免有机溶剂的使用,使整个分离过程绿色环保。文章综述了温敏-普通整体柱、温敏-毛细管柱、温敏-微流控柱、温敏-印迹柱和温敏-磁性柱的制备方法,以及近十五年来温敏性整体柱在核酸、类固醇、金属离子和其他物质分离、富集等方面中的应用。     

溶胶-凝胶技术制备毛细管硅胶整体柱及其应用

采用溶胶-凝胶技术合成硅胶整体柱，研究了不同反应物配比对制备毛细管硅胶整体柱的影响，合成了具有高机械强度和化学稳定性的毛细管硅胶整体柱。通过十八烷基修饰得到反相固定相。考察了电渗流行为和电色谱性能。3种芳香胺和4种苯同系物可达到基线分离，柱效高达159000N／m。     

反相毛细管整体柱的制备及其在多肽混合物分离中的应用

采用甲基丙烯酸月桂酯为基础功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂,正十二醇、1,4-丁二醇及二甲基亚砜为致孔剂,在内径为75 μm的石英毛细管内制备了具有良好机械性能及化学稳定性的反相毛细管整体柱。考察了致孔剂的种类、比例以及交联剂在单体混合物中的比例对柱压和分离效果的影响;以单体15%、交联剂15%、致孔剂70%(均为质量分数)作为优化配方,在70 ℃条件下反应24 h;并对所合成的毛细管整体柱进行了电镜表征,测试了流速、柱长与柱压的关系。结果表明,毛细管整体柱的通透性良好,可通过延长柱长的方法提高分离效果。将所制备的毛细管整体柱装于纳升级高效液相色谱仪上进行牛血清白蛋白及血浆样本的胰蛋白酶酶切液的分离,获得了比较理想的分离效果。     

整体柱的制备及应用进展

对近期不同类型整体柱制备方面的进展情况进行了综述,概括了整体柱应用于不同色谱模式的情况,展望了整体柱的发展趋势。     

原子转移自由基聚合制备三维双连续结构整体柱及其应用

采用原位原子转移自由基聚合的方法,选用二甲基丙烯酸乙二醇酯(EDMA)为单独聚合组分,甲醇和正己烷为二元致孔剂,溴代丙酸乙酯(EBP)作引发剂,以溴化亚铜与五甲基二亚乙基三胺(PDMETA)组成催化体系,制备出具有三维双连续骨架结构的聚合物整体柱。考察了交联剂与引发剂的比例对柱体结构的影响,并采用电子扫描显微镜(SEM)及压汞法对柱体的表面形貌和内部孔径分布进行了表征。该实验还进一步利用柱体表面残留的溴基团,继续引发甲基丙烯酸丁酯发生接枝共聚合,制备了具有疏水表面性质的整体柱,并采用高效液相色谱反相模式对类固醇类药物与蛋白混合物进行分离。     

硅胶为基质的疏水吸附剂的制备及其对牛血清白蛋白的吸附

以硅胶为基质，苯甲酰基为疏水配基，采用有机硅烷活化法制备疏水吸附剂。研究了牛血清白蛋白（BSA）的吸附平衡行为，探讨了活化时间、活化介质对硅胶活化程度的影响，测定了不同盐浓度下的平衡等温线，讨论了配基来源、温度对吸附剂疏水性的影响。     

聚(St-DVB)型整体柱的制备及其对蛋白质的色谱分离性能

苯乙烯(St)为单体,二乙烯基苯(DVB)为交联剂,在致孔剂甲苯和十二醇存在下,直接以Ф4.6×50mm色谱柱管为模具,同时在整个反应过程中通过氩气对反应混合物施加一个恒定的压力,通过原位聚合制备了聚(苯乙烯-二乙烯基苯)(PSD)型整体柱。在聚合过程中对反应混合物施加一定的压力,使制备的整体柱表面光滑无凹痕现象,并且使柱子的两头平整不凹陷,有利于提高柱效。本文对整体柱的孔结构及其对蛋白质的分离性能进行了研究。实验结果表明,整体柱内部含有大量类似渠道的大孔,孔径为2μm~3μm,在流速为5ml/min时,背压为7MPa。而且流速对色谱分离效率的影响小,流速从1ml/min增大到3ml/min时,牛血清白蛋白和溶菌酶这两种蛋白质的总分离效能指标K1的值基本保持不变,保持在3.35左右,说明可以通过提高流速实现蛋白质的快速分离。     

新型固液双重致孔球形离子交换剂的制备及其性能研究

以甲基丙烯酸缩水甘油酯为单体 ,采用固液联合致孔方式 ,通过一步悬浮聚合制备了一种新型双孔高分子球形载体 .经化学修饰后 ,得到含二乙胺羟丙基的阴离子交换剂 (介质A) .优化了制备条件 .并与用相同方法制备的但仅含有机溶剂致孔剂的介质B进行了比较 .介质A和B均具有较高的静态吸附容量和机械强度 .由于介质A内含有流动相可以对流通过的大孔 ,因此其动态吸附容量远高于介质B ,并且在较高的流速下表现出较好的色谱流动性能     

包埋于PLGA膜中的BSA海藻酸钙微球的制备及其释放行为

在组织工程中，为了促进和调节细胞在细胞支架上的增殖和分化，一些特殊的生物活性分子(生长因子(Growth Factor，简称GF))，必须引入支架．这些生长因子是一类具有诱导和刺激细胞增殖、维持细胞存活等生物效应的多肽蛋白类物质，因此，在组织工程研究中，生长因子是三个重要因素之一，     

Facile, sensitive and selective fluorescence turn-on detection of HSA/BSA in aqueous solution utilizing 2,4-dihydroxyl-3-iodo salicylaldehyde azine

A novel fluorescence turn-on detection method of human serum albumin (HSA) and bovine serum albumin (BSA) in aqueous solution is investigated using 2,4-dihydroxyl-3-iodo salicylaldehyde azine (DISA). Upon the addition of DISA to HSA/BSA solution, a fluorescence turn-on effect at 529 nm can be observed with a large stokes shift of ∼129 nm based on hydrophobic binding-mode between protein and dye. Under the optimal condition, the linear ranges of fluorescence intensity for HSA and BSA are 0.1-30 μg mL⁻¹ with the relative correlation coefficient of R² = 0.991 (n = 10) and 0.3-50 μg mL⁻¹ with R² = 0.997 (n = 10); and the detection limits for HSA and BSA based on IUPAC (C_DL = 3S_b/m) are 20 ng mL⁻¹ and 50 ng mL⁻¹, respectively.     

牛血清白蛋白手性毛细管整体柱的制备及对映体的分离

A silica-bonded bovine serum albumin (BSA) chiral monolithic stationary phase for capillary electrochromatography(CEC) was introduced. An inorganic-organic hybrid monolithic column was firstly prepared by sol-gel chemistry with homogeneously distributed aminopropyl groups throughout the silica matrix. Then the chiral stationary phase was synthesized by the in situ covalent immobilization of BSA on the monolithic column activated with glutaraldehyde. The effects of pH value and concentration of phosphate buffer on the separation of D,L-tryptophan were investigated. The separation factor of D,L-tryptophan reached 3.37 on CEC mode.     

荧光光谱法研究橙皮甙与牛血清白蛋白的相互作用

在pH7.40的Tris-HCl 缓冲体系中,采用荧光光谱技术研究了橙皮甙与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用.随着温度升高,橙皮甙与BSA 的猝灭常数逐渐增加.实验表明:橙皮甙对BSA的荧光猝灭为动态猝灭过程.由热力学参数焓变(△H=70.71 kJ/mol)大于零和熵变[△S=316.29J/(mol·K)]大于零,...     

含氟两亲接枝共聚物的制备及其与牛血清蛋白作用的研究

用端基反应法合成了对乙烯基苄基的聚乙二醇大分子单体,将该大分子单体与甲基丙烯酸六氟丁酯共聚,合成了一种含氟两亲接枝共聚物.利用1H-NMR1、9F-NMR、GPC对大分子单体和两亲接枝共聚物进行了表征.表面张力法测定了两亲接枝共聚物的临界胶束浓度,发现随着共聚物中含氟链段含量的增加,其临界胶束浓度降低.采用荧光光谱研究了含氟两亲接枝共聚物与牛血清蛋白(BSA)的相互作用,结果表明由于含氟链段疏水力的作用,含氟两亲接枝共聚物能与牛血清蛋白发生相互作用使其荧光增强,随着含氟两亲接枝共聚物浓度和共聚物中含氟链段含量的增加,荧光增强幅度加大.通过透射电子显微镜(TEM)和激光光散射粒度仪(PCS)测试发现,当BSA加入到含氟两亲接枝共聚物的胶束溶液后,所得胶束的粒径和粒径分布变大,共聚物胶束由规整的实心核壳结构变为囊泡状核壳结构.     

高交联双酯树脂制备、表征及性能研究

聚双甲基丙烯酸乙二醇酯(PEGDMA)大孔吸附树脂是一类含酯基的中极性吸附剂,通过调节致孔剂的种类和比例,制备了一系列均聚PEGDMA及EGDMA-DVB共聚物双酯树脂.用简易BET低温氮吸附法测定了树脂的比表面积.结果表明,甲苯作致孔剂制备的PEGDMA树脂比表面积在单体:致孔剂(体积比)为1:1~1:2时变化不大,甲苯致孔剂量增大所得树脂在各种溶剂中的溶胀率增大;EGDMA-DVB共聚物双酯树脂的比表面积随DVB量增加稍有下降.以苯酚和苹果多酚为吸附质研究了该系列树脂对极性有机分子的吸附行为与吸附机理,静态吸附等温线数据分析结果表明,制备的树脂与2种商品树脂(XAD-7和HP2MG)比较,树脂ED2-T对苹果多酚的平衡吸附量超过了商品树脂,初始浓度Co=1.1935mg/mL时,ED2-T树脂的平衡吸附量为135mg/g,XAD-7和HP2MG分别为113mg/g和120mg/g.树脂对苹果多酚的吸附等温线与Langmuir方程拟合较好,对苯酚的吸附Freundlich方程拟合得更好.