棘孢木霉GH11家族木聚糖酶的异源表达及酶学性质

从棘孢木霉(Trichoderma asperellum)中克隆得到一个糖苷水解酶(glycoside hydrolase,GH)11家族木聚糖酶基因TaXyn11A,并在大肠杆菌中进行了异源表达。该基因含有一个672bp的开放阅读框,编码223个氨基酸,编码的蛋白与来自哈茨木霉C4(Trichoderma harzianum)的GH11家族木聚糖酶xynⅡ(NCBI accession No. B5A7N4.1)的同源性为85.2%。粗酶液经Ni-NTA亲和层析一步纯化得到电泳级纯酶(TaXyn11A),该酶分子质量为24.2kDa。研究了纯酶的酶学性质,结果表明:TaXyn11A为酸性中温木聚糖酶,最适pH值和最适温度分别是5.0和50℃,在pH值为4.0~10.0时和45℃及以下保持稳定,45℃时半衰期为14.3h。EDTA、Mn²⁺和Cr³⁺对该酶有激活作用,而SDS和CTAB对该酶有抑制作用。底物特异性及水解特性分析表明:TaXyn11A可特异性水解燕麦木聚糖、小麦阿拉伯木聚糖、榉木木聚糖和桦木木聚糖等木聚糖底物,比酶活力分别为989.6、727.6、706.0、484.5U·mg-1,水解12h后,产物以聚合度为2~6的低聚木糖为主。这些优良的酶学特性使TaXyn11A在低聚木糖生产中具有潜在应用价值。     

防治西洋参立枯病木霉菌株的筛选鉴定及其小区防治效果

摘要：利用平板对峙实验及小区试验,筛选高效防治西洋参立枯病的木霉菌株,并采用ITS（internal transcribed spacer)序列分析与形态学特征相结合的方法进行种类鉴定。结果表明,供试木霉菌株在PDA平板上对立枯丝核菌(R. solani)均有抑制作用,菌株HB20111效果最好,抑制率达99.33%;菌株HB20111对西洋参立枯病的小区效果显著,与其他处理间存在显著性差异(P<0.05);第1年拌种处理对西洋参立枯病的防治效果、单株参增重率及总参增重率分别达71.81%、33.54%和92.75%;第2年蘸根处理对西洋参立枯病的防治效果、单株参增重率及总参增重率分别达91.04%、158.06%和1 369.34%;菌株HB20111的分生孢子梗为典型的单侧分枝,其他形态学特征同深绿木霉(T. atroviride)一致,ITS序列与T. atroviride同源性达100.0%,将菌株HB20111鉴定为T. atroviride。HB20111生长速度快,产孢能力强,生防效果高,有望替代化学杀菌剂应用于西洋参种植中。     

绿色棘孢木霉菌株固体发酵条件优化及其生物学特性的农业应用

木霉菌对大多数植物病原菌具有拮抗作用,可利用简单和复杂的碳源氮源,甚至有转化和降解一些有害或持久存在的污染物的能力．产生的多样拮抗,有竞争,重寄生作用,产生抗生素和溶菌酶具有寄生的广谱性,有较高的抑制性,会对灰霉菌引起菌丝变形和消解,同时又不产生抗生物质,减少有效元素的老叶固定以提高氧化还原能力等植物内在生理的角度,提高化肥的利用率和有机肥的速效性,并对植物自身吸收的运转能力,增加植物体内营养物质的吸收和利用。对人和动物无毒害,对于解决降低农产品亚硝酸盐含量的三农困扰的新课题有重要意义,同时在植物生物学生仿领域的开发和利用也有很大的价值。     

木霉对腐霉菌的拮抗机制及生防效果研究

利用本研究室从土壤中分离出的木霉（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ　ｓｐ．）菌株Ｔ４１,通过对峙法对腐霉菌进行了体外拮抗作用测定和评价［１］。并对木霉的竞争、重寄生、抗生、溶菌等拮抗机制进行了初步探讨和研究,同时,利用制备的木霉菌剂,对黄瓜猝倒病进行了室内盆栽生防试验。结果表明：木霉 Ｔ４１防治效果达 ８０％,而且具有防效长久和刺激作物生长的作用。     

绿色木霉TW-3菌株对绿豆立枯病的生物防治

通过盆栽和大田试验测定了绿色木霉(Trichoderma viride)TW-3菌株对幼苗期绿豆立枯病(Rhizoctonia solani)的生防效果,结果发现TW-3菌株可以有效防治绿豆立枯病,防治效果分别为87%～94%和81%～94%,优于多菌灵拌种的防治效果.利用平板法初步研究TW-3对绿豆立枯病菌的作用机制,发现TW-3菌株通过菌丝间缠绕,抑制绿豆立枯病菌的生长,表明重寄生作用在生物防治中具有重要作用.     

木霉及其制剂对棉花真菌病害的防治效果

在盆栽条件下,9个木霉菌株对棉花丝核菌立枯病的防治效果为39．71％-82．35％,14个菌株对棉花枯萎病的防治效果为37．5％-75．00％,9个菌株对棉花黄萎病的防治效果为30．49％-65．85％。制备了绿色木霉LTR-2的可湿性粉剂,田问条件下处理种子及灌根,菌剂对棉花枯萎病的防治效果达50．1％-80．0％。     

药剂处理对北苍术的抑花效果及对根茎干物质质量和苍术素质量分数的影响

为了确定药剂处理对北苍术抑花效果、根茎干物质质量和苍术素质量分数的影响,选用抑芽丹、乙烯利、桔梗奇肥、萘乙酸、石硫合剂、抑花一号等6种药剂喷施处理4年生北苍术植株,并以喷施清水为对照(CK)。结果表明：(1)现蕾期喷施：76.92 mL/L的石硫合剂灰色关联度综合评价值最高,为1.108 9,其单株抑花率达70.41%,根茎干物质质量极显著高于CK,为72.01 g/株,苍术素质量分数为0.36%,高于《中华人民共和国药典》(以下简称《中国药典》)标准。(2)现蕾期+初花期喷施：24.39 mL/L的石硫合剂综合评价值最高,为1.265,其群体抑花率为74.60%,根茎干物质质量达到97.50 g/株,极显著高于其他处理,苍术素质量分数为0.36%,高于《中国药典》标准。(3)初花期喷施：400乙烯利处理综合评价值最高,为1.060 4,其单株抑花率最高达92.03%,根茎干物质质量为92.77 g/株,苍术素质量分数为0.31%,高于《中国药典》标准。综合分析表明,喷施药剂处理后抑花效果显著,现蕾期+初花期喷施24.39 mL/L的石硫合剂抑花效果最好,根茎干物质质量最高,是CK的1...     

拟康氏木霉胞外多糖对番茄灰霉病的诱抗作用及对几种防御酶活性的影响

喷施不同浓度(50-600mg/L)的拟康氏木霉的胞外多糖后,番茄灰霉病的发病率明显降低．与植物系统抗性相关酶苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)的活性显著升高,上升幅度随多糖的浓度增加而递增,多糖浓度达到200mg/L以上时增加趋缓．酶活性在3—4d达到最高,之后有所下降,但仍高于对照．当多糖浓度为200mg/L时,3种酶的最高活性分别比对照高出123％、146％和102％．体外试验未发现该多糖对灰霉菌的生长有抑制作用,表明灰霉病发病率的降低可与多糖诱导系统抗性有关．     

纸浆浓度及分批补料对里氏木霉产纤维素酶的影响

研究了摇瓶中不同浓度纸浆为碳源对里氏木霉产纤维素酶的影响.结果表明:最佳的碳源质量浓度为12g/L,在此条件下第3天的滤纸酶活、CMC酶活和β-葡萄糖苷酶酶活分别为1.68、0.96和0.28U/mL.总碳源为15g/L下采用分批补料技术可以有效提高里氏木霉分泌纤维素酶.使用起始纸浆浓度为9g/L,第2、3、4天分别加入2g/L纸浆,其第3天的滤纸酶活、CMC酶活和β-葡萄糖苷酶酶活分别为2.41、0.72和0.27U/mL,较15g/L纸浆为碳源分批培养滤纸酶活提高1.8倍.     

木霉T11-W及苹果枝条木屑对黄瓜幼苗生长的影响

为探寻苹果树修剪枝条资源化快速利用的方法,以黄瓜（津研四号）为试材,分别测定了苹果枝条培养木霉T11-W后(处理木屑)和同时添加木霉对盆栽黄瓜幼苗生长发育的影响,并与不同添加量的未处理苹果枝条（原木屑）处理和单独木霉T11-W处理进行对比。结果显示：单独木霉T11-W处理对黄瓜幼苗生长促进效应最为显著;原木屑质量分数为0.7%时,添加木霉可改善其对根长的抑制,并能进一步提高根的干物质量;木霉+木屑处理(处理木屑或原木屑)综合评价虽不如单独木霉T11-W处理,但根冠比最高;原木屑处理用量0.35%时,对黄瓜幼苗生长的综合促进作用弱于空白对照,用量0.7%时,促进作用高于空白对照,表明原木屑添加量大,利于黄瓜幼苗生长;木屑在0.35%使用量时,处理木屑对黄瓜幼苗的促生长作用优于原木屑处理。     

木霉对核盘菌胁迫下莴笋生理特性及生防效果的影响

为探究哈茨木霉(Trichoderma harzianum Rifai)和绿色木霉(Trichoderma viride Pers)对菌核病的防治效果差异及其对作物的生理调节作用,在单因素实验结果的基础上,采用响应面法获得菌株最佳发酵条件.以莴笋(Lactuca sativa L.)品种‘碧玉’为材料,探究核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum(Lib) de Bary)处理下,哈茨木霉和绿色木霉对莴笋各项生理指标、病情指数及生防效果的影响.结果表明：2种菌株发酵液均能缓解莴笋菌核病,提高植物抗逆性,在接种9 d时,哈茨木霉组的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性均达到最高;核盘菌处理下莴笋叶片丙二醛(MDA)与脯氨酸(Pro)含量最高,施加木霉后明显下降,最大降幅分别为26.91%和31.47%;在处理15 d时,木霉组间的叶绿素荧光参数F_v/F_m(暗适应PSII最大量子产量)差异显著(P<0.05),增幅相差9.00%;哈茨木霉对菌核病的防治效果为64.17%,绿色木霉和多菌灵分...     

湿度对交织顶孢霉孢子萌发及对六星黑点豹蠹蛾致病力的影响

测定在不同湿度下对交织顶孢霉(Acremonium implicatum(Miller et al.)Gams)孢子萌发率及对六星黑点豹蠹蛾(Zeuzera leuconotumButler)幼虫的致病力的影响.结果表明:随着相对湿度的增大,孢子萌发速度、萌发率也增高.相对湿度为100%时,72 h孢子萌发率达到90%以上,相对湿度低于75%时,孢子萌发明显受到抑制.在相对湿度为(95±5)%时,交织顶孢霉对六星黑点豹蠹蛾幼虫的致死效果最好,校正死亡率和僵虫率分别为90.04%和70.00%,此时的致死速率也最快,致死中时(LT50)为6.368 d;相对湿度低于(65±5)%时,六星黑点豹蠹蛾幼虫校正死亡率和僵虫率显著降低,LT50均在20 d以上.