Determination of furosine as a measure for irreversibly bound glucose in human fibrinogen

Summary An analytical procedure is presented which enables for the determination of irreversibly, nonenzymatic glycation of fibrinogen isolated from human blood. The method is based on determination of furosine, which is formed during hydrolysis of Amadori-products. For validation of the worked out furosine assay, synthesis of N-formyl-N-(desoxy-1-D-fructosyl-1)-Llysine as a model substance and furosine as a calibration standard were necessary. Several hydrolysis experiments showed the extent of furosine formation from fructosyllysine and from human fibrinogen. The increase of fibrinogen glycation by incubation withD-glucose could also be confirmed according to the literature. Using well-known techniques for sampling, work up and in performing reduction and hydrolysis steps, quantitative determination of furosine by high-performance liquid chromatography is possible. By application of the analytical assay, the extent of glycation of human fibrinogen can be analyzed with good precision. Calibration is performed by means of a prepared furosine standard. The practical handling of the method is shown.

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Bestimmung von Furosin als Maß für irreversibel gebundene Glucose in Human-Fibrinogen

Zusammenfassung In der vorliegenden Arbeit wird ein Analysenverfahren vorgestellt, das eine Bestimmung der irreversiblen, nichtenzymatischen Glucosylierung von Fibrinogen aus menschlichem Blut ermöglicht. Die Methode beruht auf der Bestimmung von Furosin, welches während der Hydrolyse von Amadori-Produkten gebildet wird. Für die Validierung der erarbeiteten Furosin-Methode waren die Synthese von N-Formyl-N-(desoxy-1-D-fructosyl-1)-L-lysin als Modell und von Furosin als Eichstandard erforderlich. In Hydrolyseversuchen wurde das Ausmaß der Furosinbildung aus Fructoselysin und Fibrinogen untersucht. In Übereinstimmung mit der Literatur wurde gezeigt, daß es möglich ist, den Glucosylierungsgrad von Fibrinogen durch In-vitro-Inkubation mitD-Glucose zu erhöhen. Die Fibrinogengewinnung aus Blut erfolgte mit bekannten Techniken der Probenahme und Aufarbeitung. Durch Reduktions- (Reaktionsblindwert) und Hydrolyseschritte ist es möglich, Furosin flüssigkeitschromatographisch (UV-Detektion) quantitativ zu erfassen. Durch Anwendung dieses Analysenverfahrens kann das Ausmaß der Glucosylierung von menschlichem Fibrinogen mit guter Reproduzierbarkeit vergleichend erfaßt werden. Die Kalibrierung erfolgt gegen den synthetisierten Furosinstandard. Die praktische Durchführbarkeit wurde gezeigt.

     

Interferences of hydride forming elements and of mercury in the determination of antimony, arsenic, selenium and tin by hydride-generation AAS

Summary By means of the radiotracer technique supplemented by conventional absorption measurements, the interferences of As, Bi, Hg, Pb, Sb, Se, Sn and Te in amounts between 10 g and 1 mg with the determination of As, Sb, Se and Sn by hydride generation AAS using heated quartz tube were investigated during the hydride-generation and the atomization stages. Amounts up to 100 g of Hg and Pb do not cause any detectable interference. The interference of Bi and Te is dominant in the hydride-generation stage and that of As, Se, Sb and Sn in the atomization stage. Tin is retained to a considerable extent in the quartz tube and the resulting memory effect makes the determination of As, Sb, and Se impossible. In the absence of interfering elements, the efficiency of the formation of hydrides of As, Sb, Se and Sn was close to 100%. However, a reduction of Sb(V) to Sb(III) prior to the hydride-generation is necessary for which an improved procedure was developed.

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Störungen von Hydridbildnern und von Quecksilber bei der Bestimmung von Antimon, Arsen, Selen und Zinn durch die Hydrid-AAS

Zusammenfassung Mittels der Radiotracertechnik und Atomabsorptionsspektrometrie wurde der Störeinfluß unterschiedlicher Mengen (10–1000 g) von As, Bi, Hg, Pb, Sb, Se, Sn und Te auf die Bestimmung von As, Sb, Se und Sn mit der Hydrid-AAS untersucht. Durch diese Verfahrenskombination war es möglich, das Ausmaß der Störungen durch diese Elemente sowohl im Hydrierungs- als auch im Atomisierungsschritt zu bestimmen sowie zum großen Teil auch die Gründe für ihr Auftreten aufzuklären. Keine nachweisbare Störung verursachen Hg und Pb bis zu jeweils 100 g. Die Störung durch Bi und Te tritt hauptsächlich im Hydrierungsgefäß auf, hingegen die durch As, Sb, Se und Sn im wesentlichen in der Quarzabsorptionszelle. Bei Zinn wurde ein starker Memoryeffekt festgestellt, der aus der Ablagerung dieses Elements in der Quarzküvette resultiert und der die Bestimmung von As, Sb und Se völlig unmöglich macht. Ohne diese Störelemente liegen die Hydrierungsausbeuten für As, Sb, Se und Sn bei nahezu 100%. Bei Antimon ist allerdings eine vorherige Reduktion von Sb(V) zu Sb(III) notwendig, für die ein verbessertes Verfahren vorgeschlagen wurde. Denn durch die Radiotracertechnik konnte nachgewiesen werden, daß die während der Alterung von Sb(V)-Lösungen durch Kondensationsprozesse entstehenden Polysäuren nicht mehr hydriert werden können.

     

Lumineszierende Cu(I)- und Ag(I)-Cluster mit Thionoliganden

Zusammenfassung Cu(I) bildet mit zahlreichen nicht lumineszierenden Thionoliganden (N-monosubstituierten N-Sulfonylthioharnstoffen, N,N-Dialkyl-N-phenylthioharnstoffen und N,N-Dialkylmonothiocarbamaten) rot lumineszierende oktaedrische Cluster (CuL)₆. Die Lumineszenz tritt sowohl im Festzustand als auch in Lösungen auf. Abklingzeiten von 10^–5s deuten auf kurzlebige Phosphoreszenz hin. Der Einfluß verschiedener Strukturelemente auf die Lage der Emissionsmaxima wird diskutiert. Dabei bewirken Veränderungen in der Metall-Ligand-Koordination die stärkste Verschiebung der Lumineszenzbanden. Tetraedrische (CuL)₄-Cluster mit den obigen Thionoliganden zeigen keine Lumineszenz. Generelle Unterschiede in der Struktur oktaedrischer und tetraedrischer Cluster werden diskutiert.Ag(I) bildet nur mit N-Alkyl-N-sulfonylthioharnstoffen lumineszierende Cluster (AgL)₆. Die Lumineszenz ist im Gegensatz zu den Cu-Clustern auf den Festzustand beschränkt.

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Luminescent Cu(I) and Ag(I) clusters with thiono ligands

Summary Octahedrical (CuL)₆ clusters with several non luminescent thiono ligands (N-monosubstituted N-sulfonylthioureas, N,N-dialkyl-N-phenylthioureas and N,N-dialkylmonothiocarbamates) show red luminescence in the solid state and in solution. The luminescence lifetimes of 10^–5s are typical of short lived phosphorescence. The emission bands are affected by structural variation of the ligand. Changes of the coordination bonds cause the strongest shifts of the luminescence maxima. Tetrahedrical (CuL)₄ clusters with the same thiono ligands are not luminescent. General structural differences between octahedral and tetrahedral clusters are discussed.(AgL)₆ clusters are only luminescent in the solid state and if the ligand is a N-monosubstituted N-sulfonylthiourea

     

The effects of solute-solvent interactions on the electronic visible spectra of bis(β-diketonato)oxovanadium(IV) complexes

Summary The solvatochromic behaviour of bis(-diketonato)oxovanadium(IV) complexes is quantitatively correlated by an approach that models specific and non-specific solute-solvent interactions. The applicability of the Selbin-Gutmann relation is discussed. The solvent-induced spectral shifts in VO(acac)₂ are dominated by specific interactions of the donor-acceptor type, whereas for VO(tfa)₂, the nonspecific solute-solvent interactions make the dominant contribution.

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Der Einfluß von Wechselwirkungen zwischen Lösungsmittel und gelöstem Stoff auf die VIS-Spektren von Bis(-diketonato)oxovanadium(IV)-Komplexen

Zusammenfassung Das solvatochrome Verhalten von Bis(-diketonato)oxovanadium(IV)-Komplexen wird mit einem Modell, das spezifische und nichtspezifische Wechselwirkungen in Lösung berücksichtigt, quantitativ beschrieben. Es wird die Anwendbarkeit der Selbin-Gutmann-Relation diskutiert. Die Solvens-induzierten Verschiebungen in den VIS-Spektren von VO(acac)₂ werden von den spezifischen Wechselwirkungen vom Donor-Acceptor-Typ bestimmt, währenddessen für VO(tfa)₂ die nichtspezifischen Wechselwirkungen zwischen Substrat und Lösungsmittel den dominierenden Beitrag liefern.

     

Solvent effects on the electronic spectra of oxovanadium(IV) β-diketonates comments on the papers of ebraheem et al.

Summary Solvent effects on the electronic absorption spectra of oxovanadium(IV) -diketonates are discussed. It has been found that positions of the long-wave-length bands can be described in terms of the donor-acceptor concept including the donor numbers and the acceptor numbers.

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Lösungsmitteleffekte bei den Elektronenspektren von Oxovanadium(IV)--diketonaten. Kommentar zu den Arbeiten von Ebraheem et al. (Kurze Mitt.)

Zusammenfassung Es werden Lösungsmitteleffekte bei den Elektronenspektren von Oxovanadium(IV)--diketonaten diskutiert. Dabei wurde gefunden, daß die Lage der langwelligen Banden auf Basis eines Donor-Akzeptor-Modells unter Berücksichtigung der Donor- und Akzeptor-Nummern beschrieben werden kann.

     

Gammaspektrometrische Schnellbestimmung von Thorium in Wolfram-Schwei?elektroden

Zusammenfassung Die Methode wurde für ThO₂-Gehalte von 1–5% in stabförmigen Wolfram-Schweiß-elektroden ausgearbeitet. Die gammaspektrometrische Aktivitätsmessung kann unter Verwendung eines einfachen Einkanal-Gammaspektrometers mit NaJ (Tl)-Bohrlochkristall erfolgen. Der günstigste Meßbereich umfaßt-Energien von 30–500 keV. Eine Zählzeit von 5–40 sec ist je nach ThO₂-Gehalt und Elektrodendurchmesser ausreichend. Chemische Eichanalysen für aus verschiedenen ThO₂-Chargen hergestellte Elektroden sind unerläßlich. Brauchbare Messungen werden erst 1 Woche nach der Sinterung der Elektroden erhalten. Dies erscheint jedoch für die Endkontrolle auszuliefernder Elektroden unwesentlich. Untersuchungen betreffend die radiale und axiale ThO₂-Verteilung an verschiedenen Elektroden wurden durchgeführt. Dank. Für wertvolle Diskussionen sowie für die Aufnahme von-Spektren mit hoher Auflösung sind wir Herrn Dr. Danneberg der Osram Studiengesellschaft in München zu aufrichtigem Dank verpflichtet, ebenso Herrn Dipl.-Ing. Christ vom Metallwerk Plansee für seine Rechenhilfe.     

Synthesis and characterization of the complexes of lanthanide(III) chlorides and nitrates with the tetradentate schiff base diethyl(ethylenebis-β-aminocrotonate)

Summary The Schiff base ligand diethyl(ethylenebis--aminocrotonate) (LH₂) reacts with lanthanide(III) chlorides and nitrates in various solvents to give solid complexes of the stoichiometriesLn(LH₂)Cl₃ (Ln=La–Yb),Ln(LH₂)₂Cl₃ (Ln=La–Sm),Ln ₂(LH₂)₃Cl₆(Ln=Eu–Yb) andLn(LH₂)(NO₃)₃ (Ln=La–Yb). Properties, conductivity measurements, X-ray powder patterns, thermal data, magnetic moments and spectroscopic (IR,¹H-NMR, electronic diffuse reflectance and solid state emission f-f spectra) are discussed in terms of the nature of the bonding and the possible structural types.

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Synthese und Charakterisierung der Komplexe von Lanthanid(III)chloriden und -nitraten mit der vierzähnigen Schiff-Base Diethyl(ethylenbis--aminocrotonat)

Zusammenfassung Der Schiffbasen-Ligand Diethyl(ethylenbis--aminocrotonat) reagiert mit Lanthanid(III)chloriden und -nitraten in verschiedenen Lösungsmitteln unter der Bildung von festen Komplexen der StöchiometrienLn(LH₂)Cl₃ (Ln = La – Yb),Ln(LH₂)₂Cl₃ (Ln = La – Sm),Ln(LH₂)₃Cl₆ (Ln = Eu – Yb) undLn(LH₂)(NO₃)₃ (Ln = La – Yb). Die allgemeinen Eigenschaften, Leitfähigkeitsmessungen, Röntgen-Pulverdiagramme, thermische Daten, magnetische Momente und spektroskopische Daten (IR,¹H-NMR, Elektronenreflexionsspektren und Festkörperemissions-f-f-Spektren) werden im Hinblick auf die Bildungsverhältnisse im Komplex und strukturelle Möglichkeiten diskutiert.

     

Reaction of pyridoxal 5′-phosphate with TRIS

Kinetic and equilibrium studies are presented on the reaction of pyridoxal 5-phosphate withTris. Upon raising thepH from 7.3 to 9.3 at 25°C, the second-order rate constant increases from 1.05 M^–1 s^–1 to 3.79 M^–1 s^–1, whereas the apparent dissociation constant varies from 2 to 8 mM. These results demonstrate the significance of this reaction whenTris buffer is used in studies of pyridoxal 5-phosphate-dependent enzymes.

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Reaktion von Pyridoxal-5-phosphat mit TRIS

Zusammenfassung Es werden Untersuchungen über die Kinetik und das Gleichgewicht der Reaktion von Pyridoxal-5-phosphat mitTRIS vorgelegt. Wenn derpH bei 25°C von 7,3 auf 9,3 erhöht wird, steigt die Geschwindigkeitskonstante zweiter Ordnung von 1,05 M^–1 s^–1 auf 3,79 M^–1 s^–1, während die scheinbare Dissoziationskonstante sich im Bereich von 2 bis 8 mM verändert. Die Ergebnisse zeigen, welche Bedeutung diese Reaktion für Untersuchungen von Pyridoxal-5-phosphat-abhängigen Enzymen bei Verwendung vonTRIS-Puffer hat.

     

Energy dispersive XRFA of solutions containing Fe and trace amounts of Co and other heavy metals after selective separation on the cellulose exchanger Hyphan

Summary The elimination of Fe K interference in the determination of cobalt by energy dispersive XRFA is investigated. Two procedures are compared: a) Elution of iron from cellulose Hyphan filters used for the preconcentration of metal ions from solution prior to XRF analysis; cobalt is not eluted and can subsequently be determined free from interference. b) Selective prevention of the sorption of iron onto cellulose Hyphan filters by boiling the analytical solution in the presence of 1% H₂O₂ before starting the sorption process. The methods are applied to the analysis of municipal water and rain water samples. The detection limit for cobalt is 0.4 g/l in presence of up to 1 mg/l Fe.

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Energie-dispersive RFA von Lösungen, die Eisen und Spuren von Co und anderen Schwermetallen enthalten, nach selektiver Trennung an dem Celluloseaustauscher Hyphan

Zusammenfassung Die Eliminierung der Störung durch Fe K-Strahlung bei der Bestimmung von Co durch Energiedispersive RFA wird beschrieben. Zwei Verfahren werden verglichen: a) Elution des Eisens von Cellulose-HyphanFiltern nach Voranreicherung der Metallionen aus der Lösung und vor der analytischen Bestimmung. Cobalt wird nicht eluiert und kann anschließend ohne Störung bestimmt werden. b) Selektive Unterdrückung der Sorption des Eisens an Cellulose-Hyphan-Filtern durch Kochen der Lösung in Gegenwart von 1% H₂O₂ vor der Sorption. Die Methoden werden angewendet auf die Analyse von Leitungswasser- und Regenwasserproben. Die Nachweisgrenze für Co beträgt 0,4 g/l in Gegenwart von bis zu 1 mg/l Fe.

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On leave from Rand Afrikaans University, Johannesburg, Republic of South Africa