柱前衍生化高效液相色谱法分析当归多糖的单糖组成

采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP）柱前衍生化反相高效液相色谱（HPLC）法,建立了9种常见单糖的分离模式,并成功地用于当归多糖的单糖组成分析,具有良好的重复性。结果表明,当归多糖由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖及阿拉伯糖7种单糖组成,其摩尔比为0．57：1．00：0．13：3．06：8．16：7．17：12．69。该HPLC方法是简单、快速、灵敏、方便的分析技术,可用于当归多糖的质量控制。     

柱前衍生化-高效液相色谱法分析缅甸刺梧桐胶多糖的单糖组成

利用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮柱前衍生化-高效液相色谱法,优化10种常见单糖的色谱分离条件,并用于不同等级的自制刺梧桐胶多糖的单糖组成分析.对自制刺梧桐胶多糖的单糖组成分析结果表明,自制刺梧桐胶多糖由葡萄糖醛酸(GlcUA)、鼠李糖(Rha)、半乳糖醛酸(GalUA)、半乳糖(Gal)、阿拉伯糖(Ara)和岩藻糖...     

柱前衍生化-高效液相色谱法分析木糖结晶母液的单糖组成

采用1-苯基-甲基-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生化-反相高效液相色谱(HPLC)法建立了8种常见单糖的分离模式,并用于木糖结晶母液单糖组成的定量分析.结果表明:木糖结晶母液至少由甘露糖、鼠李糖、纤维二糖、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖及岩藻糖8种单糖组成,其中以葡萄糖、半乳糖、木糖和阿拉伯糖为主.以峰高定量,8种单糖的浓...     

柱前衍生高效液相色谱法分析新疆桃胶的多糖组成

采用超声波辅助提取,乙醇沉淀,三氯乙酸去蛋白的方法提取新疆8种桃胶中的多糖,将所得多糖用三氯乙酸进行水解并用1-苯基-3-甲基-5吡咯啉酮进行衍生化处理,采用反相高效液相色谱-紫外检测法研究桃胶多糖的单糖组成。结果表明,8种桃胶多糖主要由阿拉伯糖、半乳糖和木糖组成,还含有少量的葡萄糖醛酸、鼠李糖及甘露糖,不同品种的桃胶其多糖的单糖组成及含量存在一定差异。该方法简便,重现性良好,适合进行桃胶多糖的成分分析研究。     

氨基苯甲酸衍生化高效液相色谱法 分析多糖中的单糖及糖醛酸组成

衍生反相离子对色谱法同时分离检测多糖中单糖及糖醛酸组成的方法,筛选出适合于p-AMBA糖衍生物分离的色谱柱,考察了流动相组成对9种单糖和两种糖醛酸的p-AMBA衍生化产物的保留值及分离的影响,优化了反应温度和反应时间等衍生化条件,并应用优化的分析方法测定了螺旋藻中的单糖和糖醛酸的组成。采用紫外检测时,方法的检出限为 (2.55～13.4)×107mol/L;采用荧光检测时,方法的检出限为(3.38～176)×108 mol/L。     

柱前衍生化-HPLC法分析不同产地厚朴叶多糖的单糖组成

建立了1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生化-高效液相色谱法(HPLC)同时测定厚朴叶多糖中的6种单糖含量的方法。采用Phenomenex(4.6 mm×250 mm, 4μm)为色谱柱,流动相为0.2%磷酸溶液-乙腈(体积比为82∶18),流速为1.0 mL/min,检测波长为245 nm,柱温为35℃。结果显示,基于HPLC法所建立的单糖检测方法,6种单糖成分在各自线性范围内线性关系良好(R²≥0.9994),平均加标回收率为97.17%～100.22%,相对标准偏差(RSD,n=6)为1.67%～2.82%。16批不同产地厚朴叶单糖组成相似,主要是由葡萄糖、甘露糖、半乳糖、鼠李糖和阿拉伯糖组成。主成分分析结果显示,湖北和重庆样品间的单糖组成得到明显区分。该试验所建立的方法操作简便,重复性和准确度高,适用于厚朴叶多糖中单糖成分的含量测定。     

PMP柱前衍生高效液相色谱法分析杜氏盐藻多糖的单糖组成

建立了柱前PMP衍生高效液相色谱法分离检测8种中性糖、2种糖醛酸及2种糖胺的方法。筛选出适合PMP衍生物分离的色谱柱为Ec lipse XDB-C18,以0.1 mol/L磷酸盐缓冲液-乙腈为流动相,考察了pH值和乙腈体积分数对各种糖的PMP衍生物的保留及分离的影响,确定最佳pH值为6.7,最佳乙腈体积分数为17%;比较了不同衍生反应时间和萃取除杂前不同量盐酸中和反应产物时醛糖-PMP衍生物的峰面积大小变化,从而得到较佳的样品衍生化条件。应用优化的色谱条件和样品制备方法,测定了由杜氏盐藻提取纯化的多糖级分PD4 a和PD4b的单糖组成,其测定结果与高效阴离子交换色谱法的结果基本一致。     

温和条件下柱前标记-高效液相色谱-质谱法测定枸杞多糖中单糖组成

基于高效液相色谱-质谱联用分析技术（HPLC-MS）,在温和的NH₃·H₂O条件下,采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP）衍生化试剂成功地标记了果糖及多种醛单糖,同时提出了PMP标记果糖的衍生化机理。采用Kromasil-C18色谱柱（100 mm×4.6 mm,3.5 μm）分离,梯度洗脱,选择离子模式检测,建立了8种常见单糖标记物的结构确认及含量测定的分析方法。该方法在一定质量浓度范围内具有良好的线性（相关系数> 0.9947）,检出限为0.003~0.05 mg/L,定量限为0.01~0.15 mg/L。平均回收率为65.1%~116.2%,相对标准偏差≤10.2%（n=5）。自制4个产地枸杞多糖,对其单糖组成的分析结果表明,它们均由甘露糖、果糖、鼠李糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、阿拉伯糖和脱氧核糖8种单糖组成,但各种单糖含量的分布有较大的差异。该法简便,灵敏度高,重复性好,可用于水热法水解枸杞多糖水解液中单糖标记物结构的确认及测定,对规范植物多糖的质量控制具有重要意义。     

高效液相色谱柱前衍生化法测定牛磺酸含量

高效液相色谱柱前衍生化法测定牛磺酸含量谢继红,陈玉仁,唐少珍（大连市医药科学研究所大连ｌ１６０１３）１前言牛磺酸又称牛胆硷（Ｔａｕｒｉｎｅ）,其化学名为２－氨基乙磺酸,普遍存在于动物体内,特别是海洋生物体内,据文献报道￣［１－３］,牛磺酸以游离形式存...     

柱前衍生化高效液相色谱法(HPLC)测定水中微量溴酸盐含量

联合柱前衍生化技术,成功地用高效液相色谱法(HPLC)测定了水体中微量溴酸盐含量。通过衍生化条件的优化,方法回收率在98%～105%之间、相对标准偏差RSD小于2.0%,线性相关系数达0.9995,检测限为1.0μg/L。方法简便快速、准确可靠,能满足现有标准的检测要求。     

柱前衍生高效液相色谱法测定血清中克拉霉素的含量

建立了2，4-二硝基苯肼柱前衍生反相高效液相色谱紫外检测法测定血清中克拉霉素的含量，将在碱性条件下甲基叔丁基醚的血清萃取物，与2，4-二硝基苯肼在55％酸性条件下反应30min，然后用乙腈-0．05mol/LpH7．2磷酸盐缓冲液（48：52）在Alltima C18色谱柱上进行分离，在340nm检测衍生物。方法的线性范围为0．05～3．2mg／L（r=0．9993）；检出限为30μg/L，绝对回收率大于89％，相对标准差小于10％。本方法已用于克拉霉素在健康受试者中的药代动力学研究。     

咔唑-9-乙基氯甲酸酯柱前衍生胺类化合物高效液相色谱分离

采用一种新的氯甲酸酯类荧光衍生试剂咔唑-9-乙基氯甲酸酯进行柱前衍生胺类化合物并通过荧光检测的方法进行高效液相色谱(HPLC)分析。衍生物的荧光激发和发射波长为λcr／λcrs=293/365nm。色谱柱：Hypersil BDS C18柱，柱温：35℃；流速：l mL/min；流动相A为水/乙腈(20／80，V／V)，流动相B为乙腈/水(95／5，V／V)。衍生试剂用量(mol)是胺类化合物总量的3～4倍时，衍生化产率最大且恒定。该方法具有检测灵敏度高，衍生化反应简单、快速、不受样品基质盐分的干扰，尤其适合天然生物样品，食品及饲料中的胺类化合物的分析。     

牛奶中2种青霉素残留的高效液相色谱柱前衍生法检测

利用金属铜离子和青霉素G、氨苄西林可在一定条件下形成稳定络合物,建立了一种高效液相色谱快速测定牛奶中2种青霉素残留的方法.样品经酸化乙腈沉淀蛋白,离心处理.色谱柱为Agilent TC C18(150 mm×4.6 mm I.d., 5 μm),甲醇-水为流动相,流速1.5 mL/min,检测波长320 nm,样品在5 min内完成分离检测.青霉素G和氨苄西林的质量浓度分别在0.05 ～1.0 mg/L、0.08 ～2.1 mg/L范围内呈良好的线性关系,相关系数分别为0.995 6、0.998 4.方法的检出限分别为1.5×10-5、2.4×10-5g/L,相对标准偏差分别为2.4%、1.8%(n=5).方法显示出较好的选择性和较高灵敏度,适于牛奶中青霉素G和氨苄西林残留的检测.     

9-(2-羟乙基)-吖啶酮柱前衍生胆汁酸高效液相色谱分析

采用一种新型紫外、荧光衍生试剂 9 ( 2 羟乙基 ) 吖啶酮 (HEA) ,在缩合剂 1 乙基 3 ( 3 二甲氨丙基 ) 碳酰二亚胺 (EDC·HCl)及碱性催化剂 4 二甲氨基吡啶 (DMAP)的存在下 ,对 1 0种胆汁酸进行柱前衍生 ,并通过荧光检测的方法进行高效液相色谱 (HPLC)分析。在HypersilBDSC18柱上 ,采用梯度洗脱 ,1 0种胆汁酸衍生物获得了基线分离 ,衍生物的激发和发射波长为λex/λem=40 4/44 0nm。衍生产物稳定性好 ,检测灵敏度高 ,按信噪比S/N =3∶1 ,平均检出限可达 8.3fmol。     

柱前衍生-反相高效液相色谱测定牛磺罗定及固体制剂含量

本文建立了对甲苯磺酰氯柱前衍生-反相高效液相色谱紫外检测法测定牛磺罗定及其固体制剂含量的方法.利用牛磺罗定中含有仲胺基的特点,以对甲基苯磺酰氯柱前衍生牛磺罗定,Venusil XBP C18色谱柱分离,在240 nm波长检测,线性范围为0.016～0.160 g·L-1(r=0.9995),衍生化产物在24 h内稳定,...     

邻苯二甲醛柱前在线衍生反相高效液相色谱法测定功能饮料中赖氨酸的含量

以邻苯二甲醛作为衍生试剂,结合柱前在线衍生–反相高效液相色谱技术,建立了一种快速检测功能饮料中赖氨酸含量的分析方法。对流动相梯度洗脱程序、DAD检测波长和在线衍生时间等参数进行了优化。赖氨酸在1~200 mg/L范围内与色谱峰面积有良好的线性关系,相关系数大于0.998,赖氨酸的检出限为0.3 mg/L,测定结果的相对标准偏差小于7%(n=5),加标回收率为96.43%~115.01%。该方法可应用于功能饮料中赖氨酸的快速检测。     

柱前衍生化高效液相色谱测定血清中红霉胺

建立了人血清中地红霉素活性代谢物红霉胺的高效液相色谱荧光检测方法.用甲基叔丁基醚萃取血清中红霉胺,用NBD-Cl衍生化后于反相C18柱上进行分离测定.流动相为V(0.01 mol/L 磷酸盐缓冲液,pH 6.0)∶ V(乙腈)=80∶ 20混合液,流速为1.0 mL/min,地洛他定为内标,标准曲线的线性范围为0.010～1.245 mg/L,日内和日间相对标准偏差均小于9%.最低定量限为10 μg/L.应用本方法对受试者给予地红霉素后血清中的红霉胺浓度进行了测定.     

N-羟基琥珀酰亚胺-3-吲哚乙酸酯柱前衍生高效液相色谱分离及荧光测定肽及其水解物

本文首次报道了一种新的羧酸活性酯试剂,N-羟基琥珀酰亚胺-3-吲哚乙酸酯作为柱前荧光衍生试剂,流动相为10mmol/L柠檬酸-Na₂HPO₄－pH 3.6的甲醇/水(20/80,V/V)溶液,C₁₈柱,于λ_cx/λ_cm＝278nm/355nm处进行荧光检测,高效液相色谱分离测定了谷胱甘肽、二甘肽、谷氨酸、胱氨酸、甘氨酸.当S/N＝3时,检出限为0.2至2.5Pmol.     

柱前衍生化高效液相色谱荧光检测法测定桑叶中的1-脱氧野尻霉素

建立了芴甲氧酰氯(FMOC—Cl)柱前荧光衍生一高效液相色谱法测定桑叶中1-脱氧野尻霉素(DNJ)的方法。桑叶经0．05mol／L,盐酸提取,在pH8．5的硼酸盐缓冲溶液条件下,DNJ反应生成荧光产物,然后用高效液相色谱-荧光检测器测定。流动相为乙腈-0．1％醋酸(55：45,V/V)。线性范围为0．567～34mg／L(相关系数r=0．9999);检出限为0．03mg／L。实验测得桑叶中DNJ含量为0．24％;平均回收率为97．1％,RSD为1．35％(n=6)。