三联疗法治疗Hp阳性十二指肠溃疡的疗效观察

应用奥美拉唑、羟氨苄青霉素与替硝唑联合治疗幽门螺杆菌（Ｈｐ）阳性十二指肠溃疡３４例，并与单用奥美拉唑治疗的Ｈｐ阳性十二指肠溃疡３４例作对照观察，结果显示治疗组溃疡愈合率与对照组无明显差异（ｐ＞０．０５）．治疗组Ｈｐ根除率与对照组有显著性差异（ｐ＜０．０１）．其中Ｈｐ根除组愈合率与Ｈｐ未根除组有显著性差异（ｐ＜０．０５）．本三联疗法具有溃疡愈合率、Ｈｐ根除率高，无严重毒副反应，患者依从性好，价格适中等优点，值得在临床上推广应用     

幽门螺杆菌的左氧氟沙星耐药性及其基因分析

分析了宁波地区幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,Hp）对左氧氟沙星的耐药情况,探讨了Hp对左氧氟沙星的耐药机制.取患者胃黏膜组织分离培养Hp,检测Hp对左氧氟沙星的耐药率;提取左氧氟沙星耐药Hp DNA,PCR扩增并测序比较.结果表明：宁波地区Hp对左氧氟沙星的耐药率为22.5%,左氧氟沙星耐药Hp菌株gyrA基因91位密码子发生点突变.提示宁波地区Hp对左氧氟沙星已产生一定的耐药性;左氧氟沙星耐药Hp gyrA基因突变可能是本地区左氧氟沙星耐药的重要原因之一.     

抗幽门螺杆菌尿素酶B纳米抗体的制备及鉴定

制备抗幽门螺杆菌（Helicobacter pylori）尿素酶B（UreB）纳米抗体。用灭活的全幽门螺杆菌免疫羊驼,以重组蛋白UreB为靶分子,从噬菌体展示文库中筛选出能与重组蛋白UreB特异性结合的纳米抗体,构建原核表达载体,IPTG诱导表达,ELISA鉴定纳米抗体特异性。获得5×107cfu的噬菌体文库,将筛选的两个OD450值较高且序列不同的纳米抗体HU2-9和HU2-36分别进行表达SDS-PAGE鉴定均为可溶性且表达量分别为92和32 mg·L-1。ELISA结果表明两个纳米抗体能特异性结合Hp菌体蛋白,并对尿素酶活性具有一定的抑制作用。成功淘选出6种独特序列的抗幽门螺杆菌UreB纳米抗体。     

LTB-hpaA融合基因原核表达产物的鉴定及其免疫保护作用

分别从幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)临床菌株Y06和大肠杆菌44851株DNA中扩增ltB和hpaA基因,构建ltB-hpaA融合基因及其原核表达系统,鉴定其表达产物的免疫原性、佐剂活性及其对Hp SS1株感染小鼠的保护作用.采用PCR分别从上述菌株DNA中扩增hpaA基因和ltB基因片段,构建ltB-hpaA融合基因,T-A克隆后测定核苷酸序列.采用质粒pQE32和宿主菌E.coli M15构建ltB-hpaA融合基因表达系统,并用不同浓度的IPTG诱导表达.采用western blot和GM1-ELISA鉴定表达产物的抗原性、免疫反应性和佐剂活性.建立HpSS1株感染BALB/c小鼠模型,检测rLTB-HpaA的免疫保护效果.采用ELISA检测125例胃、十二指肠粘膜活检标本尿素酶阳性患者血清中HpaA抗体和41株Hp临床菌株HpaA表达情况.与GenBank登录的相关序列比较,所构建的ltB-hpaA融合基因核苷酸序列同源性分别为94.25%～99.71%和95.38%～99.19%.所构建的表达系统pQE32-ltB-hpaA-M15的目的重组蛋白(rLTB-HpaA)表达量高达细菌总蛋白的1/3左右.rLTB-HpaA能与Hp全菌抗体发生结合反应,免疫家兔能产生特异性抗体.GM1-ELISA结果显示rLTB-HpaA能与牛GM1结合.rH-paA免疫小鼠的保护率仅为66.7%,rLTB-HpaA免疫小鼠的保护率可增至83.3%.81.6%患者血清(102/125)HpaA抗体检测结果阳性,所有菌株均含有HpaA.本文成功地构建了itB-hpaA融合基因高效原核表达系统,所表达的rLTB-HpaA有良好的免疫原性和佐剂活性,并对Hp感染小鼠有较强的免疫保护作用.     

幽门螺杆菌临床菌株主要蛋白抗原表达及其诱导宿主产生抗体差异性的研究

建立了基于幽门螺杆菌重组蛋白抗原rUreB、rHpaA、rVacA、rCagAl、rNapA、rFlaA和rFlaB的ELISAs,用于检测幽门螺杆菌临床菌株上述抗原表达率和幽门螺杆菌感染病人血清IgG阳性率,另采用PCR检测临床菌株中上述抗原编码基因携带率,以期为选择幽门螺杆菌基因工程疫苗抗原提供依据．实验结果显示,rUreB、rHpaA、rVacA、rCagAl、rNapA、rFlaA和rFlaB表达量分别约为细菌总蛋白的35％、32％、15％、230．4、56％、25％和20％．各重组抗原均能与商品化幽门螺杆菌抗血清（DAKO）产生阳性WesternBolt结果,免疫家兔能产生特异性抗体．从332例慢性胃炎或消化性溃疡病人胃黏膜活检标本中,分离获得145株幽门螺杆菌,其阳性率为43．8％．所有幽门螺杆菌临床菌株均表达UreB、HpaA、FlaA和FlaB,52．4％、91．7％和93．1％菌株分别表达VacA、CagA和NapA．145例幽门螺杆菌感染的病人血清中,UreB、HpaA、VaeA、CagA、NapA、FlaA和FIaB的IgO抗体阳性率分别为100％、86．9％、42．8％、70．3％、89．7％、84．8％和79．3％．此外,不同胃疾病标本中幽门螺杆菌分离率均无显著性（P〉0．05）,但菌株VaeA和NapA表达率与疾病严重程度相关（P〈0．05）．综合分析实验结果,ureB是研制幽门螺杆菌基因工程疫苗首选抗原,其次是NapA和HpaA;各病种与幽门螺杆菌感染率无关,但与菌株毒力有关．     

ltB-ureB融合基因原核表达系统的构建及其产物免疫性和佐剂活性的鉴定

构建ltB-ureB融合基因原核表达系统并对其表达产物的免疫性和佐剂活性进行鉴定.采用PCR和T-A克隆法从幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)临床菌株Y06和大肠杆菌44851株DNA中获得了ureB和ltB全长基因扩增片段及其克隆,并构建了ltB-ureB融合基因及其原核表达系统pET32a-ltB-ureB-E.coli BL21DE3.在E.coli BL21DE3宿主菌中用不同浓度的IPTG诱导表达,并用Hp全菌抗体的Western blot、ELISA以及GM1ELISA分别证实了目的重组蛋白(rLTB-UreB)的免疫性和佐剂活性.与报道的相关序列比较,所克隆的ureB和ltB核苷酸序列同源性分别为96.88%～97.82%和99.12%～99.71%,氨基酸序列同源性为99.65%～99.82%和97.58%～99.19%.0.1～1.0 mmol/L的IPTG均能有效地诱导目的重组蛋白rLTB-UreB的表达,该蛋白主要以包涵体形式存在,其产量约为细菌总蛋白的35%.Western blot结果证实rLTB-UreB不仅能与商品化的Hp全菌抗体结合,免疫家兔后也能产生特异性抗体,表明rLTB-UreB有良好的免疫反应性及抗原性.GM1-ELISA结果显示rLTB-UreB能与牛GM1结合,表明rLTB-UreB有佐剂活性.以兔抗rLTB-UreB为一抗,发现所检测的109株Hp临床分离菌株均表达UreB;以rLTB-UreB为包被抗原,发现所检测的125例Hp感染者血清中均存在UreB抗体;表明UreB广泛存在于不同的Hp菌株中,并有很强的抗原性,也提示rLTB-UreB确有自然表达UreB的抗原特异性.本文成功地构建了LTB-UreB融合基因原核高效表达系统,所表达的LTB-UreB融合蛋白有良好的免疫性和佐剂活性,为Hp基因工程疫苗的产业化奠定了坚实的基础.     

背瘤丽蚌[Lamprotula leai Gray.1835]的年龄与生长

应用贝壳切片法鉴定背瘤丽蚌年龄。分析了背瘤丽蚌年龄、壳长、壳宽、壳高、体重和软体组织重之间的相互关系。结果显示：背瘤丽蚌壳长（L）、壳宽（W）、壳高（H）之间均呈线性关系,直线方程分别为：W=0．2651 L＋7．2227（R^2=0．9694）,H=0．3723 L＋4．7466（R2=0．9725）,H=1．3639W-4．4018（R^2=0．9466）;背瘤丽蚌的壳长、体重（Wb）、软体组织重（W1）和壳重（W）之间呈明显的幂函数关系,方程分别为：Wb=0．0007 L^2.6382,Wt=0．0001 L^2.5588,Ws=0．0006 L^2.6514。背瘤丽蚌的壳长与年龄（A）呈对数关系,方程为：L=30．558ln（A）＋20．036（R^2=0．9939）;壳年增长（△L）与年龄也呈对数关系,方程为：△L=-5．591ln（A）＋16．157（R^2=0．8828）。背瘤丽蚌自然种群中,最大年龄为17龄,最大壳长为101mm。     

幽门螺杆菌生物被膜形成及其影响因素研究进展

幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)是人类慢性感染最常见的病原菌之一,会引发多种消化系统和非消化系统疾病.研究表明:H.pylori能在多种表面形成生物被膜,包括宿主胃黏膜表面、腺体及非生物表面等,其耐药性、感染复发与生物被膜作用相关.本文介绍了H.pylori生物被膜形成及其结构特点,并对其影响因素进...     

安宝治疗先兆早产的观察及护理

安宝有抑制宫缩、减少阴道出血、延长孕周的作用 .第一个被美国食品与药物监督局批准用于治疗早产 .我院于 2 0 0 1年 1月来 ,逐步用安宝代替硫酸镁治疗先兆早产取得满意效果 ,使用中发现严密的观察与护理对治疗效果有重要影响 .1资料与方法( 1 )临床资料 .2 0 0 1年 1月至 8月间收治先兆早产 51例 ,选择安宝治疗的 2 7例为治疗组 ,硫酸镁治疗的 2 4例为对照组 .两组病历的年龄孕周、孕次及病情无显著差异 .( 2 )方法 .治疗组 :定宝针 50ｍｇ加入 5%的葡萄糖 50 0ｍＬ中静滴 ,初始剂量为 8滴 /ｍｉｎ ,以后每1 0ｍｉｎ视宫缩、心率情况增加 …     

龙头鱼的外形特征与消化系统结构

观察并描述了龙头鱼的形态特征，测量了281尾(体长14．20～27．60cm)龙头鱼的外部形态参数，并进行了相关关系分析；解剖观察了龙头鱼消化系统的结构特征．外部形态参数全长(LT)与体长(LB)、头长(LH)与体长(LB)、体长(LB)与体高(HB)、体重(W)与体长(LB)的相关关系分别为：LT=1．1868L8．-0．4308(r=0．9950)，LH=5．0854LB 0．4421(r=0．9812)，LB=5．1166HB 4．6608(r=0．9431)，W=0．0016LB^3.4776(r=0．9114)．消化系统结构特征为：口裂深，两颌和腭骨上密生细牙；食道短而粗；胃呈卜型，盲囊部发达；肠呈直管状，长约鱼体长的3／5；幽门盲囊18～23条；肝脏较大，分为左右两叶。     

幽门螺杆菌感染小鼠模型的应用进展

幽门螺杆菌动物模型是幽门螺杆菌感染导致人类胃炎、消化性溃疡、胃癌等致病机制研究的基础, 也是幽门螺杆菌感染和胃肠外疾病相关性研究的重要工具. 近年来幽门螺杆菌感染动物模型得到了广泛的应用和发展, 制备感染模型常用的动物有小鼠、蒙古沙鼠、豚鼠、悉生乳猪和恒河猴等, 其中幽门螺杆菌悉尼菌株感染的小鼠模型使用最广泛. 本文对幽门螺杆菌感染小鼠模型应用的最新进展做一综述.     

幽门螺杆菌感染引起非消化系统疾病的研究进展

幽门螺杆菌是一种革兰氏阴性微需氧型细菌, 可引起消化性溃疡、膜相关淋巴组织淋巴瘤和萎缩性胃炎, 是胃癌的主要诱因. 但近年来, 流行病学调查和动物实验数据提示, 该菌感染与一些非消化系统疾病, 如缺铁性贫血、特发性血小板减少性紫癜、菌血症、肺炎以及类风湿性关节炎等的发生密切相关. 本文就幽门螺杆菌感染引发非消化系统疾病的新进展进行系统剖析, 以期全面展现幽门螺杆菌感染的新领域.     

水环境下羧基与氨基间为单氢键的α-Ala旋光异构及羟自由基和氢氧根的作用

采用密度泛函理论的B3LYP方法、微扰理论的MP2方法和自洽反应场（SCRF）理论的SMD模型方法,研究了水环境下羧基与氨基间为单氢键的α-Ala旋光异构及羟自由基和氢氧根作用的反应。研究发现：α-Ala的旋光异构可在a和b两个通道实现,a通道为羧基顺反异构后,水分子簇作媒介质子以氨基为桥从α碳的一侧向另一侧迁移;b通道为水分子簇作媒介,质子从α碳向氨基氮的迁移与羧基顺反异构协同进行。在a通道,羟自由基水分子簇可致α-Ala损伤。势能面计算表明：水环境下,在a通道3个水分子簇作氢迁移媒介,决速步能垒为113.37 kJ·mol^-1,氢氧根水分子簇的催化使该能垒降到64.45 kJ·mol^-1;在b通道2个水分子簇作氢迁移媒介,决速步能垒为135.00 kJ·mol^-1。羟自由基水分子簇致α-Ala损伤的能垒在水分子抽氢和羟自由基抽氢时分别为24.47和 80.60 kJ·mol^-1。     

Eclipse环境下桥梁检测车三维模型的构建与控制

针对桥梁检测车操作人员无法直接观察桥检车机械臂的动作状态的问题,提出构建桥检车的三维模型,能够实时动态地跟踪显示出桥检车机械臂的动作状态.以Eclipse作为软件开发平台,基于OpenGL ES实现桥检车的三维模型构建和控制给出直接三维建模法与插件三维建模法.实验结果表明,2种方法均可实现桥检车三维模型的构建与控制,对于规则三维模型的构建与控制,直接三维建模法要优于插件三维建模法.     

72例冠状动脉搭桥术围术期血栓弹力图变化分析

应用血栓弹力图(TEG)监测冠状动脉搭桥术患者围手术期凝血功能变化. 选择2011年1 月~2015年8月间收治并行冠状动脉搭桥手术治疗的患者72例, 根据手术方式分为非体外循环冠状动脉搭桥手术组(OPCAB组)45例, 体外循环冠状动脉搭桥术组(CABG组)27例, 2组患者均于术后12h开始用阿司匹林联合氯吡格雷抗血小板治疗, 并于术后24h进行TEG监测, 分析患者术前、术后24、96h的TEG变化情况. 研究结果表明: 术后24h OPCAB组较CABG组反应时间(R值)、血凝块形成时间(K值)降低, 最大振幅(MA值)、凝血指数(CI值)升高, 差异有统计学意义(P<0.05). 术后96h OPCAB与CABG组较各组术前R值、K值均降低, CI值均升高, 差异有统计学意义(P<0.05), 2组间各值差异无统计学意义(P>0.05). 从而得到CABG较OPCAB对患者凝血功能影响大, 呈现早期低凝, 晚期高凝的双向趋势, 原因可能与凝血因子消耗或缺乏以及体外循环全身肝素化有关. OPCAB手术对患者凝血功能影响较小, 术后呈现持续上升的高凝倾向. 因此建议对冠状动脉搭桥手术患者凝血功能进行检测, 术后可以选择性应用抗血小板药物或抗凝药物进行干预, 降低并发症发生, 对OPCAB术后患者可以给予更加积极的抗凝治疗.