免疫纳米金催化氯金酸与羟胺反应-共振散射光谱检测痕量青霉素G

小粒径的金和免疫金纳米粒子对氯金酸-盐酸羟胺这一反应具有较强的催化作用,其产物在580 nm处有一共振散射峰。以半抗原青霉素G为模型,用粒径为9 nm的金纳米微粒标记羊抗兔青霉素噻唑蛋白抗体制备了青霉素G的免疫纳米金共振散射光谱探针。在pH5.4的柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲溶液中,青霉素G与金标兔抗青霉素发生特异性结合生成胶体金免疫复合物,离心分离。取适量金标羊抗兔青霉素的上层清液做催化剂,在pH3.36盐酸-柠檬酸钠缓冲溶液－40μg/mL氯金酸－21.6μg/mL的盐酸羟胺条件下,进行催化反应后金纳米粒径增大,在580nm共振散射强度处增强。随着青霉素G浓度c增大,上层清液中免疫金纳米微粒数量降低,I580nm值降低。其降低值△I580nm与c在0.15-225 ng/mL范围内成线性关系,其回归方程为△I580nm=0.28c+5.16,检出限为0. 05 ng/mL。该法用于牛奶中青霉素G的检测,结果较好。     

免疫纳米金催化共振散射光谱法测定痕量IgM

用粒径为10 nm的金纳米微粒标记羊抗人免疫球蛋白M（IgM）,制备了IgM的免疫纳米金共振散射光谱探针。在pH4.49的KH2PO4-Na2HPO4缓冲溶液及PEG存在下,金标羊抗人IgM与IgM发生特异性结合生成胶体金免疫复合物,离心分离,获得未反应的金标抗上层清液。以此纳米金标抗作为催化剂,在pH 1.93的盐酸-柠檬酸钠缓冲溶液,催化NH2OH·HCl还原吸附在免疫纳米金表面的金络离子物种（AuCl4-）生成粒径更大的金纳米微粒,导致580 nm 处金纳米微粒的共振散射强度急剧增大。结果表明,随着IgM浓度增大,离心上层液中金标抗降低,I 580 nm线性降低,其△I580 nm与IgM浓度在0.06～4.80 ng· ml-1范围内呈良好的线性关系,其回归方程为ΔI580 nm=14.5cIgM + 1.8,检出限为0.03 ng·ml-1。本法具有灵敏、快速和较高的特异性,用于定量分析人血清中IgM,结果满意。     

免疫纳米金共振散射光谱探针检测痕量免疫球蛋白A

将纳米金的共振散射效应和纳米金标记免疫反应结合起来建立了一种测定免疫球蛋白A的新方法. 采用柠檬酸三钠改良法制备了粒径约为10 nm的纳米金, 用于标记羊抗人免疫球蛋白A获得了免疫球蛋白A (IgA)的免疫共振散射光谱探针. 在pH 5.6的Na₂HPO₄-C₆H₈O₇缓冲溶液和PEG 6000存在下, 金标羊抗人免疫球蛋白A与IgA产生特异性结合, 引起金纳米粒子聚集, 导致金纳米粒子580 nm处的共振散射峰增强. 对免疫分析的条件进行了优化, IgA浓度在0.0054～1.35 μg•mL^－1范围内与580 nm处的共振散射强度呈线性关系, 方法的检测限(3σ)为2.0 ng•mL^－1, 相关系数为0.9983. 用于定量分析人血清中的免疫球蛋白A, 结果满意.     

免疫金铂纳米合金催化共振散射光谱法测定痕量人绒毛膜促性腺激素

以NaBH₄为还原剂, 制备了金与铂物质的量比为49∶1的金铂纳米合金(GP). 用兔抗人绒毛膜促性腺激素抗体(RhCG)修饰AuPt获得了免疫纳米合金探针(GP-RhCG). 在pH 5.8磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液及KCl存在的条件下, GP-RhCG探针发生非特异性聚集, 在590 nm处有一个较强的共振散射峰. 当有人绒毛膜促性腺激素(hCG)存在时, 聚集的GP-RhCG探针与hCG发生特异性结合, 生成分散性较好的GP-RhCG-hCG免疫复合物, 导致590 nm处共振散射峰强度降低. 其共振散射峰强度降低值ΔI_{590 nm}与hCG浓度在6.67～86.7 ng/mL范围内呈现良好线性关系. 免疫反应液中形成的GP-RhCG-hCG免疫复合物对葡萄糖-铜(II)体系具有较强的催化作用, 其产物在610 nm处有一较强共振散射峰. 随着hCG浓度增大, 形成的GP-RhCG-hCG复合物越多, 其催化作用增强, 610 nm处的共振散射峰增强. 其共振散射峰增大值ΔI_{610 nm}与hCG浓度在3.33～133 ng/mL范围内呈线性关系.     

适体修饰纳米金催化-共振散射光谱测定凝血酶

用核酸适体修饰纳米金制备了识别凝血酶(TB)的适体修饰纳米金(AptAu)共振散射光谱探针. 在pH 7.40 的Na₂HPO₄-NaH₂PO₄缓冲溶液中及NaCl, KCl存在下, AptAu探针中的适配体特异识别凝血酶, 生成稳定的G-四分体和大粒径的纳米金聚集体. 经微孔滤膜过滤后, 纳米金聚集体被分离, 以滤液中未反应的AptAu作催化晶种, 在20.0 μg/mL HAuCl₄-5.01 mmol/L HCl-1.83 mg/mL CTMAB-50.1 μg/mL VC条件下, 催化维生素C (VC)还原HAuCl₄生成较大粒径的金颗粒, 体系在600 nm处有一共振散射峰. 随着凝血酶浓度的增大, 滤液中AptAu浓度降低, 催化作用减弱, 600 nm处的共振散射峰降低, 其降低值ΔI_{600 nm}与凝血酶浓度在6.40×10^－3～0.150 U/mL范围内存在良好线性关系, 回归方程为ΔI＝1.26×10³C＋1.50, 相关系数为0.999, 检出限为1.30×10^－3 U/mL. 该法用于定量分析人血浆中凝血酶, 结果满意.     

鲱鱼精DNA修饰纳米金催化Fehling反应——共振散射光谱法检测痕量Hg~(2+)

用鲱鱼精DNA(hsDNA)修饰10nm的纳米金制备了Hg2+的hsDNA修饰纳米金共振散射光谱探针(AuhsDNA).在pH7.0Tris-HCl缓冲溶液中及0.017mol/LNaCl存在下,Hg2+与AuhsDNA形成稳定的Hg2+-DNA结合物,引起AuhsDNA中的纳米金析出并聚集形成纳米金簇.该溶液用150nm滤膜过滤后,滤液中过量的AuhsDNA可催化Fehling试剂-葡萄糖反应生成氧化亚铜微粒,该微粒在580nm处有一个较强的共振散射峰.随着汞离子浓度增大,形成的纳米金簇越多,滤液中AuhsDNA越少,生成的氧化亚铜微粒减少,580nm处氧化亚铜微粒的共振散射光强度线性降低,其共振散射光强度降低值ΔI580nm与汞离子浓度在1～833nmol/L范围内成线性,回归方程、相关系数、检出限分别为ΔI580nm2+Hg=0.37C+0.9,0.9990,0.3nmol/LHg2+.该法用于废水中Hg2+的检测.     

鲱鱼精DNA修饰纳米金催化Fehling反应——共振散射光谱法检测痕量Hg2＋

用鲱鱼精DNA (hsDNA)修饰10 nm的纳米金制备了Hg^2＋的hsDNA修饰纳米金共振散射光谱探针(AuhsDNA). 在pH 7.0 Tris-HCl缓冲溶液中及0.017 mol/L NaCl存在下, Hg^2＋与AuhsDNA形成稳定的Hg^2＋-DNA结合物, 引起AuhsDNA中的纳米金析出并聚集形成纳米金簇. 该溶液用150 nm滤膜过滤后, 滤液中过量的AuhsDNA可催化Fehling试剂-葡萄糖反应生成氧化亚铜微粒, 该微粒在580 nm处有一个较强的共振散射峰. 随着汞离子浓度增大, 形成的纳米金簇越多, 滤液中AuhsDNA越少, 生成的氧化亚铜微粒减少, 580 nm处氧化亚铜微粒的共振散射光强度线性降低, 其共振散射光强度降低值?I₅₈₀ nm与汞离子浓度在1～833 nmol/L范围内成线性, 回归方程、相关系数、检出限分别为 ?I_{580 nm}＋0.9, 0.9990, 0.3 nmol/L Hg^2＋. 该法用于废水中Hg^2＋的检测.     

痕量甲胎蛋白的免疫纳米金催化-氧化亚铜微粒共振散射光谱分析

用粒径15 nm 的纳米金标记单克隆羊抗人甲胎蛋白(GAFP), 制备了甲胎蛋白(AFP)的免疫纳米金探针(AuGAFP). 纳米金及AuGAFP均对葡萄糖还原铜(Ⅱ)生成Cu₂O微粒这一慢反应具有较强的催化作用, Cu₂O微粒在620 nm处产生1个较强的共振散射峰. 将AFP-AuGAFP免疫反应与离心分离技术结合, 建立了超痕量AFP的免疫纳米金催化-Cu₂O微粒共振散射光谱新方法. 随着AFP浓度的增大, AFP-AuGAFP免疫复合物微粒增多, 离心液中AuGAFP浓度降低, 620 nm处的共振散射光强度I_{620 nm}线性降低, 其降低值ΔI_RS与AFP质量浓度ρ(AFP)在0.10～16.0 ng/mL范围内呈现良好的线性关系, 其回归方程为ΔI_RS=4.27ρ(AFP)+1.28, 检出限为0.05 ng/mL. 本方法所用试剂易得, 反应易控制, 灵敏度高, 选择性好, 用于定量分析人血清中的AFP, 结果令人满意.     

核酸适体修饰纳米金-钌催化共振散射光谱法测定痕量Pb2+

用铅离子的特异性核酸适体（aptamer）修饰AuRu复合纳米微粒（AuRu的摩尔比为5:1）制备了铅离子的核酸适体纳米探针（AptAuRu）.在pH 7.0的Na2HPO4-NaH2PO4缓冲溶液及85 mmol/L NaCl存在下,AptAuRu纳米探针亦不聚集. 当Pb2+ 存在时,Pb2+可与探针中的aptamer形成较稳定的G-四分体结构,从而析放出AuRu复合纳米微粒并进一步聚集形成较大的微粒,导致592 nm处的共振散射光强度线性增大. 该反应液经0.15 μm滤膜过滤后,获得未反应的AptAuRu滤液. 滤液中的纳米微粒对氯酸钠-碘化钠反应具有较强的催化作用,其产物与阳离子表面活性剂形成缔合微粒,在472 nm处有一较强的共振散射峰. 随着Pb2+浓度增大,滤液中金钌纳米微粒浓度降低,其催化作用减弱,共振散射强度值降低. Pb2+浓度在0.12～60 pM范围与其共振散射强度降低值ΔI472nm呈线性关系,回归方程、相关系数分别为ΔI472nm =3.1C+7.3,0.9967, 检出限为0.08 pM Pb2+. 将本法用于废水中Pb2+的检测,其结果令人满意.     

一种新的测定痕量IgG的纳米金标免疫共振散射光谱探针

在pH8.5条件下，用粒径为9nm的金纳米微粒标记羊抗人IgG获得IgG金标免疫探针。在pH5.8磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液中及聚乙二醇存在下，金标记羊抗人IgG与人IgG产生特异性结合,羊抗人IgG包裹的金纳米微粒释放出来，聚集形成较大的微粒，导致体系在580 nm处的共振散射峰增强。IgG浓度在1.3~1.5×10³ ng·mL^-1范围内与580 nm处的共振散射光强度增加值呈线性，方法的检出限为0.78ng.mL^-1。该法用于定量分析人血清IgG,，简便快速，结果令人满意。     

多氢键反应-纳米金共振散射光谱法测定三聚氰胺

在pH 7.0的磷酸盐缓冲溶液中,氯金酸被3,5-二羟基苯甲酸(DBA)还原生成的金纳米粒子在610nm处产生一个较强的共振散射峰;当有三聚氰胺(MA)存在时,DBA与MA形成多氢键化合物而不能还原氯金酸,导致610 nm处共振散射峰的强度降低.三聚氰胺的浓度在5.0×10 -6～4.0×10-5 mol·L-1范围内...     

一种快速高选择性检测痕量癌胚抗原的共振散射光谱法

用10 nm的金纳米粒子标记单克隆癌胚抗原抗体制备了检测癌胚抗原（CEA）的共振散射光谱探针（Au-CEAAb）。在pH 6.8 的Na2HPO4- NaH2PO4缓冲溶液中及聚乙二醇-6000存在下, CEA与Au-CEAAb发生免疫反应聚集形成疏水性的、平均粒径为227.0 nm的免疫复合物微粒,并在321 nm、581 nm产生2个共振散射峰。随着癌胚抗原（CEA）浓度的增大,581 nm处的共振散射强度I581nm线性增加,其增加值△I581nm与CEA浓度在1.0～50.0 ng·mL-1范围内呈良好的线性关系,相应的回归方程、相关系数、检出限(3σ)分别为ΔI581nm=1.63 C +5.6、0.9940、0.52 ng·mL-1。该法简便、快速、灵敏且选择性好,用于检测人血清中癌胚抗原（CEA）,结果满意。     

痕量铜蓝蛋白的免疫纳米金催化-氧化亚铜微粒共振散射光谱分析

用15 nm的纳米金标记羊抗人铜蓝蛋白抗体(GCP)可获得铜蓝蛋白(CP)纳米金探针(AuGCP). 在pH 7.8柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲溶液中, CP与AuGCP发生特异性结合生成胶体金免疫复合物. 离心分离后, 离心液中的AuGCP可作为酒石酸铜(C4H4O6Cu)-葡萄糖反应体系的催化剂, 生成的Cu2O微粒在620 nm处有一共振散射峰. 在选定条件下, 620 nm处共振散射信号降低值△I620 nm与铜蓝蛋白浓度cCP在0.18～45 ng/mL范围内存在良好线性关系, 回归方程为 ΔI620 nm＝2.27cCP＋5.05, 相关系数为0.9940, 检出限为0.14 ng/mL. 该法用于人血清中铜蓝蛋白的检测, 结果满意.     

非标记纳米银探针催化共振散射光谱检测痕量ATP

在pH 7.8 Tris-HCl缓冲液中, 三磷酸腺苷(adenosine triphosphate, ATP)的核酸适体(Apt 1)与其互补链(Apt 2)结合生成双链DNA (double-strand DNA, dsDNA). 此dsDNA不能稳定纳米银(AgNP), NaCl可致AgNP聚集, 在500 nm波长处产生一个较强的共振散射峰. 加入ATP后, ATP与dsDNA中的Apt 1结合形成较稳定的发夹结构结合物并释放出可稳定AgNP的Apt 2. 随着ATP浓度(16.5～1650 nmol/L)增加, 生成的Apt 2增加, 被Apt 2稳定的AgNP即AgNP-Apt 2结合物增加, 聚集的AgNP减少, 500 nm处的共振散射值线性减小. 该适配体反应中的AgNP-Apt 2对葡萄糖-铜(II)微粒反应具有较强的催化作用, 其产物氧化亚铜微粒在610 nm处有一较强共振散射峰. 随着ATP浓度增大, 反应液中AgNP-Apt 2增多, 催化作用增强, 610 nm处的共振散射峰增强. ATP浓度在4.95～165 nmol/L范围内与共振散射增大值ΔI_{610 nm}呈线性关系, 检出限为1.8 nmol/L ATP. 据此建立了灵敏度高、选择性好、简便快速检测ATP的共振散射光谱新方法.     

核酸适体修饰纳米金共振散射光谱探针快速检测痕量Pb~(2+)

以柠檬酸三钠做稳定剂,用硼氢化钠还原氯金酸制备了粒径为5nm的纳米金.用铅离子核酸适体aptamer保护纳米金获得了检测铅离子的适体纳米金(aptamer-NG)共振散射光谱探针.在pH7.0的Na2HPO4-NaH2PO4缓冲溶液中及30mmol·L-1NaCl存在下,aptamer-NG稳定而不聚集.Pb2+可与该探针中的aptamer形成非常稳定的G-四分体结构,并释放出纳米金.在NaCl作用下纳米金聚集形成较大的微粒,导致552nm处共振散射峰强度增大.Pb2+浓度在0.07～42nmol·L-1范围内与552nm处共振散射强度增大值ΔI成线性关系,其回归方程为ΔI=12.0c+9.2,线性相关系数为0.9965,方法检出限为0.03nmol·L-1Pb2+.该方法用于水样中铅离子检测,结果与石墨炉原子吸收光谱法结果一致.     

双链DNA裂解-纳米金共振散射光谱探针检测痕量UO2^2＋

在pH 5.5的2-（N-吗啉）-乙磺酸缓冲液中,底物DNA和酶DNA杂交形成双链DNA（dsDNA）.当加入UO 2＋后,dsDNA中的底物DNA链被裂解,释放的裂解链DNA吸附在金纳米粒子（GN）表面,未吸附裂解链DNA的GN在NaCl存在下发生聚集,在610 nm处有一最强的共振散射峰.随着UO 2＋的浓度增大,...     

纳米金核酸适配体共振瑞利散射光谱检测卡那霉素的研究

在pH 7.4的硼砂-硼酸缓冲溶液及NaCl存在下,纳米金与卡那霉素适配体可形成稳定的纳米金-核酸适配体复合物。而卡那霉素可与复合物中的适配体形成稳定的结构,并释放出纳米金,此时纳米金在NaCl作用下团聚成较大微粒,导致571 nm处的共振瑞利散射峰强度增强,据此建立了测定卡那霉素的新方法。考察了溶液pH值、NaCl浓度、反应时间、不同序列核酸适配体以及共存物质对测定的影响。在优化实验条件下,卡那霉素浓度在0.02~0.3 mg/L范围内与共振光强度(ΔI)呈良好的线性关系,相关系数(r)为0.995 6,方法检出限(3σ)为2.3μg/L。将该方法用于卡那霉素注射液中卡那霉素含量的测定,结果满意。     

纳米金共振散射光谱法测定痕量乐果

在H2SO4介质中,有机磷乐果和钼酸钠、酒石酸锑钾反应,生成淡黄色的有机磷锑钼三元杂多酸,纳米金在726 nm处产生一个较强的共振散射峰。抗坏血酸可将该有机磷锑钼杂多酸还原为有机磷锑钼杂多蓝,导致726 nm处共振散射峰的强度降低。乐果质量浓度在0.014～1.66μg/mL范围内与共振散射光强度降低值ΔI呈良好的线性关系,其回归方程为ΔI=155.4ρ+1.4,相关系数为0.9970,方法的检出限为3.9 ng/mL,该法可用于废水中乐果的测定。     

共振光散射光谱法测定痕量氯离子

定量测定氯离子的传统重量法、滴定法、硫氰酸汞比色法、比浊法的灵敏度和精密度均不够理想。共振光散射光谱法(Resonance Light Scattering RlS)是一种新的分子光谱技术,灵敏度高,可用普通的荧光分光光度计测量。本文用它测定痕量氯离子,结果令人满意。     

金纳米微粒与盐酸氯丙嗪相互作用的共振Rayleigh散射光谱研究及其分析应用

在pH 1.8~3.3的酸性介质中,金纳米微粒本身有一定的共振瑞利散射(RRS)强度,但盐酸氯丙嗪本身的RRS强度十分微弱,当二者共存时,溶液的RRS强度显著增强并出现新的RRS光谱,在280~368 nm之间产生强烈的散射带,其最大散射波长位于368 nm,并在284、440、498 nm处有明显的散射峰。在一定条件下,盐酸氯丙嗪在0~0.08 mg/L范围内与ΔIRRS强度成正比,方法具有较高的灵敏度,对盐酸氯丙嗪的检出限(3σ)达到1.75μg/L。本文考察了反应体系的RRS光谱特征,研究了适宜的反应条件、影响因素及分析化学性质,研究了共存物质的影响,表明方法具有较好的选择性,据此发展了一种用金纳米微粒作RRS探针测定盐酸氯丙嗪的新方法。