大蒜素对人卵巢癌SKOV3/DDP细胞增殖与凋亡的影响及机制

探讨大蒜素(DT)对人上皮性卵巢癌SKOV-3/DDP细胞的增殖抑制及诱导其细胞凋亡的分子机制。用人上皮性卵巢癌耐顺铂细胞株SKOV-3/DDP细胞随机分为4组:①正常对照组;②DT组:于培养基中加入DT(终浓度分别为5、10、20、40μg·mL-1)分别作用细胞24、48和72h;③顺铂(DDP)组(5μg·mL-1);④DT+DDP组(20μg·mL-1 DT和5μg·mL-1 DDP)。MTT比色法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡率,RT-PCR和Western blot分别检测基因bax、bcl-2的mRNA和蛋白表达。与正常对照组比较,DT组SKOV-3/DDP细胞增殖抑制率与凋亡率均有显著的增加(P0.05),且作用呈剂量和时间依赖性,Bax mRNA和蛋白表达上调,Bcl-2mRNA和蛋白表达下调(P0.05);与DT或DDP组比较,DDP+DT组的细胞生长抑制率及凋亡率均有显著增加(P0.05),且Bax mRNA及蛋白表达上调,Bcl-2mRNA和蛋白表达下调的程度大于单用组(P0.05)。大蒜素对SKOV-3/DDP细胞有显著的抑制增殖和促凋亡的作用,增加SKOV-3/DDP细胞对顺铂的敏感性,其机制可能与大蒜素调控Bax/Bcl-2蛋白表达有关。     

肠道微生态失调对小鼠海马星形胶质细胞的影响

精神分裂症是一种多病因的精神疾病。流行病学研究表明,肠道微生物与精神分裂症发生有关。繁育了精神分裂症易感基因Nrg1基因敲除(Nrg1-/-)小鼠,用抗生素破坏野生型和(Nrg1-/-)小鼠的肠道微生物系统,通过观察肠道微生态失调对小鼠大脑海马区星形胶质细胞的影响,来研究肠道微生态与精神分裂症发生的关系。将20d的C57BL/6雄性小鼠随机分成4组:对照组、肠道微生态失调组、易感基因Nrg1/敲除组、肠道微生态失调与易感基因互作组,每组12只。处理30d后,采用免疫荧光技术定量分析各组小鼠大脑海马区星形胶质细胞的分布与形态。结果显示,肠道微生态失调和敲除易感基因Nrg1都能激活星形胶质细胞,细胞膨大（P<0.05）,分支增多（P<0.01）。在一定程度上,肠道微生态失调与易感基因Nrg1交互作用加剧星形胶质细胞的活化（P<0.05）。     

泰和乌骨鸡及其黑素对小鼠红细胞过氧化氢酶及血浆过氧化脂质的影响

以泰和乌骨鸡及其黑素为药物直接喂养小鼠,测定实验鼠红细胞过氧化氢酶的活性及血浆过氧化脂质的含量,以探讨乌骨鸡是否具有抗衰老作用。实验结果表明：１）泰和乌骨鸡及其黑素有提高小鼠红细胞过氧化氢酶活性的趋势,但其提高的幅度尚未达到显著水平;２）泰和乌骨鸡及其黑     

介质的物化性质对PstI和PstI^＊活性的影响

利用限制性核酸内切酶PstI在不同的有机介质中的催化反应。研究了水含量、相对粘度，介电常数和渗透压等介质的物化性质对PstI原活性和星号活性的影响。结果表明这4种物化性质对PstI原活性和星号活性的影响恰好相反。     

泰和乌骨鸡及其黑素对果蝇寿命及小鼠SOD活性的影响

研究了泰和乌骨鸡及其黑素对果蝇寿命及小鼠ＳＯＤ活性的影响,结果表明１）泰和乌骨鸡及其黑素组果蝇的最高寿命略长;泰和乌骨鸡对果蝇的平均寿命没有明显影响,而其黑素能明显延长雌性果蝇的平均寿命。     

SMS沉默对HepG2细胞炎症和CD14表达的影响

肝细胞的炎性损伤与全身性炎症引起的多器官功能障碍的发生相关,LPS可致全身性炎症,在炎症发生过程中,CD14是LPS的膜受体,可通过激活NF-κB诱导炎症相关因子的表达,CD14主要分布于细胞膜脂筏部位,脂筏是由鞘磷脂(SM)和胆固醇相互锚定,并与相关蛋白质组成的一种微空间结构,因此降低SM的合成,会降低SM在脂筏部位的含量,进而改变脂筏结构及CD14在脂筏部位的分布,最终影响炎症的发生。本研究利用干扰载体pSUPER-SMS沉默HepG2细胞鞘磷脂合酶(SMS)的表达,并检测SM在脂筏部位的含量及CD14和TNF-ɑ的表达,结果显示SMS1和SMS2的mRNA水平表达和酶活都有显著下降(P<0.001,n=3),SM在脂筏部位含量和CD14的表达均有显著降低(P<0.001,n=3),导致LPS所致HepG2细胞TNF-ɑmRNA水平的表达下降。可见SMS可通过改变CD14在脂筏部位的含量,最终影响和炎症发生相关分子TNF-ɑ的表达。     

介质的物化性质对PstⅠ和PstⅠ*活性的影响

利用限制性核酸内切酶PstⅠ在不同的有机介质中的催化反应,研究了水含量、相对粘度,介电常数和渗透压等介质的物化性质对PstⅠ原活性和星号活性的影响.结果表明这4种物化性质对PstⅠ原活性和星号活性的影响恰好相反.     

2-酮戊二酸对水稻根部碳-氮代谢重要酶的活性影响

2-酮戊二酸是碳-氮代谢的重要调控因子，在培养液中添加2-酮戊二酸可以促进水稻幼苗根部碳-氮代谢酶的活性．为了确定2-酮戊二酸是否与这些酶之间存在直接作用（体内实验），取正常培养的水稻幼苗材料，在上述酶的测活体系中分别添加2-酮戊二酸，并进行酶活性测定（体外实验）．实验结果表明：2-酮戊二酸可以促进水稻幼苗根组织提取液中GS，HXK的活性，而对GOGAT，ICDH没有明显的影响．上述结果说明2-酮戊二酸作为一种效应物可能与GS、HXK结合，从而在体内、体外都促进了它们的活性．     

乌骨鸡活性肽对体外非酶糖基化的抑制作用

采用正交实验优化了体外非酶糖基化反应体系,体系中加入不同浓度的乌骨鸡活性肽I、Ⅱ37 ℃孵育,同时以肌肽为阳性对照,观察乌骨鸡活性肽对非酶糖基化反应的影响.通过测定预定时间体外非酶糖基化体系的吸光度和荧光值计算乌骨鸡活性肽对非酶糖基化反应的抑制率和对非酶糖基化终产物生成的抑制率.结果表明乌骨鸡活性肽Ⅱ对体外非酶糖基化反应和非酶糖基化终产物的生成均具有较强的抑制作用.     

不同pH对血红蛋白与过氧化氢复合物中间体的影响

以血红蛋白模拟过氧化物酶，在不同pH溶液中，测定并比较了催化反应中间体－Ⅱ的ks,t1/2和催化活性等。结果表明，中间体－Ⅱ的ks,t1/2和催化活性均与缓冲液的pH密切相关，其稳定性在pH5.0时最小，而此时的催化反应速度最高。     

逆转录病毒载体导入重组ICAD和ICAD-DM对STS诱导大鼠C6细胞凋亡的影响

为了观察caspase依赖的脱氧核糖核酸酶(CAD)及其抑制剂ICAD对星形孢菌素(STS)诱导的C6细胞凋亡的影响,用含有ICAD/DFF45和caspase抗性的ICAD/DFF45突变体ICAD DM基因的复制缺陷型逆转录病毒载体转染包装细胞,并用产生的病毒感染大鼠神经胶质瘤细胞株C6,筛选获得稳定表达目的蛋白的细胞.结果发现STS可显著诱导ICAD组的C6细胞出现DNA凋亡梯带,而ICAD DM组不出现DNA凋亡梯带;与ICAD DM组相比,STS对ICAD组MTT代谢的抑制作用更强(P<0.05);透射电镜观察显示ICAD DM组的细胞核形态改变弱于ICAD组.表明ICAD/DFF45的切割应在CAD/DFF40的激活中占主导地位,抑制ICAD/DFF45的切割并不能阻止凋亡的发生,但可延迟细胞死亡的速度,对染色质凝聚和核固缩的出现亦有一定抑制作用.     

不同染色方法显示卵巢凋亡颗粒细胞的比较

为比较卵巢凋亡细胞形态在不同染色方法下的实验结果,选用HE、甲基绿-派洛宁、吖啶橙、Hoechst33258等对家兔卵巢组织石蜡切片染色,普通光镜或荧光显微镜进行观察,比较不同染色方法显现凋亡细胞的特异性是否有差异。实验结果显示,4种方法均可以识别凋亡细胞,荧光染色与普通染色间存在显著差异性。     

水溶性壳聚糖浸种对小麦幼苗抗性相关酶活性的影响

利用0.5 g/L的5 种水溶性壳聚糖分别对小麦进行浸种处理,在幼苗发育的5 个时期对叶内苯丙氨酸解氨酶、多酚氧化酶、过氧化物酶和超氧化物歧化酶的活性进行测定.壳聚糖处理降低叶内苯丙氨酸解氨酶活性.多酚氧化酶活性变化不显著,初期酶活性较对照高,随幼苗发育先降后升.壳聚糖浸种处理显著提高叶内过氧化物酶和超氧化物歧化酶活性.5种分子量中以10×103的壳聚糖C浸种处理小麦幼苗叶内抗性相关酶活性强.     

温度对红花抗氧化活性的影响

红花(Carthamus tinctorius L．)在100℃时。加热不同的时间2，6。15，21，30h。测定其红外漫反射光谱。图谱表明。加热可能使红花中某些化学成分的结构发生了变化。进一步比较加热前后红花水提物及乙醇提取物对超氧自由基。DPPH自由基的清除作用。结果进一步表明，加热使红花某些活性成分的结构发生了变化。而使其抗氧化活性受到较大影响。     

乌龟形态性状对体重的影响效果

选择I龄乌龟291只,测定背甲长、背甲宽、甲桥长、腹甲长、腹甲宽、体高和体重共7个性状,采用相关分析和通径分析方法,计算了以形态性状为自变量对体重做依变量的相关系数、通径系数、决定系数及相关指数,定量地分析了形态性状对体重的影响效果。结果表明,乌龟7个形态性状与体重的相关系数达到极显著水平(p﹤0.01);通径分析揭示了多元分析中多个自变量与依变量的真实关系,背甲长、背甲宽、体高和腹甲长对体重的通径系数达到显著水平,它们是影响体重的重要指标,其中背甲长对体重的直接影响(0.597**)最大,是影响体重的主要因素,其次是背甲宽(0.193**)和体高(0.159**),腹甲长对体重的影响(0.063*)较小;甲桥宽与体重的相关程度很大(0.873),但它与腹甲宽对体重的直接影响都非常小,主要通过其他性状间接影响体重,是影响体重的次要因素,均被剔除;决定系数分析结果与通径分析结果有一致的变化趋势;所选形态性状与体重的复相关指数R2=0.940,说明影响体重的主要自变量指标已经找到,多元回归分析建立了背甲长(X1)、背甲宽(X2)、腹甲长(X4)、体高(X6)对体重(Y)的回归方程,回归截距和相应的回归系数分别是-236.255,2.421,1.188,0.162,1.680;建立回归方程为Y=-236.255+2.421 X1+1.188 X2+0.162 X4+1.680 X6;为乌龟遗传育种提供一定的理论依据和测度指标。     

草果挥发油对肝癌H_(22)荷瘤小鼠的抑瘤作用

建立肝癌H22荷瘤小鼠模型,探讨了草果挥发油对肿瘤质量、胸腺指数和脾脏指数的影响,采用HE染色法观察肿瘤细胞形态变化,免疫组化法检测肿瘤细胞凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达.结果发现,草果挥发油各剂量组均能明显抑制肿瘤生长(p0.05);高剂量组(300 mg·kg-1)有些微毒副作用,各剂量组胸腺指数和脾脏指数较环磷酰胺(CTX)组有明显升高(p0.05);推测草果挥发油能够抑制H22荷瘤小鼠肿瘤细胞生长的机制是通过上调Bax蛋白表达,下调Bcl-2蛋白表达来诱导细胞凋亡.     

氧化型二硫苏糖醇对兔肌肌酸激酶的构象和活性的影响

采用利用内源荧光、1-苯氨基萘-8-磺酸（ANS）荧光、酶活性的测定以及动力学分析等手段，研究肌酸激酶在氧化型的二硫基苏糖醇（DTT）溶液中的结构与活性的变化．结果表明：随着氧化型DTT浓度的增加，肌酸激酶的活性逐渐丧失，直至完全失活，并伴随着构象的变化．肌酸激酶起初微小的结构变化就会导致酶活性的迅速丧失，而且其的失活先于明显可测的整体构象变化，酶分子的活性部位处于柔性区域内．另外，随着氧化型DTT浓度的提高，肌酸激酶的内源荧光发射峰位明显地红移，外源ANS荧光强度显著增强，即酶分子的疏水面加大，该结果暗示了酶蛋白的构象发生了改变．动力学分析表明，氧化型DTT对肌酸激酶的氧化过程是一个慢的可逆抑制过程，其反应的表观速率常数A的大小与氧化型DTT的浓度无关，因此是非络合型的．     

D609增强HT-29细胞对辛伐他汀的敏感性

为了探讨D609能否提高HT-29细胞对辛伐他汀的敏感性及其可能的机制,利用不同浓度的辛伐他汀处理人结肠癌细胞(HT-29)24h,利用MTT法测定并计算出IC50。随后根据上述浓度将HT-29细胞随机分为四组:对照组、D609组、辛伐他汀组和D609+辛伐他汀组,加药处理24h后,采用MTT法检测D609和辛伐他汀对HT-29细胞增殖的影响,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质印迹(WB)检测各组RIP140、SMS1、SMS2、BCL-2和BAX的表达。MTT实验结果显示,辛伐他汀可明显抑制HT-29细胞生长,且呈剂量依赖效应,其IC50为:67.98μmol·L-1,而辛伐他汀和D609联用可明显增强辛伐他汀对HT-29的生长抑制作用(P<0.05,n=3)。qRT-PCR和WB实验结果表明D609和辛伐他汀处理均上调了RIP140及BAX的表达,但降低了SMS1、SMS2、BCL-2的表达(P<0.05,n=3),而两者联用可显著增强这些改变(P<0.05,n=3),即D609可提高HT29细胞对辛伐他汀的敏感性,其机制可能与D609通过抑制SMS的活性和增加RIP140的表达有关。     

酸性介质对硅酸聚合胶凝的影响

对在不同酸性介质中的硅酸聚合胶凝曲线进行了研究，获得了有酸性介质存在时，不同pH值条件下硅酸的形态分布及转化特征．结果表明：在中性或弱酸性条件下、乙酸存在时，硅酸的聚合胶凝时间较其他酸性介质存在时有所延长，并证实了乙酸的存在能有效地减缓硅酸溶液中聚硅酸的生长速度．     

适度低温对棉苗细胞保护酶系统的影响

研究了适度低温１０℃／８℃处理过程中棉花超氧物歧化酶（ＳＯＤ）、过氧化物酶（ＰＯＸ）和过氧化氢酶（ＣＡＴ）同工酶的动态变化。结果发现经适度低温处理后棉花ＳＯＤ和ＣＡＴ同工酶酶带数和酶活性均明显增加，而ＰＯＸ同工酶酶酶带数和酶活性均明显减少。本文认为由适度低温诱导的植物细胞保护酶系统的上述变化，可能是植物抗寒锻炼提高植物抗寒性的生化机制之一。