重组质粒pPRS—1超声转化蓝藻Chroococcus sp.的研究

介绍了超声转化蓝藻的方法，并用此方法获得了重组质粒ｐＰＲＳ－１转化Ｃｈｒｏｏｃｏｃｃｕｓ ｓｐ．的转化藻落。从这些转化藻落中检测到重组质ｐＰＲＳ－１。此结果证明重组质粒ｐＰＲＳ－１是一种Ｅ．ｃｏｌｉ和Ｃｈｒｏｏｃｏｃｃｕｓ ｓｐ．之间均可转化的穿梭质粒。     

蓝细菌新质粒载体pPRS－1的构建

以蓝细菌Ｐｌｅｃｔｃｎｅｍａｂｏｒｙａｎｕｍ内源小质粒ｐＰｂｓ（１．５ｋｂ）和Ｅ。ｃｏｌｉ质粒载体ｐＢＲ３２２（４．３ｋｂ）为材料，用限制性内切核酸酶ＣｌａⅠ分别消化，经Ｔ＿４ＤＮＡ连接酶连接，转化Ｅ．ｃｏｌｉＨＢ１０１感受态细胞，在含Ａｍｐ（Ａｐ）和含Ｔｅｔ（Ｔｃ）的ＬＢ琼脂培养基上筛选出Ａｍｐ￣ｒＴｅｔ￣ｓ的转化子，提取转化子的质粒，用ＣｌａⅠ消化，得１．５ｋｂ和４．３ｋｂ两片段，表明转化子所含质粒是ｐＰｂｓ和ｐＢＲ３２２的重组质粒，定名为ｐＰＲＳ－１。     

蓝细菌新质粒载体pPRS—1的构建

以蓝细胞Ｐｌｅｃｔｏｎｅｍａ ｂｏｒｙａｎｕｍ内源小质粒ｐＰｂｓ（１．５ｋｂ）和Ｅ．ｃａｌｉ质粒载体ｐＢＲ３２２（４．３ｋｂ）为材料，用限制性内切核酸酶ＣｌａＩ分别消化，经Ｔ４ＤＮＡ连接酶连接，转化Ｅ．ｃｏｌｉ ＨＢ１０１感受态细胞，在含Ａｍｐ（Ａｐ）和含Ｔｅｔ（Ｔｃ）的ＬＢ琼脂培养基上筛选出Ａｍｐ＾ｒＴｅｔ＾ｓ的转化子，提取转化子的质粒，用ＣｌａＩ消化，得１．５ｋｂ和４．３ｋｂ两片段，表明转化子     

3－（5－甲基异恶唑－3－基）－4－芳酰基－1．2．4－三唑啉－5－巯基乙酸的合成

以３－（５－甲基异恶唑－３－基）－４－芳酰基－１．２．４－三唑啉－５－硫酮为原料，合成了８个新的３－（５－甲基异恶唑－３－基）－４－芳酰基－１．２．４－三唑啉－５－巯基乙酸类化合物，该化合物经ＩＲ，￣１Ｈ－ＮＭＲ和ＭＳ裂解碎片分析确定其结构。     

1，5－二甲基－6，8－二氧杂二环［3．2．1］辛烷的全合成

应用具有刚性结构的三环癸二烯酮，经高度立体选择性地引入官能团及逆第尔斯－阿尔德反应，合成了文题化合物（Ｆｒｏｎｔａｌｉｎ），包产率约２４．４％。     

硝酮与螺［5．5］－1－十一烯－3－酮的环加成反应

（Ｚ）－Ｎ一苯基－α－取代苯基硝酮与螺［５．５］－１－十一烯－３－酮的环加成反应，制得一种新的杂螺环及几个螺取代的异唑衍生物，经核磁谱确定只有一种区域选择异构体，两种几何异构体．并对３ｂ进行了ｘ－衍射结构分析，进一步证实了其立体构型．     

丝状蓝藻与大肠杆菌之间杂合质粒的构建与克隆

丝状蓝藻ｐｌｅｃｔｏｎｅｍａｂｏｒｙａｎｕｍ的ｐＰｂ１经ＨｐａⅡ酶酶切与ＡｃｃⅠ酶酶切的ｐＵＣ１３构成杂合质粒，杂合质粒克隆到Ｅ．ｃｏｌｉＪＭ１０９、频率为３．４％．转化进Ｅ．ＣｏｌｉＪＭ１０９的杂合质粒，用ＥｃｏＲⅠ和ＨｐａⅠ酶切后得到证实．杂合质粒转化到新制备的Ｐ．ｂｏｒｙａｎｕｍ原生质球或丝状体后，再生的藻体表现出高于原来两倍以上的Ａｐ抗性．利用Ａｐ敏感的Ｅ．ｃｏｌｉ平板培养，证实了转化入藻体的质粒对Ａｐ具有高抗性．然而，获得的Ａｐ高抗株在后续培养中不能继代维持．     

固－液相转移催化合成环丙烷－1，1－二甲酸二乙酯

本文报道了在固液相转移催化条件下，将氟化钾浸渍的氧化铝作为强碱，季铵盐作为相转移催化剂（ＰＴＣ），合成环丙烷－１，１－二甲酸二乙酯，探讨了该反应的机理。     

1，10－菲罗啉－5，6－二醌伏安行为研究

在０．５０ｍｏｌ·Ｌ~（－１）ＮＨ_３－ＮＨ_４Ｃｌ缓冲溶液中，１，１０－菲罗啉－５，６－二醌有一还原伏安峰。当静止富集２ｍｉｎ，ｖ＝１００ｍＶ·ｓ~（－１）时，其峰电位Ｅ_ｐ＝－１．３１Ｖ（ｖｓ．Ａｇ／ＡｇＣｌ）。用线性扫描和循环伏安法等手段研究体系的伏安行为，特别是吸附性。实验表明，该体系属具有吸附性的不可逆过程。用于单扫示波极谱法测定，线性范围为５．０×１０~（－８）～５．０×１０~（－６）ｍｏｌ·Ｌ~（－１），其相关系数为０．９９９５。     

1－（1－H－苯并三唑－1－乙酰基）－4－苯甲酰基氨基硫脲及其噻二唑和三唑啉衍生物的合成

于固液相转移条件下，以ＰＥＧ－６００为相转移催化剂，通过苯并三唑与氯乙酸乙酯反应，合成了１－Ｈ－苯并三唑－１－乙酸乙酯（Ⅱ）．Ⅱ与８５％的水合肼反应，制得相应的酰肼（Ⅲ）．Ⅲ与苯甲酰基异硫氰酸酯反应，则得１－（１－Ｈ－苯并三唑－１－乙酰基）－４－苯甲酰基氨基硫脲（Ⅳ）．Ⅳ在酸或碱存在下环化，分别得到１，３，４－噻二唑（Ⅴ）和１，２，４－三唑啉－５－硫酮。     

红树林共生真菌Paecilomyces sp.Tree 1-7 代谢产物的研究

Paecilomyces sp.Tree 1-7是一株采自台湾海峡的红树林共生真菌。用硅胶柱色谱及重结晶等方法,并根据理化性质和光谱数据对该菌的代谢产物进行了研究,从菌丝体中分离鉴定出三个化合物,分别为alatern in(1),5,8-二羟基-4-甲基-香豆素(2),3-羟基-3,6-二甲基-2,5-哌嗪(3)。对1进行了抗人的肝癌细胞hepG2及抑制乙酰胆碱酯酶(AChE)的活性测试,结果显示,化合物1有较强的抗肿瘤活性(IC50=7.0μg/mL),及很好地抑制AChE活性(IC50=0.87μg/mL)。     

表面活性剂对Achromobacter sp．CH-1解毒铬渣的影响

为提高细菌Achromobacter sp.CH-1(简称为A.sp.CH-1)解毒铬渣过程中酸溶性Cr(Ⅵ)的浸出率,研究不同表面活性剂对A.sp.CH-1的生长及其解毒铬渣效果的影响;通过考察表面活性剂的加入对细菌生长、Cr(Ⅵ)还原、铬渣中Cr(Ⅵ)浸出率以及浸出体系pH值的影响,评价不同表面活性剂促进A.sp.CH-1解毒铬渣的效果.研究结果表明:加入低浓度的表面活性剂对A.sp.CH-1菌的生长及其还原Cr(Ⅵ)没有显著影响;阴离子型表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)、非离子型表面活性剂吐温60、吐温80都能提高A.sp.CH-1解毒铬渣的效果,其最佳用量分别为75,200和250 mg/L:在此最佳用量下,铬渣中Cr(Ⅵ)的浸出率比原来分别提高约8%,9%和11%;阳离子表面活性剂十二烷基三甲基溴化铵(DTAB)对铬渣的解毒效果没有明显提高.     

多氯联苯降解菌Rhodococcus sp．RHA1的功能基因

概述了多氯联苯（Polychlorinated biphenyls,PCBs）降解菌-Rhodococcus sp．RHA1的功能基因研究,包括bphACB基因、etbAC基因、ebdA基因和bphDEF基因的结构和在降解途径中的作用和表达．     

阿特拉津降解菌株Alclegenes sp.SG1的分离鉴定和降解特性研究

用富集培养法,从农药厂的工业废水中分离到降解除草剂阿特拉津的SG1菌株,经16S rRNA基因序列分析,该菌株被鉴定为产碱杆菌(Alcalegenes sp.).Alcalegenes sp.SG1能以葡萄搪、果糖、蔗糖、麦芽糖、丙酮酸钠或柠檬酸钠为碳源,以阿特拉津为唯一氮源生长,将阿特拉津完全矿化.PCR分析表明,SG1菌株含有阿特拉津降解基因atzA、atzB、atzC和trzD.生物降解实验表明,与模式菌株Pseudomonas sp.ADP不同,额外加入氮源NH4Cl或KNO3,并不影响SG1菌株对阿特拉津的降解,30℃震荡培养16 h后阿特拉津降解率在98%以上,这一特性使其成为应用于阿特拉津污染土壤生物修复的优良候选菌株.     

转小鼠金属硫蛋白基因集胞藻6803及其野生藻培养

通过摇瓶培养考察转小鼠金属硫蛋白基因集胞藻６８０３及其野生藻的光合自养培养过程中碳源浓度、氮源浓度和光照度对这两种藻生长的影响。野生藻的最适生长碳源浓度（０．０５－０．５ｇ／Ｌ）比转基因藻的最适生长碳源浓度（０．０２－０．０５ｇ／Ｌ）高。氮源浓度对转基因藻和野生藻的影响趋势相同。在０．３－４．５ｇ／Ｌ范围内,随着氮源浓度的增高,藻体生长的最大细胞浓度降低。转基因藻生长的最佳光照度为１５００ｌｘ,野     

海洋新细菌Zooshikella sp.SY01的培养条件研究

从海南三亚海域表面海水分离得到一株能产具有强效生理活性的灵菌红素类化合物的海洋新细菌Zooshikella sp.SY01,对这株细菌的培养条件进行了研究。在2216E培养基中分别加入色氨酸、组氨酸、内酯酸、樟脑、柠檬烯、干酪素、二苯胍、香豆素、间二硝基苯等9种不同物质,培养5d后,利用( )ESI-MS技术测定了不同培养条件下代谢产物的产生情况。研究结果表明,加入色氨酸、组氨酸、干酪酸,不影响细菌灵菌红素的生物合成;加入内酯酸、樟脑、柠檬烯、二苯胍、香豆素对细菌生长或者灵菌红素的生物合成具有一定的抑制作用,能明显延迟培养液变红的时间;而加入间二硝基苯则能完全抑制细菌产灵菌红素类化合物。( )ESI-MS对细菌Zooshikella sp.代谢产物相对分子质量检测的结果也表明,在不同培养条件下能够产生化学结构多样的代谢产物,尤其是在柠檬烯组,检测到系列相对含量高的较大相对分子质量的化合物,表明该菌具有丰富的生物合成潜力。深入研究并优化该菌的培养条件,有望从该菌的代谢产物中发现更多新的灵菌红素类化合物和其它新结构的活性先导化合物。     

豆荚软珊瑚的次生代谢产物研究(Ⅱ)

从中国南海海域采集的豆荚软珊瑚Lobophytum sp.中分离了3个化合物.经IR,FABMS,NMR等波谱技术,确定它们的化学结构为:(24S)-麦角甾-5-烯-3β,7α-二醇,Δ4,5(E), Δ8,9(E)-鞘胺醇-正十六碳酰胺,(2S,3R,4E,8E)-1-(β-D-吡喃葡萄糖甙)-N-[(R)-2′-羟基-二十碳酰基] -9-甲基-4,8-二烯-1,3-二醇-2-氨基-十八烷,其中第3个化合物为新化合物.     

Method of transforming resistance gene to carbendazim intoTrichoderma sp.

The method of transforming resistance gene to carbendazim into Trichoderma sp. was studied by using genetic engineering technique. The results show that the time of fungicide selection on the transformed Trichoderma sp. may have very important effect on the resistance gene transformation. By this method, the resistance gene to carbendazim was transformed into Trichoderma harzianum, a strain of T. harzianum with resistance to carbendazim was achieved. The transformant could grow on the medium containing 150 μg/mL carbendazim. The resistance is stable after 10 times transfer on non-selective medium.     

Mixotrophic Cultivation of Tetraselmis sp. - 1 in Airlift Photobioreactor

Tetraselmis sp. -1 is a new microalgae strain constructed by cell fusion technique. In this paper, the mixotrophic cultivation of Tetraselmis sp.-1 in airlift photobioreactor is investigated.Firstly, the paper calculates the light attenuation in the mixotrophic medium, and sets the light attenuation model. Secondly, it uses the same dissolved oxygen coefficient (Ka) of flask culture to select the aeration of bioreactor. Finally, it sets the growth kinetic model, production (chlorophyll - a and total lipid) kinetic models and substrate (glucose) consumption kinetic model of Tetraselmis sp. - 1 in airlift photobioreactor.