本生烟NbSABP2和NbSAMT基因的克隆及VIGS表达载体构建

采用RT-PCR技术从本生烟中分别克隆获得水杨酸结合蛋白2(salicylic acid-bindingprotein2,SABP2)和水杨酸羧基转甲基酶(SA methyl transferase,SAMT)基因的全长序列.利用Gateway定向克隆系统,分别将SABP2和SAMT部分序列片段插入到烟草脆裂病毒(Tobacco rattle virus,TRV)载体中,构建了重组病毒载体pTRV2-NbSABP2和pTRV2-NbSAMT.将重组载体转化农杆菌GV2260,通过TRV病毒诱导的基因沉默(virus-inducedgene silencing,VIGS)系统,分别抑制本生烟SABP2和SAMT基因的表达.与TRV2空载体相比,pTRV2-NbSABP2载体浸润的植株生长矮小,叶柄基部和叶脉褐化,叶片向下塌陷;pTRV2-NbSAMT载体浸润的植株生长正常,无明显的表型改变.     

蓖麻组织培养及遗传转化概况

蓖麻油广泛用于航空、航天、纺织业、农药、医药,而且还是许多芳香物质的原料.组织培养技术能够保持植物原有优良性状等优势,通过遗传转化技术可以改良品种.本文以蓖麻组织培养的起始材料、激素的选择和使用,解决组织培养过程中问题的方法等,阐述了蓖麻组织培养和遗传转化的研究进展.     

核果类果树组织培养及遗传转化的研究进展

从离体快速繁殖，花药培养，胚胎培养，花、果实、果肉等器官培养，原生质体培养以及遗传转化等方面对核果类果树的组织培养研究进展进行了综述，并就其研究及应用前景进行了讨论．     

凌风草组织培养体系的建立

以凌风草为材料,通过对该植株再生条件的优化,获得适宜凌风草愈伤组织再生的外植体材料和基本培养基,建立凌风草愈伤组织再生体系.试验结果表明:愈伤组织诱导的最适外植体为凌风草种子,最适基本培养基为MS培养基,最佳培养基为MS+2,4-D 3.0 mg/L+6-BA0.3 mg/L;愈伤组织分化的最佳培养基为MS+NAA0.1 mg/L+6-BA1.0 mg/L+KT2.0 mg/L;生根最佳培养基为MS+NAA0.2 mg/L+C 0.2 g/L.     

生菜基因转化组织培养受体系统的建立

以散叶生菜大速生（Lactuca sativa var. capatata L.）为试材,以MS为基本培养基,采用不同的激素配比,经愈伤组织诱导、芽分化、生根、移植入土四个步骤的离体培养,获得正常的再生植株,建立了散叶生菜大速生的基因转化受体系统,为下一步的基因转化工作提供了有利条件。高效诱导愈伤组织培养基为MS 0.5 mg/L 6-BA 0.1 mg/L NAA,高效诱芽培养基为MS 0.1 mg/L 6-BA 0.05 mg/L NAA。同时确定了子叶外植体对抗生素的敏感性。试验表明,筛选培养基中适宜的卡那霉素选择压在100 mg/L以下,抑菌剂羧苄青霉素或头孢噻肟钠的适宜质量浓度均为300 mg/L。     

金银花组织培养无菌体系的建立

以河南封丘金银花品种带腋芽茎段为外植体建立无菌体系,通过不同的灭菌剂进行时间和浓度梯度的对比,以及两种灭菌剂混合使用对外植体进行灭菌处理,得出最佳灭菌组合：先用75％的酒精灭菌45s,然后用0．15％HgCl2灭菌8min。     

披碱草组织培养体系的建立

以青藏高原草地优质牧草－短芒披碱草为材料,通过对该植株再生条件的优化,获得了适宜短芒披碱草愈伤组织再生的外植体材料和基本培养基,建立了短芒披碱草愈伤组织再生体系.     

早熟禾的组织培养和基因枪介导的基因转化体系的初步建立

分析了不同质量浓度的２,４－二硝基苯酚对早熟禾愈伤组织诱导和愈伤组织分化成苗的影响,３ｍｇ／Ｌ和０．１ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ分别是本试验所用早熟禾基因型诱导形成愈伤组织和愈伤组织分化成勒的最适度量浓度。利用基因针ＧＵＳ基因的ｐＧＡ４７０和ｐＡｃｔ１－Ｄ质粒导入愈伤组织,通过组织染色法检测到Ｇｕｓ基因的瞬时表达。     

银星秋海棠组织培养的研究

采用不同培养基对银星秋海棠进行组织培养,结果表明：诱导银星秋海棠外植体产生愈伤组织的最佳培养基是：MS＋BA0.5mg/L＋NAA0.2mg/L;诱导意伤组织分化出芽的最佳培养基是：MS＋BA1mg/L＋NAAO.1mg/L;诱导生根的最佳培养基是：1/2MS＋NAAO.2mg/L.不同外植体产生愈伤组织的能力大小顺序为叶片＞叶柄＞嫩茎.试管苗移栽对基士的选择不严,成活率均较高.     

枸杞组织培养的培养基配方优化试验

通过对枸杞组织培养的培养基部分成分的改换,发现用普通白砂糖代替蔗糖、自来水代替重蒸水、回收琼脂代替实验用试剂级琼脂,并去掉肌醇,对枸杞分化苗的增殖、生根无明显影响,可大幅度降低枸杞组培苗的成本.     

转BnTR1基因的烟草对多种逆境胁迫的抗性研究

将BnTR1基因转化到了本生烟中,发现与非转基因对照相比,转基因烟草对甘露醇和PEG模拟干旱表现出较强的抗性,尤其是PEG胁迫时,三个转基因株系在生物量的积累和整体长势方面都优于对照.干旱处理20d后复水并培养14d后,对照烟草全部枯死,但是所有转基因烟草都恢复生长直至开花结果.当把烟草叶片圆片浸泡在系列盐水中,盐浓度超过600mM时,对照烟草圆片受损白化,而转基因烟草圆片能保持较大面积的绿色。热激蛋白基因HSP90和HSP70在所有烟草中的表达量都有明显提高,其表达量的增加在对照和转基因株系中并无差异,但是在正常条件下不表达的HSF30和sHSP17.6基因在热激处理后都表达了,而且HSF30的表达量增加了50%,sHSP17.6的表达量增加了30%.     

烟草光能兼养型愈伤组织的诱导和培养条件

以烟草SR1品种的4周龄叶片为外植体,使用MS＋2 mg/L 2,4 D（2,4-二氯苯氧乙酸）＋0.25mg/L KT（6-糖基氨基嘌呤）＋3%蔗糖＋0.8%琼脂的固体培养基成功诱导了叶片的愈伤组织.通过改变蔗糖浓度和激素配比,对兼性愈伤组织的培养基进行了筛选.结果表明：在500 lxs光照下,蔗糖浓度由3%降至1.5%时,愈伤组织有变绿趋势;蔗糖浓度〈1.5%时,愈伤组织容易出现褐化.2 mg/L NAA（α-萘乙酸）＋0.25 mg/L KT的激素组合可有效诱导愈伤组织的光合兼养,而单一植物激素如NAA和6-BA（6-苄氨基腺嘌呤）,不是理想的诱导配方.     

薮北茶树的组织培养研究

以薮北茶树带腋芽的茎段为外殖体获得再生植株，并建立起快速无性繁殖体系，以MS为基本培养基，附加各种浓度的植物激素．试验结果证明：最佳诱导培养基为MS十6—BA2．Omg/L；芽增殖培养基为MS十6—BAl．Omg/L十IBAO．2mg/L；最佳生根培养基为1／2MS十6—BAO．5mg/L十IBAO．1mg/L十NAAO．2mg／L十At^3 O．01mg／L。     

植物组织培养技术的应用以及在培养过程中存在的问题

介绍了植物组织培养技术的应用以及在培养过程中遇到的问题并提出解决的方法.植物组织培养技术的应用范围很广,目前主要用在离体无性系快速繁殖与无毒化、植物育种、遗传物质的保存、植物次生代谢物的生产和植物基因转化等方面.     

微重力细胞培养与组织工程

组织工程主要致力于组织和器官的形成和再生,其核心就是建立细胞与生物材料的三维复合体,形成具有生命力的活体组织,用于对病损组织进行形态结构和功能的重建并达到永久性替代。目前有关微重力和模拟微重力条件下细胞体外生长的研究提示微重力培养环境有利于细胞体外增生,维持有功能的细胞长期生长,并且有助于形成组织样结构,使培养得到的组织更接近于活体组织。因此微重力细胞培养为组织工程的研究开辟了新的前景。     

大豆组织培养和原生质培养研究的进展

大豆的细胞组织培养 ,在大豆遗传操作的研究中具有重要意义 ,受到国内外极大关注。现在已从大豆下胚轴、子叶、叶、顶芽和花药芽原生质体获得幼苗或植株的报道。但大豆的组织培养中与其他农作物相比在培养过程、成功率、植株再生方面仍较困难。本文对大豆的组织培养、植株再生、原生质体培养、花药培养、顶芽培养的研究进展和存在的问题作简要的评述     

红叶石楠的组织培养技术研究

将红叶石楠的茎尖、腋芽及叶片分别栽入各种比例不同的MS和WMP培养基中,实验结果表明MS 6-BA1mg／L 6-KT 2mg／L NAA0．3mg／L Vc5mg／L培养基诱导率最高,可达60％,再将这些诱导出的丛生芽转入MS 6-BA 2mg／L NAA0．2mg／L的分化及增殖培养基上,可获得大量的丛生芽。     

兰州百合的组织培养

以兰州百合鳞片作为外植体进行组织培养,分别对其进行芽诱导、增殖、生根培养,得到了兰州百合鳞片组织培养的最佳培养基配方：（1）芽诱导培养基：MS＋BA0．6mg／L＋NAA0．2mg／L＋琼脂7．3g／L＋蔗糖30g／L,pH5．8;（2）增殖培养基：Ms＋BA0．8mg／L＋NAA0．05mg／L＋琼脂7．3g／L＋蔗糖30g／L,pH5．8;（3）生根培养基：MS＋BA0．05mg／L＋NAA0．8mg／L＋琼脂7．3g／L＋蔗糖30g／L,pH5．8．观察与分析结果表明,外植体在前两种培养基上的繁殖速率较前人快约15d,第3种培养基与前人的相当,比其快2d．     

东北红豆杉愈伤组织诱导及组织培养研究

东北红豆杉扦插苗幼茎愈伤组织的诱导频率B5－B组（86．7％）＞MS－A组（60．2％）＞MS－B组（37．0％）。MS培养基中2，4－D和NAA同时存在时，愈伤组织诱导效果比不含NAA的要好1．5－2倍。MS培养基是 愈伤组织生长的适宜培养基。经过几代的继代培养，愈伤组织的生长周期由35－40d缩短为15－18d。红豆杉树与扦插苗间、树的不同个体间，甚至同一树不同部位的幼茎在愈伤组织诱导及生长方面都存在较大差异。