高效液相色谱法测定生物样品中多种蝶呤类化合物

建立了一种同时分离测定人体尿液中4种蝶呤类化合物(新蝶呤、异黄蝶呤、蝶呤和生物蝶呤)的高效液相色谱法。采用SHIMADZU Shim-pack:Vp-ODS(250 mm×4.6 mm×5μm)色谱柱结合荧光检测器,在流动相为甲醇-水(10+90),流速1.0mL/min,荧光检测波长Ex390 nm,Em450 nm,柱温为室温的色谱条件下,4种蝶呤类化合物分离效果良好。尿液经0.45μm的一次性滤膜过滤,取10μL滤液直接进样测定。结果表明,各组分的线性范围为:新蝶呤0.05～1.20μg/mL,异黄蝶呤0.05～0.80μg/mL,蝶呤0.05～1.00μg/mL,生物蝶呤0.05～1.00μg/mL。4种组分的检测限均为0.01μg/mL。该方法可应用于临床癌症病人和健康人尿样中4种蝶呤类化合物的检测。     

高效液相色谱-荧光检测法测定人体尿液中的蝶呤-6-羧酸

利用蝶呤-6-羧酸具有天然荧光的特点,建立了人体尿液中蝶呤-6-羧酸的高效液相色谱-荧光分析方法。尿液经硫酸铵处理后,过0.45μm水相滤膜,直接进行液相色谱分析,色谱柱为NOVA-PAK C18柱,保护柱为RCSS Guard-PAKTMC18柱,流动相为V(5 mmol/L KH2P04-NaOH缓冲溶液,pH 7.3)∶V(甲醇)=99∶1),流速为0.6 mL/min,荧光激发波长为338 nm,荧光发射波长为420nm。蝶呤-6-羧酸在0.05~1.2μg/mL范围内呈线性关系,相关系数为0.9974,检出限为0.010μg/mL。分别添加0.625、2.50和4.50μg蝶呤-6-羧酸标准品,平均回收率(n=5)在99.7%~105%之间,相对标准偏差小于3.6%。此法可用于临床尿样中蝶呤-6-羧酸的分析。     

高效液相色谱-荧光分析法同时测定人体尿液中黄蝶呤与异黄蝶呤

建立了高效液相色谱-荧光法同时测定癌症病人尿液中黄蝶呤及异黄蝶呤的新方法。选择荧光检测波长λex=345nm,λem=420nm。以磷酸盐缓冲溶液(pH=7.5)-甲醇(体积比为98∶2)为流动相,流速1.0mL/min,黄蝶呤与异黄蝶呤含量分别在0.0013～0.945μg/mL及0.00017～0.118μg/mL范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系,线性相关系数分别为0.9999和0.9996,检出限分别为0.5ng/mL和0.05ng/mL,加标平均回收率在86.2%～107.5%之间。方法应用于癌症病人尿样分析,取得了较好的结果。     

高效液相色谱-紫外检测法测定人体尿液中的蝶呤-6-羧酸

建立了人体尿液中蝶呤-6-羧酸的高效液相色谱-紫外分析新方法. 运用Lichrospher C18柱(250×4.6 mm,5 μm),甲醇-水(70∶30,V/V)为流动相,流速为0.4 mL/min,可较好地将尿液中蝶呤-6-羧酸与其它共存干扰物质分离.在355 nm检测波长下,蝶呤-6-羧酸在0.19～4.8 μg/mL范围内与色谱峰面积呈良好线性关系,相关系数为0.9999,方法检出限为0.015 μg/mL.尿液经0.45 μm滤膜过滤后,可直接进样分析,方法简便,应用于癌症病人和健康人尿样中蝶呤-6-羧酸测定,结果较好.方法的加标回收率为94.6%～100.2%,相对标准偏差为0.81%～ 5.07% .     

纸色谱分离-荧光检测法测定人体尿液中的黄蝶呤

报道用丙醇-氨水(25％)-水(15：9：6．V／V)作展开剂,纸色谱分离人体尿液中的蝶呤类化合物,并利用黄蝶呤与其它蝶呤类化合物的荧光性质的差异来测定人体尿液中黄蝶呤的含量。黄蝶呤在0～0．6μg／10mL的范围内,其荧光强度与其荧光斑点的洗脱量呈良好的线性关系,从而建立了一种新的测定黄蝶呤的方法。该方法应用于人体尿液中黄蝶呤的测定,结果满意。     

高效液相色谱-电喷雾质谱同时测定人体尿液中黄蝶呤与异黄蝶呤

建立了高效液相色谱-电喷雾质谱(HPLC-ESI-MS)法同时测定人体尿液中黄蝶呤与异黄蝶呤的分析方法.尿样经离心、过膜后直接进样,采用电喷雾质谱进行定性和定量.结果表明,黄蝶呤与异黄蝶呤含量分别在0.0204～2.04μg/mL和0.0202～ 2.02 μg/mL范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系,线性相关系数r2...     

高效液相色谱-荧光光度检测尿液中溴鼠灵

提出了高效液相色等荧光光度检测尿液中溴鼠录。尿液经磷酸酸化至pH2．0并在LC-18固相萃取小柱上富集、净化,分取10．0μL试样溶液进行高效液相色谱测定。用XDB C18柱（150mm×2．1mm,5μm）为固定相,以甲醇及稀乙酸溶液（2＋998）以88比12的比例混合后作为流动相,在激发波长为270nm,发射波长为376nm的条件下进行荧光光度检测。结果表明：溴鼠灵在0．05～10．0mg·L^-1范围内呈线性关系,方法的回收率在79．8％～97．0％之间,相对标准偏差在4．0％～4．9％之间,测定限为0．07mg·L^-1。     

高效液相色谱荧光检测法分析氨基酸

氨基酸的分析方法应用最普遍的是离子交换色谱法。在-SH存在下,邻苯二甲醛(OPA)与伯氨基在柱后反应产生荧光物质进行氨基酸的检测是一种有效的微量分析法。而亚氨酸则须先用次氯酸钠氧化再与OPA反应。整个系统如图1如示。我们应用此法分析了谷物的总氨基酸和茶叶中的游离氨基酸含量。     

高效液相色谱-荧光检测法测定葡萄酒中总亚硫酸盐

 摘要：建立了测定葡萄酒中总亚硫酸盐的高效液相色谱方法。N-（9-吖啶基）马来酰亚胺与样品中亚硫酸盐反应生成一种较强的荧光络合物,利用荧光检测器进行检测。方法具有样品用量少、操作简便、灵敏度高等特点,回收率为98.0％～103.0％,相对标准偏差小于4.6％。     

高效液相色谱-荧光法同时测定人体尿液中的酪氨酸和色氨酸

建立了高效液相色谱-荧光检测法同时测定人体尿液中的酪氨酸(Tyr)和色氨酸(Typ)。采用Diamonsil C18柱(250×4.6mm,5μm),以水-乙腈(80∶20,V/V)为流动相,流速1.0mL/min,荧光检测波长为λex=260nm、λ_(em)=340nm。Tyr和Typ的含量分别在0.10~6.0μg/mL及0.050~6.0μg/mL范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系(r=0.9993),检测限分别为0.05μg/mL和0.02μg/mL。在三个添加水平的回收中,两种氨基酸的平均回收率在86.3%~122.3%之间,相对标准偏差(RSD)小于8.51%。将所建立的方法应用于健康人、普通病人和癌症患者晨尿检测,结果发现:癌症患者尿样中色氨酸的水平与健康人和普通病人相比偏低。     

测定大气气溶胶中多环芳烃的高效液相色谱编程荧光法

建立了高效液相色谱法分析１４种多环芳烃（ＰＡＨｓ）的最佳分离条件及测定的最佳荧光激发、发射波长，多环芳烃化合物的最小检测量从０９０到５５１９ｐｇ，各化合物保留时间的相对标准偏差ＲＳＤ＜０３４％，在所测定的含量范围内具有很好的线性关系。该法用于大气气溶胶中的多环芳烃分析时，气溶胶的萃取物不经预处理可直接测定，收集样品的４个滤膜加标后测定的平均回收率为９２８％～１０８％。     

高效液相色谱-荧光检测法测定血浆中总同型半胱氨酸

 建立了测定血浆中总同型半胱氨酸的柱前衍生、高效液相色谱-荧光检测的分析方法。以Br omobimane作荧光剂,对巯基进行衍生。同型半胱氨酸的最低检测浓度为0.5 μmol/L,线性 浓度范围是2.5～80.0 μmol/L,回收率为94.0%～112.0%,批内、批间相对标准偏差都小于5. 6%。 关键词：     

高效液相色谱-柱后化学发光法检测人体尿液中的卡托普利

在酸性条件下,Ce(Ⅳ)氧化Ru (bipy)32+生成Ru(bipy)33+,同时氧化卡托普利生成二硫化物中间活性态([RS-SR]*),Ru(bipy)33+和二硫化物中间活性态之间相互反应产生强烈的化学发光.基于此,根据发光试剂Ru (bipy)32+水溶性好、试剂稳定等特点,将其加入到流动相中,通过高效液相色谱分离,建立了柱后化学发光快速灵敏检测卡托普利的方法.在以甲醇-0.01 mol/L KH2PO4-lg/L Ru(bipy)32+ (80∶2∶02,V/V)为流动相,流速为0.9 mL/min,8.0×10-4 mol/L Ce(Ⅳ)的优化实验条件下,方法的线性范围为2.0×10-7～1.0×10-4 mol/L (R2=0.9988),检出限为6.0×10-8 mol/L(S/N=3),并对1×10-5 mol/L卡托普利平行测定11次,相对标准偏差(RSD)为1.8％.将本方法用于人体尿液中卡托普利含量的测定,结果令人满意.结合化学发光光谱,对该体系发光机理进行了探讨.     

高效液相色谱法测定人尿中神经鞘氨醇和二氢神经鞘氨醇

建立了一种检测人尿中神经鞘氨醇（So）和二氢神经鞘氨醇（Sa）的高效液相色谱方法（HPLC）。离心分离尿样中的片状剥落细胞,裂解后用乙酸乙酯萃取、邻苯二甲醛衍生,在HPLC系统中通过梯度洗脱用Nova-PakC18－RP色谱柱（15cm×3．9mm,4μm）分离、荧光检测器检测。So和Sa的检出限均为0．05ng（女性尿样0,075μg/L、男性尿样0．005μg/L）。分析从我国一个村在采集的40份尿样,女性尿样中So、Sa和Sa／So比值分别为1．29－13．58μg/L、0．25－3．13μg/L和0．15－0．25,男性尿样中分别为0．075~3．07μg/L、0.019－0．50μg/L和0．028～0．26。     

高效液相色谱化学发光检测人体血清及尿样中的盐酸肾上腺素

研究发现,盐酸肾上腺素在碱性条件下能显著增强铁氰化钾-鲁米诺化学发光强度。基于此建立了新的测定肾上腺素的方法。本方法以C18反相键合相为色谱柱,用0.01 mol/L邻苯二甲酸氢钾-甲醇(92∶8,V/V)为流动相,实现了对人体血清及尿样中盐酸肾上腺素的分离与测定。在最适宜条件下,方法的线性范围为10~5000μg/L;检出限为4.0×10-6g/L;相对标准偏差为3.0%(n=11)。     

Determination of Diethylstilbestrol in Aquatic Products by High Performance Liquid Chromatography with Fluorescence Detection

A sensitive method for the determination of diethylstilbestrol (DES) in aquatic products by high performance liquid chromatography (HPLC) using a fluorescence detector (FLD) was developed. By means of sulfonation in concentrated sulfuric acid and hydrolysis, DES was converted into a reaction product that can emit fluorescence and determined by HPLC. For the first time, HPLC with FLD was applied to the determination of DES and sensitivity comparable to that of LC‐MS gained. The limit of detection was 0.1 µg·kg^?1, and the recoveries were above 86% with relative standard deviations less than 6.2%. The proposed method was successfully applied to the determination of DES in aquatic products.     

人尿中异黄酮的高效液相色谱分析

建立了测定人尿中异黄酮组分(大豆苷原、黄豆黄素、雌马酚、染料木黄酮)含量的反相高效液相色谱法。在尿样中加入黄酮作为内标,异黄酮经酶解后在pH=7.0中性条件下用乙酸乙酯(1∶1)提取,然后用0.02%TFA-M eOH-ACN三元梯度洗脱的方法分离异黄酮。在该条件下,大豆苷原、黄豆黄素、雌马酚、染料木黄酮的检出限分别为12.9 nmol/L、13.9 nmol/L、71.6 nmol/L和11.8 nmol/L;回收率均在89%以上。本方法具有测试步骤简单、准确度高、重现性好等优点,适合大批量样品测定。