高灵敏的化学发光微流控电泳芯片检测系统的研究

化学发光检测具有灵敏度高、光学构型简单和背景低等特点,非常适合于毛细管电泳和微流控芯片检测.毛细管电泳-化学发光检测方法已成功地用于氨基酸、蛋白质、ATP、过渡金属离子和镧系元素离子等的检测,对金属离子的检测限达到l0¹²mol/L.     

微流控芯片上的红细胞电泳淌度研究

以单细胞成像法分别测量了 3组无农药含水质净化剂、有农药无水质净化剂及其有农药有水质净化剂处理后的杂交鲤鱼红细胞在塑料 ( polymethalmethacrylate ,PMMA)微流控芯片上的电泳淌度。其值分别为 1.138× 10 -4、0 .12 79× 10 -4和 - 0 .85 2 0× 10 -4cm2 v-1s-1。从电泳淌度的差别可以看出功夫菊酯和水质条件恶化均可使鲤鱼红细胞表面的电荷密度发生变化 ,从而引起电泳淌度的变化。同时还初步考察了细胞电泳淌度作为参数进行细胞分类的可行性 ,显示这种淌度差别有可能作为细胞分类的一项依据     

微流控芯片电泳/电化学检测人单个肝癌细胞中的谷胱甘肽

采用微流控装置结合电化学检测研究了测定人单个血红细胞中谷胱甘肽(GSH)的方法。在该方法中,细胞的进样、定位、溶膜以及细胞中谷胱甘肽的转移和检测都在配有通道端安培检测器的双T形芯片中完成。单个细胞用液压导入到双T的交界面,在电泳缓冲液中毛地黄皂苷的作用下,细胞膜被穿孔。再施加直流电压,细胞被溶膜。释放出来的GSH被此直流电压电迁移至通道端并在Au/Hg电极上被检测。用校正曲线法可以定量测定单个细胞中的GSH。     

微流控芯片化学发光检测系统研究

在微流控芯片上实现了鲁米诺-过氧化氢-Co2+化学发光反应及分析应用研究。探讨了分离电压对电泳图谱的影响,发现在选定实验条件下,Co2+检出限可达到2.0×10-6mol/L;并且在微流控芯片上实现了Co2+与Cu2+的快速分离及检测。     

化学发光检测在微流控芯片中的应用综述

综述了近年来化学发光检测在微流控芯片中的应用.指出微流控芯片(又称为"芯片实验室"或者"微型全分析系统")因具有小型化、集成化和自动化等特点而在近20年来日益受到关注,而化学发光检测具有仪器结构简单、背景噪音低、操作和维护成本低等优点,非常适合用作微流控芯片的检测手段.     

微流控电泳芯片中化学发光信号的分段门限小波降噪

采用分段门限小波降噪(STWD)方法对化学信号中的异方差噪声进行降噪处理.用STWD法和统一门限小波降噪法同时处理两种模拟信号(其中之一包含异方差噪声).结果显示,优化参数的STWD法能够更有效地提高降噪效果.采用STWD法对微流控芯片化学发光检测信号中的异方差噪声进行处理,取得了满意的降噪效果.     

微流控芯片电泳快速分离脂蛋白

描述了一种芯片电泳快速分离脂蛋白的方法. 利用自制的微流控芯片及激光诱导荧光技术电泳分离经硝基苯并噁二唑-C₆-酰基鞘胺醇预染的脂蛋白标本, 在40 mmol/L tricine缓冲液(pH 9.4)中加入40 mmol/L甲基葡胺, 在500 V电压下40 s进样, 在2000 V 电压下2 min内完成分离, 可出现低密度脂蛋白(LDL)与高密度脂蛋白(HDL)两条脂蛋白区带, 5次重复性试验其出峰时间变异系数(CV)为2.6%. 本法为高血脂患者提供了一种快速、简便、灵敏、重复性好的诊断方法.     

微流控芯片化学发光检测系统的设计及其应用

通过标准光刻、化学刻蚀及热键合技术制作微流控电泳芯片,在芯片上集成流通式化学发光检测池,实现样品的芯片电泳分离化学发光检测.采用双(2,4,6-三氣苯基)草酸酯(TCPO)-过氧化氢化学发光体系,通过微泵输送化学发光试剂.单酰化苯并氨基酸和单酰化肌氨酸在该系统中得以成功地分离检测,其检测限分别达到2.8和3.2 μmol/L.     

基于复合型微流控芯片的紫外检测毛细管电泳系统

提出了一种基于芯片-毛细管复合装置的紫外检测-微流控芯片毛细管电泳分析系统.采用小死体积的耦合技术实现了石英毛细管与“十”字通道型微流控玻璃芯片的耦合.本系统的紫外检测灵敏度与商品化毛细管电泳仪相当.采用夹流进样方式,达到较高的进样重现性,2mmol/L苯甲酸的峰高相对标准偏差(RSD)为1.5%(n=11).可用于复方磺胺甲唑片剂的两种有效成分的快速分离.     

微流控芯片直接化学发光检测方法研究

基于Ru(bipy)₃²⁺的化学发光反应,建立了一种新型微流控芯片化学发光检测方法.以草酸为研究对象,探讨了表面活性剂CTAB的浓度、化学发光反应酸度以及Ru(bipy)₃²⁺浓度等因素对峰形以及检测灵敏度和重现性的影响.草酸的线性范围为1.0×10^-4~5.0×10^-6mol/L,检测限达到2.0×10^-6mol/L.该方法的建立为微流控芯片分离检测某些有机酸、药物、环境物质及核酸等提供了新方法.     

Analysis of Amino Acids in a Single Human Red Blood Cell by Capillary Zone Electrophoresis with Intracellular NDA—derivatization and Electrochemical Detection

A novel method for determination of amino acids in individual red blood cells has been developed. In this method, the derivatization reagents (NDA and CN^-) are introduced into living cells by electroporation. After completion of derivatization,the amino acids in a single cell is determined by capillary zone electrophoresis with end-column amperometric detection.     

一种基于微芯片电泳平台的级联化学发光信号放大策略用于HIV-DNA的高灵敏检测

该文基于微芯片电泳-化学发光检测（MCE-CL）平台,以辣根过氧化酶标记的DNA(HRP-DNA)作为信号探针,利用HRP 催化鲁米诺和双氧水化学发光反应及目标分子与DNA的杂交反应,结合T7Exo酶辅助信号放大,建立了一种MCE分离辅助双循环化学发光信号放大的新方法。结果显示：优化实验条件下,在1.0×10-14~5.0×10-9 mol/L范围内,HIV-DNA的浓度对数值与HIV-DNA的化学发光强度呈良好的线性关系,检出限（S/N=3）为1.6×10-15 mol/L,在0.10、0.25、1.0、10（×10-12 mol/L）4个加标水平下的回收率为93.0%～103%,相对标准偏差（RSD）为0.50%～3.7%,方法具有较好的准确度,可应用于人血清中HIV-DNA的高灵敏检测。     

毛细管电泳-间接化学发光法检测尿液与血液中吗啡含量

在碱性溶液中,吗啡对Ag(Ⅲ)配合物-鲁米诺化学发光体系的化学发光信号有显著抑制作用,且抑制程度与吗啡浓度成正比。基于此,建立了毛细管电泳-间接化学发光检测尿液和血液中吗啡含量的方法。在优化条件下,方法检出限为0.75 mg/L,线性范围为2.0~30.0 mg/L,相关系数(r)为0.999 8;对20mg/L的吗啡进行7次平行测定,测得的相对标准偏差(RSD)为2.0%。结合固相萃取法,该方法成功用于尿液和血液中吗啡含量的测定,平均加标回收率分别为109.0%与101.3%。该方法分辨率高、灵敏、分析成本低,可用于尿液和血液中吗啡含量的测定。     

毛细管电泳安培法分析单个神经细胞

毛细管电泳安培法分析单个神经细胞胡深，庞代文，王宗礼，程介克（武汉大学化学系，武汉，４３００７２）李之望，樊友珍，胡宏镇（同济医科大学实验医学研究中心，武汉，４３００３０）关键词毛细管电泳，安培法检测，单个细胞分析在生命科学研究中，单个水平的神经细胞...     

毛细管电泳安培测定鼠单个交感神经细胞中儿茶酚胺类神经递质

用自组装的毛细管电泳微电极安培检测系统，分析了鼠的单个交感神经细胞。大白鼠经麻醉、微解剖及酶解分离出新鲜的单个交感神经细胞。采用全细胞进样，用异丙肾上腺素 作内标。测定了儿茶酚胺类神经递质去甲肾上腺素和肾上腺素。检测限分别达 ５７ ａｍｏｌ和 ５９ ａｍｏｌ。八个活细胞分析结果，每个细胞平均含去甲肾上腺素 ４５５ ａｍｏｌ及肾上腺素 ６５ ａｍｏｌ。     

Rapid Determination of Free Amino Acids in Milk by Microchip Electrophoresis Coupled with Laser‐induced Fluorescence Detection

A simple and sensitive method for determination of free amino acids in milk by microchip electrophoresis (MCE) coupled with laser‐induced fluorescence (LIF) detection was developed. Seven kinds of standard amino acids were derivated with sulfoindocyanine succinimidyl ester (Cy5) and then perfectly measured by MCE‐LIF within 150 s. The parameters of MCE separation were carefully investigated to obtain the optimal conditions: 100 mmol·L^?1 sodium borate solution (pH 10.0) as running buffer solution, 0.8 kV as injection voltage, 2.2 kV as separation voltage etc. The linear range of the detection of amino acids was from 0.01 µmol·L^?1 to 1.0 µmol·L^?1 and the detection limit was as low as about 1.0 nmol·L^?1. This MCE‐LIF method was applied to the measurements of free amino acids in actual milk samples and satisfactory experimental results were achieved.     

A New Immunoassay Method by Capillary Electrophoresis with Enhanced Chemiluminescence Detection

Immunoassay based on capillary electrophoresis has recently been paid a great attention due to its excellent separation power, high analysis speed, small sample volume requirements, and automation 1,2. Since the injection volume is too small, immunoassay by CE needs an extremely sensitive detector. Laser-induced fluorescence3 and electro-chemical detections 4 have been used for this purpose. In fact chemilumi- nescence (CL) is also a highly sensitive method for detection, and is widely used …     

Multiplexed p53 Mutation Detection by Microchip Electrophoresis with Laser-Induced Fluorescence Detector

A form of single‐strand DNA‐conformation polymorphism analysis (SSCP) employing nondenaturing slab gel electrophoresis is applicable to the genetic diagnosis of mutations at exons 7, 8 and 9 of the p53 gene. Recently, microchip electrophoresis (ME) systems have been used in SSCP analysis instead of conventional slab gel electrophoresis in terms of speed, sensitivity and automation. The aim of the present study was to investigate the application of SSCP and ME analysis as a rapid and effective method to the detection of mutations for exons 7, 8 and 9 of the p53 gene. It was found that using the electric field strength 260 V/cm and the sieving matrix of 4 mg/mL poly(ethylene oxide) was very useful to achieve better resolution and fast detection of mutations at exons 7, 8 and 9 of p53 gene. Under the optimized conditions, mutations at exons 7–9 of p53 gene were analyzed within 60 s and the relative standard deviation values of the migration times were less than 5.81% (n=5). The detection limit can be as low as 1 ng·L^?1.     

毛细管电泳-间接化学发光法分离检测儿茶酚胺及儿茶酚

根据儿茶酚胺及儿茶酚淬灭铁氰化钾-鲁米诺体系发光的原理,利用毛细管电泳．化学发光联用技术分离测定了3种儿茶酚胺和儿茶酚,并优化了检测和分离条件。在最佳条件下,测得多巴胺、肾上腺素、去甲肾上腺素和儿茶酚的检出限分别为0．33、1．8、2、4和0、12μmol／L。本方法具有一定的选择性,对于医用注射液及尿样在未经预处理条件下可直接进行分离分析,结果令人满意。     

芯片毛细管电泳电化学发光法快速测定盐酸普鲁卡因的含量

建立了芯片毛细管电泳电化学发光法快速测定盐酸普鲁卡因含量的新方法。采用三联吡啶钌(Ru(bpy)2+3)为电化学发光试剂,三电极体系(直径300μm的铂圆盘电极为工作电极,集成在铂圆盘工作电极外的钛管为对电极,Ag/AgCl丝为参比电极)进行检测。分别考察了运行缓冲溶液pH值、检测缓冲溶液pH值、检测电位以及分离电压对分离和检测性能的影响。在优化条件下,即运行缓冲溶液为10mmol/L磷酸盐溶液(pH4.0),检测池缓冲溶液为含5mmol/LRu(bpy)2+3的50mmol/L磷酸盐缓冲溶液(pH7.0),检测电位为1.25V,分离电压为300V/cm时,盐酸普鲁卡因可在40s内实现较好的分离与检测,其线性范围为10~2000μg/mL(r2=0.9991),检出限(S/N=3)为3.0μg/mL,加标回收率为97%~99%,相对标准偏差为1.8%~2.2%。该方法简便、快速、准确,可用于盐酸普鲁卡因注射液的质量控制。