光亲和标记磷脂酸类似物的合成

合成了光敏基团位于sn-1脂肪酰基上的光亲和标记磷脂酸(PA)类似物,选用了有较高C-H插入效率的全氟苯基叠氮化合物作为光敏基团.用酶化学方法在PA类似物中引入了同位素标记³³P.初步实验表明,合成的PA类似物与天然PA一样对cAMP-磷酸二酯酶有激活作用,提示合成的PA类似物可进一步用于该酶的光亲和标记.     

Design and Synthesis of Photoaffinity Probe Candidates for the GABA-gated Chloride Channel

In order to characterize binding sites of insecticidal compounds on GABA gated chloride channel,new photoaf-finity probe candidates based on 5e-t-butyl-2e-[4-(substituted-propynyl)phenyl]-1,3-dithiane for the noncompetitiveblocker(NCB)site of the γ-aminobutyric acid(GABA)-gated chloride channel were designed and synthesized,andtheir potency as an inhibitor on NCB was measured by 4'-ethynyl-4-n-[2,3-~3H_2]-propylbicycloorthobenzoate(~3HEBOB)assay.The synthesized compounds showed high inhibition activities with half maximum inhibition concen-trations(IC_(50))of lower than 35 nmol/L and were very stable in binding conditions as well photoreacted quickly at300 nm light.These new compounds are expected to be good photoaffinity labeling probes if radioisotope iodine isincorporated.     

一种含光亲和标记异戊烯侧链探针的合成与初步表征

经5步反应、以9%的总收率合成了一种含生物素修饰和光亲和标记的异戊烯侧链功能探针分子, 初步考察了反应条件下该探针分子与Saccharomyces cerevisiae AS 2.399粗蛋白的相互作用; 生物素印迹分析结果表明, 酵母中多种蛋白被探针分子修饰, 为进一步开展化学蛋白组学研究奠定了基础.     

携异戊烯基光亲和化学探针的合成和应用

应用“一锅法”耦连反应为关键步骤合成了3个同时含有异戊烯链和叠氮基团的光亲和探针分子。在光照条件下这些化合物和酿酒酵母总蛋白反应后,经过点击反应与含有生物素的报告分子连接,再进行亲和素印迹分析,初步表明它们可作为钓取与异戊烯链相互作用蛋白的化学探针。     

应用光亲和分子进行PEG的光照修饰及蛋白质的光照偶联

合成了一种光活性标记分子-对叠氮苯甲酸,将其偶联到具有双羟基的碳酸酯与乳酸的共聚物P (LA-co-DHP)上,获得了具有光反应活性的可生物降解共聚物P(LA-co-DAP),在光照条件下,可以将蛋白质方便快捷地共价偶联到P(LA-co-DHP)聚合物纤维上.在溶液中进行PEG与对叠氮苯甲酸的光照反应,通过核磁共振光谱...     

手性偶氮光敏性分子钳的设计合成

以偶氮基为隔离基, 氨基酸酯为手臂设计合成了一类新型的光敏性分子钳, 其结构经¹H NMR, IR, MS及元素分析所确证, 并且考察了其对D/L-氨基酸甲酯的识别性能. 初步研究表明: 在310 nm紫外光照射后, 顺式异构体对D/L-氨基酸甲酯具有良好的手性识别能力.     

标签谷胱甘肽S-转移酶的二价亲和标记试剂的制备与应用

设计合成融合表达标签谷胱甘肽S-转移酶(GST)的二价亲和标记试剂,用于功能化磁珠后位点选择性固定化标签GST,为磁分离筛选配体混合物库提供固定化融合靶蛋白的候选方案。 为减少疏水配体在标签GST活性位点的结合,需同时占据标签GST双活性中心内疏水结合位点并发生共价修饰的二价亲和标记试剂。以双苯环为疏水定位基、溴乙酰基为巯基修饰基团、羧基为连接官能团得单价标记试剂,以二乙基三胺为连接臂将单价标记试剂与连接臂两端伯胺连接得标签GST的对称二价亲和标记试剂,再以线性三胺连接臂中间的氨基与羧基磁珠偶联得功能化磁珠。 表征目标化合物对标签GST的标记动力学、结合比;功能化磁珠对标签GST的不可逆固定化动力学和固载容量,及将磁珠表面二价亲和标记试剂转变成还原型谷胱甘肽(GSH)加合物后对标签GST可逆固定化的效果;以碱性磷酸酶及疏水荧光配体为模型考察磁珠固定化标签GST后的非特异结合。 目标化合物对标签GST半抑制浓度为(22±0.2) μmol/L,其与GSH的饱和加合物半抑制浓度为(0.41±0.06) μmol/L,二者与标签GST二聚体结合比接近1：1。 功能化磁珠对标签GST不可逆及可逆固定化的容量均接近25 mg/g磁珠。 偶联GST的磁珠对蛋白非特异吸附很弱,再进一步用单价亲和标记试剂和GSH加合物封闭固定化标签GST剩余的活性位点后对疏水小分子也无显著结合。 结果表明,所设计二价亲和标记试剂功能化磁珠适合用于标签GST及其融合表达蛋白的位点选择性固定化。     

荧光标记法研究鱼类GABA受体与Ro7-1986/1和Fipronil的相互作用

以苯二氮卓类化合物Ro7-1986/1和氟虫腈(Fipronil)分别与异硫氰酸荧光素(FITC)反应合成了2种γ-氨基丁酸(GABA)受体的配体荧光复合物,即FITC-Ro7-1986/1(简称FITC-Ro7)和FITC-Fipronil;利用傅里叶变换红外光谱(FTIR)和核磁共振氢谱(1H NMR)等手段对其结构进行了表征.以2种荧光配体为探针,采用荧光标记法研究了Ro7-1986/1和Fipronil与鳙鱼(Hypophthalmichthys nobilis)脑内GABA受体的相互作用,得到了亲和常数Kd和最大结合量[RT].同时考察了GABA对Ro7-1986/1与受体相互作用的影响.研究结果表明,Ro7-1986/1和Fipronil与受体的亲和常数Kd分别为(67±5)nmol/L和(346±6)nmol/L;最大结合量[RT]分别为(13.8±1.8)pmol/mg protein和(40.6±3.5)pmol/mg protein;GABA促进了Ro7-1986/1与受体的结合,进一步的研究结果表明,鱼类与哺乳动物脑中GABA受体结构相似;相对于哺乳动物,苯吡唑类杀虫剂Fipronil对鱼类GABA的亲和力较高.     

光图案化纳米孔薄膜集成微流控芯片的适配体亲和电泳研究

设计了一种集成微流控芯片,基于适配体亲和毛细管电泳技术分析了痕量蛋白质.此集成芯片包含两个功能性单元,即用于样品富集的纳米孔薄膜单元和用于样品分离的凝胶筛分介质单元,前者可以提高检测灵敏度,后者可实现复合物有效分离.利用空间可控光图案化技术,在玻璃芯片的特定区域制备聚N-异丙基丙烯酰胺纳米孔薄膜微结构,并在分离通道与薄...     

亲和色谱法研究β2-肾上腺素受体与盐酸巴马汀和盐酸药根碱的相互作用

采用亲和色谱法研究了β2-肾上腺素受体(β2-AR)与中药活性小分子盐酸巴马汀(Pa)和盐酸药根碱(Ja)的相互作用.前沿色谱法说明Pa与β2-AR之间存在一类结合位点,Ja与β2-AR之间存在两类结合位点.在pH 7.4,25℃时,用竞争洗脱法测得了Pa与β2-AR的结合常数为2.93×104 L?mol-1,结合位点浓度为1.13×10-4 mol?L-1,Ja在β2-AR低、高亲和力位点上的结合常数分别为1.93×104和1.56×105 L?mol-1,对应的结合位点浓度分别为1.25×10-4 mol?L-1和1.00×10-5 mol?L-1,两类结合位点数的比值为93∶7,且Pa和Ja在低亲和力位点上存在竞争作用.热力学研究表明,静电力是这两种药物与β2-AR之间作用的主要驱动力.     

检测亚硝酸根的近红外荧光探针的设计与合成

亚硝酸根(NO₂)浓度的失控对公共健康和环境的威胁日益严重。因此,开发一种简单有效地检测微量NO₂^-的方法是一个重要课题。本研究以双氰基异膦酮衍生物为荧光团,仲胺为识别单元,合成了一种近红外荧光探针(DIO),并将其用于NO₂的检测。实验结果表明,该探针在乙酸中具有强红色荧光(λ_em=670 nm),加入NO₂后,荧光强度大幅降低,在210 s内完成反应。探针可对不同浓度的NO₂进行定量检测,在0-1μmol·L^-1内具有很好的线性关系和较低的检出限(17 nmol·L^-1)。值得注意地是,当向红色的探针溶液中加入不同浓度的NO₂时,溶液颜色由橘红色逐渐变为黄色,使得该探针还可用于目视检测NO₂^-。此外,该方法对NO₂的检测具有较好的特异性,不受其他常见分析物的干扰。     

Ca2+与乳清蛋白结合的亲和毛细管电泳研究

利用亲和毛细管电泳研究了Ca²⁺与α-人乳清蛋白(α-HLA)的结合情况.以恒定浓度α-HLA作为受体,运行缓冲溶液加入不同浓度的Ca²⁺作为配体,可观察到由于Ca²⁺的结合,α-HLA的电泳淌度发生了变化.通过Scatchard方程的淌度比(M)处理数据得到α-HLA与Ca²⁺的表观结合常数(K_app)为2.0×107(mol/L)^-1.同时考察了Ca²⁺对变性剂(尿素)和热诱导所引起的α-HLA去折叠的影响,结果表明,Ca²⁺的结合增强了α-HLA的稳定性,也即提高了α-HLA抗变性剂和热诱导的去折叠性能.     

含UPy侧链聚氨酯的合成与性能

以二苯基甲烷二异氰酸酯（MDI）和聚四氢呋喃醚二醇（PTMG）合成预聚体,用2-甲基-2-UPy（2-脲-4[H]-嘧啶酮）基-1,3-丙二醇为扩链剂制备了一系列侧链含UPy的聚氨酯。利用FT-IR、1 H-NMR、DMA和力学性能测试等手段对该聚氨酯的结构和性能进行了表征。结果表明：该聚氨酯的力学性能与不含UPy基团的聚氨酯相比有较大的提升;UPy的四重氢键效应形成的物理交联网络结构,使该聚氨酯的玻璃化转变温度随UPy含量的增加向高温方向移动,损耗角正切（tanδ）峰减弱;在宽频的频率场中,随着UPy含量增加,tanδ峰向低频移动,峰强减弱,储能模量增大。     

1，2-环氧丙烷的光电离解离通道与机理

1,2环氧丙烷(下面简写成环氧丙烷)分子中含氧三员环具有很大的张力,且杂原子氧上含有未公享的电子对,分子中存在有很强的极性共价键,使其易于发生定向开环反应,常用于制造丙二醇、缩丙二醇、甘油等,是一种重要的有机合成化工原料和合成硝酸纤维脂等高分子材料良好的低沸点溶剂.近年来还发现,在含有的1,2环氧基团的天然产品中,这一结构单元对这些天然产品的生物活性起着十分重要的作用.环氧丙烷这种特殊结构,使其电离和解离过程与其它的杂环化合物(三员环以上)和一般的链状化合物有着明显的不同.这方面的研究工作仅有文献[1,2]报导,其方法是…     

以蒽醌酰亚胺为电子受体的共轭聚合物的设计与合成及其在光探测器上的应用

合成了5,8-二溴蒽醌-2,3-二羧酸,进一步制备出相应的酸酐和一个新的电子受体——N-(1-己基庚基)-5,8-二溴蒽醌-2,3-二羧酸酰亚胺.该化合物的活性很高,可通过钯配合物催化的偶联反应与不同的电子给体进行聚合获得相应的给受体型共轭聚合物.在计算机模拟的辅助下,设计合成了2个聚合物.聚合物P1选用苯并双噻吩衍生物作为电子给体基元,而P2在P1的基础上,选用3,4-乙烯二氧噻吩作为连接基元,两个聚合物的吸收波长覆盖整个可见光区.聚合物的LUMO(最低未占分子轨道)能级在-3.85 eV左右,且具有很好的溶解性,可与(6,6)-苯基-C61-丁酸甲酯掺杂制备出体异质结光探测器件.P2制备的光探测器件,在-4 V的偏压下,505 nm处EQE为26%,相应的归一化探测率(D*)为2.2×1011Jones.     

代谢标记小分子探针6-炔基-2-乙酰氨基半乳糖的合成

以乙酰氨基半乳糖为起始原料,经过叔丁基二甲基硅基对糖环的6位选择性保护,随后将1,3,4进行甲氧甲基保护,选择性脱除6位保护基,经Dess-Martin氧化、Bestmann′s试剂和酸性条件下去保护后得到目标化合物,并通过单晶衍射确定了中间体7的结构;本文为6-炔基-2-乙酰氨基半乳糖的合成提供了有效的制备方法,为后续相关生物学研究提供了基础。     

光和pH响应的功能单体的合成与表征

以4-硝基苯胺为原料经重氮化-偶合反应、酯化、硝基还原反应合成了一种对光和PH都能响应的功能单体4-氨基-4'-甲基丙烯酸酯基偶氮苯.用1H-NMR证实了该功能单体的结构.讨论了在Zn-AlCl3体系下选择性还原硝基的条件,得到了较优化的反应条件,获得了58.5%的分离收率.经紫外-可见光谱测试,该功能单体对光和PH都有很好的响应性能.     

苯甲酰甲酸酯/2959光引发剂的合成与性能研究

本工作以苯甲酰甲酸(BF)和2-羟基-2-甲基-对羟乙基醚基苯基丙酮(2959)为原料,通过酯化反应合成了一种光引发剂BF-2959,采用紫外、红外、核磁共振、元素分析等手段对其进行了表征。研究了光引发剂BF-2959的合成条件,得到最佳实验条件:以甲苯为溶剂,反应时间6h,反应温度105℃,以甲烷磺酸为催化剂,苯甲酰甲酸与2959的物质的量投料比为1∶1.1,产率为92.1%;产物为无色透明液体,与树脂的相容性较好,紫外最大吸收峰在246.1nm处。在涂膜光固化测试中,用4%的BF-2959引发B-206聚氨脂和TMPTA单体聚合,转化率为93%。     

一种新的荧光素类荧光探针的设计合成及其对血清中组氨酸的选择性标记

组氨酸是人类必需的一种氨基酸 .它含有高反应活性的咪唑环 ,并在生物体系中金属离子的传输和神经递质的传送等方面起着重要的作用 [1,2 ] .所以 ,生物体液中组氨酸的选择性测定对生物化学的研究具有重要意义 .然而 ,由于各种氨基酸在结构及性质上的相似性 ,选择性测定单独的氨基酸常常需要借助如高效液相色谱和毛细管电泳等一些分离技术才能完成 .各种化合物的官能团反应可为一些高选择性的分子识别提供基础[3] .目前各种主体分子 ,包括荧光纳米探针和分子印迹聚合物等在生物分子的选择性识别方面发挥着重要的作用[4～ 6 ] .环氧氯丙烷作为…     

受阻胺光稳定剂Chimassorb 119的合成

以N-丁基-2,2,6,6-四甲基-4-哌啶胺和2,4,6-三氯-1,3,5-三嗪为起始原料,经取代、甲基化反应后,与N,N′-二-（3-氨丙基）乙二胺进行亲核取代反应合成了受阻胺光稳定剂Chimassorb 119,总收率可达77.1 %,其结构经¹H NMR和ESI-MS确证。