溴化氰-气相色谱法测定硒蛋氨酸的研究（Ⅰ）

硒蛋氨酸是普遍存在于植物蛋白中的一种常见的硒氨基酸,它的测定对研究必需微量元素硒的营养以及硒与人体健康的关系有重要意义。 在蛋白质中,硒蛋氨酸总是与同系物蛋氨酸共存,其含量极微,在6mol/LHC1中水解7小时便完全分解,因此,氨基酸分析常用的酸水解—离子交换色谱分析法不适用于硒蛋氨酸的定量分析。Caldwell等     

反相高效液相色谱法测定深层培养含硒构菌菌丝体中的硒蛋氨酸

本文用苯异硫氰酸酯作柱前衍生化试剂，衍生的硒蛋氨酸及其它非硒代氨基酸用反相高交液相色谱进行分离分析，分析表明，加无机硒培养的构菌菌丝体中含一定量的硒蛋氨酸，且这一方法广泛适于生物物质中其它硒代氨基酸的分析。     

HPLC-ICP-MS联用技术在富硒金针菇硒的形态分析中的应用

从富硒培养的金针菇中分离得到含硒化合物, 并采用SE-HPLC-ICP-MS联机技术对浸提液中的含硒化合物进行分离分析; 同时对样品中的硒蛋白在特定条件下水解, 采用RP-HPLC-ICP-MS联机技术对水解液中硒代氨基酸进行确认, 并测定其中硒的含量. 结果表明, 可溶态硒是富硒金针菇中硒的主要存在形式, 其中小分子含硒有机化合物中的含硒量占浸提液中硒的71.87%; 而含硒蛋白所占比例为4.88%; 进一步确定富硒金针菇中含有硒代胱氨酸、硒代蛋氨酸和由二者组成的含硒多肽等, 各形态硒的含量为总硒量的12.3%, 17.6%和36.8%. 本方法将具有高效分离能力的色谱技术与高灵敏度的元素检测技术成功结合, 用于含硒生物分子中硒的在线分析, 具有快速、灵敏及准确等特点.     

硒代胱氨酸和硒代蛋氨酸电化学检测的比较

对硒代胱氨酸 (SeCys)和硒代蛋氨酸 (SeMet)在银电极上的电化学性质、电极反应机理及检测灵敏度等方面进行比较研究。实验表明 ,两者在pH9.5的硼砂 氢氧化钠介质中 ,于 -0 .62V和 -0 .68V(vs.SCE)处均存在一对氧化还原峰 ,电化学行为相似 ,两者具有良好的线性范围和低检出限 ,SeMet比SeCys具有更高的检测灵敏度。在相同的实验条件下 ,比较了含硫氨基酸与含硒氨基酸的电化学响应 ,含硫氨基酸的检测灵敏度远低于含硒氨基酸     

第二代抗癌药物卡铂与L-硒代蛋氨酸和L-蛋氨酸的相互作用研究

硒作为一种生命体所必须的微量营养元素，近年来由于其在防癌犤１，２犦和抗氧化，增强免疫力等方面的作用而越来越受到广泛的关注。其中L－硒代蛋氨酸（L－Se－MetH）作为一种有效的防癌剂正处在临床试验阶段犤２犦。对于硒代蛋氨酸在抑制癌细胞生长和在体内的抗氧化作用的机理已有很多报导犤３～５犦，但作为生物体的主要含硒氨基酸之一，与L－蛋氨酸（L－MetH）相比，它与金属离子的作用却少见报导犤６，７犦。本文利用电喷雾质谱（ESMS）和２D犤１H－１５N犦HSQCNMR的手段研究了第二代铂类抗癌药物卡铂（犤Pt（NH３）２（CB…     

75Se-蛋氨酸的薄层色谱和纸色谱行为

L型~(75)Se-蛋氨酸或DL型~(75)Se-蛋氨酸的无菌溶液,用于肝、胰和甲状旁腺的扫描,进行其病变包括肿瘤的诊断,还可以用来测定动物或人体中蛋白质的转化。~(75)Se蛋氨酸中的主要放化杂质是亚硒酸、砜和亚砜。本工作利用国产滤纸型硅胶薄层片(G)和WhatmanNO.1色层纸(上行、下行以及小型)对~(75)Se-蛋氨酸、亚硒酸、亚砜和砜的薄层色谱和纸色谱行为进行了观察,以期寻找快速、理想的分离方法。     

柱前衍生化-HPLC法测定恩施3种富硒蔬菜中硒氨基酸

采用HPLC与ICP-MS间隙联用的方法,以柱前衍生化-HPLC法进行定性定量分析,使用ICP-MS鉴定,建立一种富硒蔬菜中硒氨基酸的分离检测方法。结果表明:所测定的硒代氨基酸在其线性范围内呈现良好的线性关系(R2>0.999)。该方法中硒代蛋氨酸和硒代胱氨酸的检出限分别为0.204 mg/L和0.680 mg/L,加标回收率分别为97.4%和94.0%,RSD分别为2.1%和0.69%。检测恩施富硒蔬菜样品,白菜、萝卜叶和苋菜含有硒代蛋氨酸和硒代胱氨酸。此方法可用于富硒蔬菜中硒代氨基酸的含量检测。     

高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法分析生物样品中硒的化学形态

建立了用于生物样品中含硒化合物在线分离分析的联用方法。用反相离子对高效液相色谱(RP-IP-HPLC)分离含硒化合物,用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)在线分析硒含量。与标准化合物的色谱图和工作曲线对照进行定性和定量分析,实现了对硒酸钠、亚硒酸钠、硒代胱氨酸、硒代胱胺、硒代蛋氨酸、硒代尿素和三甲基硒离子等7种生物体常见的含硒小分子的分析,检出限为0.1~1.5μg/L;线性范围为1~100μg/L,应用于人血清、尿、肝组织细胞质溶胶等样品中含硒小分子的形态分析,所需进样量仅50μL,各含硒化合物加标回收率在93%~117%。本方法操作简便,灵敏度高,重现性好,适合于各种生物样品中含硒小分子的形态分析。     

高压液相色谱分析DNS-[75Se]蛋氨酸

蛋氨酸属氨基酸类,无紫外吸收。[~(75)Se]蛋氨酸为其硒标记化合物,被广泛用作胰腺扫描、甲状腺扫描,某些肝肿瘤、恶性肿瘤的阳性扫描,恶性淋巴瘤的测定,胎盘机能的测定和人体内新陈代谢的研究等。 为提高分离效率,缩短分析时间,发展了柱前衍生化法。衍生化试剂1-二甲基胺萘-5-磺酰氯(DNS—C1)是示踪量测定氨基酸的最佳衍生化试剂,反应灵敏度比茚三酮高几个数量级。其衍生物制备迅速,重现性好,有紫外吸收,可利用高压液相色谱进行分离分析。     

硒酵母中有机硒及硒代氨基酸含量的测定方法

报道了人工培养硒酵母中有机硒及硒代胱氨酸（ＳｅＣｙｓ）和硒代蛋氨酸（ＳｅＭｅｔ）含量的测定方法。采用透析处理法使硒酵母中的无机硒和有机硒得以分离,并采用催化分光光度法测定了硒酵母中有机硒的含量;采用氨基酸自动分析仪测定了硒酵母中ＳｅＣｙｓ和ＳｅＭｅｔ的含量。     

气相色谱-质谱法测定富硒酵母中的硒蛋氨酸

建立了气相色谱-质谱（GC-MS）测定富硒酵母中硒蛋氨酸含量的方法。比较了3种从样品中提取硒蛋氨酸方法的效果。样品在三羟甲基氨基甲烷（Tris）缓冲液中酶解24 h后,以丁醇及三氟乙酸酐为衍生化试剂对硒蛋氨酸进行衍生化,采用选择离子模式对衍生物进行GC-MS测定。硒蛋氨酸的回收率为98.5%~103.7%,相对标准偏差为0.9%~2.4%,检出限为0.5 mg/L（S/N=3）。对实际样品进行测定,得到样品中硒蛋氨酸的含量结果。该法简便快速,准确可靠,灵敏度高。     

蛋氨酸硒络合反应条件的响应曲面法优化

以蛋氨酸和亚硒酸钠为原料合成了蛋氨酸硒;采用基于3因素5水平的中心组合设计实验的响应曲面法,分析了温度(30℃~80℃)、酸度(pH 4~9)、时间以及它们之间的交互作用对蛋氨酸硒产率的影响,确定了合成蛋氨酸硒的最佳工艺条件.通过典型分析确定优化的络合反应条件为:温度50℃,pH 6.93,时间90 min;相应的蛋氨酸硒的产率为51.58%.相关研究结果表明,采用响应曲面法优化确定的蛋氨酸硒合成工艺合理有效、切实可行.     

蛋氨酸与化学增感剂的相互作用机理

运用X射线光电子能谱 (XPS)的ESCA扫描技术研究了蛋氨酸与不同化学增感剂相互作用及其中的硫、金、碳和氧等元素的化学形态和相对含量的变化规律 .发现蛋氨酸与不同的化学增感剂的反应机理是不尽相同的 .蛋氨酸与S增感剂不会发生任何化学反应 ,它们可以稳定地共存于同一体系之中 ;蛋氨酸可以将全部Au3+ 增感剂还原为Au ,其自身部分被氧化为蛋氨酸亚砜 ,并且在其脱质子的羟基部位与Au形成Au -O -C结构的金属配合物 .向蛋氨酸体系中加入S +Au增感剂后 ,体系中的氧化还原反应发生在外加的Au3+ 和S2 O32 - 之间 ,此时蛋氨酸的作用是将被S增感剂还原的Au络合 ,亦形成Au -O -C结构的配合物 .     

气相色谱-质谱联用测定紫花苜蓿中的硒蛋氨酸

建立了气相色谱质谱联用(GC—MS)测定紫花苜蓿中硒蛋氨酸含量的方法。将紫花苜蓿中提取的叶蛋白样品在6 mol/L HCl溶液中,超声处理20 min。离心分离后,以丁醇及三氟乙酸酐为衍生化试剂对硒蛋氨酸进行衍生化,采用选择离子监测模式对衍生物进行GC—MS测定。硒蛋氨酸的回收率为97.6%~105.2%,相对标准偏差为1.7%~3.6%,检出限为0.3 mg/L。该法样品前处理简单,测定快速,结果准确,灵敏度高,可用于植物样品中硒蛋氨酸含量的测定。     

蛋氨酸与铅

蛋氨酸是一种含硫氨基酸 ,在细胞内可转化为参与各种毒物解毒过程的谷胱甘肽。 1 985年 ,Leeming发现小鸡铅中毒时对蛋氨酸的需要量增加。次年 ,Battle ( 1 986)证明 ,硫 -腺苷 -蛋氨酸有预防人和动物铅中毒的效能。摄入适量含硫氨基酸可以增加还原型谷胱甘肽 (GSH)的生物利用率 ,从而使铅更易从体内排出 ,使铅所致血液失调逆转 ,特别是对ALAD活性抑制的缓解更为明显 (ParedesSR ,1 986)。研究表明 ,无论单独给予蛋氨酸或与锌同时给予 ,均可阻止铅致肝GSH水平降低和血ALAD活性下降 ,并可降低尿ALA排泄以及铅在组织中的蓄积。Flora…     

溴化氰-气相色谱法测定硒蛋氨酸的研究（Ⅱ）——痕量硒蛋氨酸的测定

]提出痕量硒蛋氨酸测定方法——CNBr—piaselenole—GC法。在还原剂存在下,硒蛋氨酸与CNBr定量反应生成CH3SeCN,经CHCl3萃取后消化成Se(IV),继而用气相色谱法测定Se(IV),以间接测定硒蛋氨酸,共存的无机硒、硒胱氨酸无干扰,本法回收率为93.1±5.4％,可用于测定生物体中PPb级硒蛋氨酸而无需酸水解等过程。     

用手性毛细管柱分离硒蛋氨酸对映体

硒是人体必需的微量元素,而硒蛋氨酸(SeMet)是硒在生物体中重要的有机形态之一。因此研究DL-SeMet的拆分方法,从而确定SeMet在生物体中的SeMet的光学构型以及D/L比值,具有重要的意义。Boehm等曾用非手性柱法成功地拆     

硒-甲基硒代半胱氨酸的合成与拆分研究

天然硒-甲基硒代半胱氨酸为L型含硒氨基酸,是第21种人体必须氨基酸———硒代半胱氨酸的甲基化衍生物。1960年首次由Trelease S·F·等从美国黄芪中分离得到[1],它还广泛存在于大蒜、洋葱和椰菜等植物以及富硒酵母中。硒-甲基硒代半胱氨酸具有补硒、防治癌症、抗氧化、抗衰老、     

高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱（HPLC-ICP-MS）联用测定富硒小麦中硒代氨基酸

为科学补硒和促进富硒小麦的种植推广,建立了高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用技术(HPLC-ICP-MS)检测富硒小麦中硒代氨基酸的方法。用蛋白酶XIV辅助微波振荡提取富硒小麦中硒代氨基酸,采用C18 分离柱分离,以30.0mmol/L磷酸氢二铵+1.0%甲醇+2.0mmol/L四丁基溴化铵溶液(pH=6.5)为流动相,能在10min内实现5种硒代氨基酸的分离。在高能氦气模式（HEHe）下,用78Se的色谱峰积分面积作为定量依据,5种硒代氨基酸在1.0～200.0μg/L范围内线性相关性良好,检出限在 0.11~0.29μg/L之间。以富硒小麦为基体进行加标回收试验,除硒代胱氨酸（SeCys2）可能不稳定,易分解造成回收率偏低外,其他4种硒代氨基酸的加标回收率在92.34～102.46%之间,相对标准偏差为 1.6 %~4.2 %（n=7）。用该方法测定了农业科技工作者种植推广的富硒小麦,结果发现小麦中的硒赋存形态多为硒代蛋氨酸（SeMet）,此外,小麦中还含有少量硒代胱氨酸（SeCys2）、硒代半胱氨酸（SeCys）、甲基硒代半胱氨酸（MeSeCys）和硒代乙硫氨酸（SeEt)。该方法具有良好的精密度和准确度,适用于富硒小麦中硒代氨基酸的形态分析。     

同位素源激发X射线荧光分析法测定硒酵母中的硒含量

硒具有防癌及抑制癌的作用。江苏省启东县是我国肝癌的高发区之一,其肝癌的死亡率与该地区人体血液中的硒水平呈负相关。为此,启东肝癌研究所研究采用硒酵母(主要是含硒氨基酸)来补充人体中的硒。常用的测定硒方法是氢化物——原子