首乌总提取物对乙酰胆碱酯酶的抑制

研究了首乌总提取物对乙酰胆碱酯酶(AChE)抑制活性的筛选及抑制动力学。结果表明,首乌乙酸乙酯组分和水组分的抑制能力随着抑制剂浓度的增大而逐渐减弱,甚至表现出一定的增强作用,而水组分没有AChE抑制能力。水饱和正丁醇组分和石油醚组分均对AChE具有显著的抑制能力,两者对AChE的抑制作用类型分别为非竞争型和混合型的可逆抑制,水饱和正丁醇组分对AChE的非竞争型抑制常数Ki、Kis分别为3.2668μm ol/L和4.8194μm ol/L,石油醚组分对AChE的混合型抑制常数Ki、Kis分别为2.6985μm ol/L和4.7192μm ol/L,表明两种组分对游离酶的抑制作用均强于其对于酶-底物复合物的抑制作用,且后者较前者对AChE的抑制作用更强。     

甲基化抑制剂5-氮杂2′-脱氧胞苷对三维培养A549细胞辐射敏感性的影响

为探讨DNA去甲基化试剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-aza-2′-deoxycytidine,5-Aza-CdR)对三维(3D)培养模式下的肺腺癌细胞A549辐射敏感性的作用,开展了系列实验。使用不同浓度5-Aza-CdR处理单层(2D)A549细胞72 h后,MTT法检测其对A549细胞的增殖抑制作用。选取低浓度(2,5μmol/L)5-Aza-CdR预处理2D和3D培养的A549细胞72 h,X射线分别辐照1,2,4,6 Gy,检测微核形成率和克隆存活。实验结果显示,不同浓度的5-Aza-CdR均能抑制2D的A549细胞增殖,且呈剂量依赖性。5μmol/L药物预处理2D与3D细胞并联合辐照后诱导的细胞微核形成率均显著高于相应的对照组,并且细胞存活率显著降低。不过,较低浓度5-Aza-CdR(2μmol/L)预处理的3D培养A549细胞4,6 Gy辐照后微核数目较未用药处理组显著增加,克隆存活率较未用药组显著降低(P0.05),而在2D培养A549细胞中未观测到上述现象。研究结果表明,5-Aza-CdR能抑制A549细胞增殖,3D培养A549细胞药物预处理更能增加其辐射敏感性。结果暗示,为减少对正常细胞的毒性作用,在临床放疗中,可低剂量使用5-Aza-CdR,实现肿瘤的有效靶向治疗。     

光泽精化学发光体系的研究与应用

对光泽精化学发光体系的动力学性质、荧光光谱、化学发光光谱及化学发光机理进行研究和探讨。详细研究了光泽精 - H2 O2 - Co( )流动注射化学发光体系的最佳分析条件。结果表明 ,当光泽精 (L c)为 2 .5×10 - 5mol/L、H2 O2 为 0 .5 mol/L、Na OH为 0 .4 mol/L、CTMAB为 2 .0× 10 - 5mol/L时 ,测定 Co( )的校准曲线线性范围为 0 .0 5— 2 0 0μg/m L ,检出限为 0 .0 1μg/m L。对 10μg/m L Co( )连续测定 7次 ,相对标准偏差为 1.7%。     

HPLC法测定复方托吡卡胺滴眼液的有关物质

建立高效液相色谱法测定复方托吡卡胺滴眼液中有关物质的含量测定方法.色谱柱为Agilent Eclipse XDB-C8（150cm×4.6mE,5μm）,流动相为甲醇-0.01mol/L辛烷磺酸钠溶液（用磷酸调节pH值至3.0）（46∶54）,测定波长为265nm,流速为1.0mL/min,柱温为30℃,进样体积20μL.托吡卡胺和盐酸去氧肾上腺素与有关物质能完全分离,总杂质含量限度小于0.5％.该方法准确、简便、快速、可靠,能有效控制复方托吡卡胺滴眼液中有关物质的含量.     

奥扎格雷对蘑菇酪氨酸酶的抑制动力学

抗血小板凝聚药奥扎格雷不仅抑制酪氨酸酶单酚酶活性,而且对二酚酶具有很强抑制。导致单酚酶活力和二酚酶活力下降50%的奥扎格雷浓度(IC50)分别为1.35mmol/L和3.45mmol/L。奥扎格雷对单酚酶的抑制效应主要表现于酶催化反应的延滞时间有明显的延长。奥扎格雷对二酚酶的抑制作用表现为可逆的竞争性和非竞争性混合型抑制。     

一种新颖的测定和分析羟自由基氧化损伤RNA及其分子机理的化学发光体系

近年来，羟自由基（^.OH)对DNA氧化损伤已受到广泛关注，但是很少研究^.OH对RNA的氧化损伤。其实，RNA与DNA一样，也是核酸的两大组分之一，也有许多重要功能。所以^.OH攻击RNA也会引起重后果，会造成细胞功能衰退甚至细胞死亡等。为此，我们建立了Vit.C-CuSO4-Phen-H2O2-PNA这一产生和测定^.OH氧化损伤RNA的化学发光体系，以便加强^.OH氧化损伤RNA的研究。通过对本体系测定条件的研究，得出了本体系最佳组方是：Vit.C,CuSO4,Phen,H2O2和RNA，浓度分别为350μmol/L,55μmol/L,350μmol/L,0.2mol/L和20μg/mL,体系pH为5．5，体系终体积为1mL。随后，利用本体系检测了槲皮素，咖啡酸，黄芩甙和芦丁抗^.OH氧化损伤RNA的作用，发现这四种抗氧化剂均能有效抑制^.OH氧化损伤RNA的分子机理，结果发现，^.OH清除剂硫脲几乎抑制全部发光，推测是因硫脲清除了引发剂^.OH所致；O^-.2清除剂SOD只能抑制小部分发光；^1O2清除剂叠氮化钠和苯甲酸都能抑制绝大部分发光。这些事实提示，^.OH是RNA氧化损伤的引发剂；O^-.2只是导致RNA氧化损伤的次要因素，^1O2才是导致RNA氧化损伤的最主要因素。     

超声提取-高效液相-原子荧光联用测定温州海产品中不同形态的汞

建立了超声酸提取-高效液相-原子荧光联用测定温州海产品中无机汞[Hg(Ⅱ)]、甲基汞(MeHg)和乙基汞(EtHg)含量的方法,并优化了实验条件.实验采用5mol/L盐酸溶液,超声3.0h提取汞化合物,硫代硫酸钠络合,最后经C18柱(4.6mm×150mm)分离,流动相为5％乙腈-0.06mol/L乙酸铵-0.12％ L-半胱氨酸.在最佳条件下,3种汞化合物在0-20μg/L范围内线性良好,相关系数(r)均优于0.9990,检出限分别为1.04、1.09和1.29μμg/L,相对标准偏差(RSDs)均小于5％(n=10),温州海产品的汞加标回收率达到90.1％-107.3％.该方法操作简便,精密度高,干扰少,适用于各地海产品中汞化合物的形态分析测定.     

在氢氧化铁修饰的硅油碳糊电极上微分脉冲伏安法直接测定污水中的痕量对苯二酚

将石墨粉掺有少量的氢氧化铁粉末作为催化剂,以硅油为黏结剂制成碳糊电极,微分脉冲伏安法直接测定污水中的对苯二酚, 在pH 1.0 HCl支持电解质中,对苯二酚在该碳糊电极上表现为催化行为,微分脉冲的阳极峰电流在0.625-500μmol/L浓度范围内呈较好的线性关系,ip(μA)=0.3402 0.09578C(μmol/L)(r=0.9997,SD=0.374), 检出限为0.3125μmol/L.方法简单快速,直接用于污水中对苯二酚的测定,结果令人满意.     

柑橘皮黄酮提取工艺及抑制亚硝化反应

研究柑橘皮中黄酮类化合物的提取工艺及黄酮类物质对亚硝化反应的抑制能力.通过单因素及L9（34）正交试验,探讨最佳提取工艺条件及相关工艺参数,并采用分光光度法测定黄酮提取液对亚硝胺抑制能力和对亚硝酸盐清除能力.结果表明,柑橘皮中黄酮类化合物的最佳提取工艺条件为乙醇体积分数60％、料液比1∶40（g/mL）、提取时间50min、提取温度70℃.柑橘皮中黄酮类化合物提取液对亚硝胺合成的最大阻断率为75.8％,对亚硝酸钠的最大清除率为85％.柑橘皮中黄酮类化合物提取液对亚硝化反应的抑制能力较强,且最佳工艺操作简单快捷,适用于工业化大批量提取柑橘皮中黄酮类化合物.     

酶荧光毛细分析法测定血清中微量丙酮酸

提出了一种用于血清微量丙酮酸（PA）测定的酶荧光毛细分析法（P-LE-FCA）。优选的测定条件为：乳酸脱氢酶和还原型辅酶Ⅰ的浓度分别为100U/L和60μmol/L,反应时间5min。测定PA的线性范围4—80μmol/L,检出限0.73μmol/L,RSD〈1.3%。血清共存物质对PA测定无明显干扰。使用该方法对血清PA进行测定,其回收率在93.0%—106.5%之间;结果与常规紫外分光光度法一致。本方法的样品预处理过程简单、省时,省试剂,灵敏度高,重现性好。