CTAB/TX-100微乳液凝胶固定化脂肪酶的催化水解活性

以α-单硬脂酸甘油酯的水解反应为指示反应,初步研究了CTAB/TX-100微乳液凝胶（MBG）固定化脂肪酶的催化水解活性及其主要影响因素。结果表明,在水溶液中,CTAB/TX-100 MBG固定化脂肪酶能顺利地催化α-单硬脂酸甘油酯的水解反应,且反应后凝胶块仍能保持较好的机械强度。其催化水解活性在反应初期增加明显,随反...     

微乳液中脂肪酶和含明胶的微乳液凝胶中固定化脂肪酶的催化特性

在双2-乙基己基琥珀酸酯磺酸钠(AOT)油包水微乳液中Calytical脂肪酶催化月桂酸和戊醇的酯化反应动力学研究表明,反应符合乒乓(BiBi)机制.表观速率常数k_m酸=0.13518mol/L,k_m醇=0.22423mol/L,最大反应速度v_max=1.3873×10^-5mol/(L·min·mg).将该脂肪酶固定于含明胶的微乳液凝胶(MBGs)中,制得固定化脂肪酶,含酶MBGs在非极性溶剂中可作为固相催化剂,并研究了其在辛烷中催化酯化的性能.所制得的含酶MBGs物理稳定性好,重复利用10次以上,其转化率仍达初始转化率的90%.     

脂肪酶催化水解反应纯化α-生育酚琥珀酸酯

α-生育酚琥珀酸酯（α-tocopherol succinate）是天然维生素E的衍生物，它是由琥珀酸与α-生育酚的β-色酮环的6位羟基成酯而形成的化合物（图1），由于丧失了自由的羟基而不具有维生素E的抗氧化活性，在空气中较为稳定，因其可保护α-生育酚的6位羟基，使α-生育酚在储存和运输中稳定性增加，而广泛用于α-生育酚的运输和储存。     

十六烷基三甲基溴化铵/聚乙二醇辛基苯基醚微乳液凝胶固定化脂肪酶催化水解消旋布洛芬辛酯

初步考察了水溶液中影响十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）/聚乙二醇辛基苯基醚（TX-100）微乳液凝胶（MBG）固定化脂肪酶催化水解消旋布洛芬辛酯的主要因素。 结果表明,CTAB/TX-100 MBG固定化脂肪酶在水溶液中能顺利催化水解S-构型布洛芬辛酯生成S-构型布洛芬。 随TX-100在EM（正丁醇与TX-100的混合物）中含量的增加,反应转化率（X）逐渐增大,而产物中S-构型布洛芬的对映体过量值（eei）有少许的降低;随凝胶含水量的增加,X及eei均呈钟罩形变化,二者最大值时对应的凝胶水含量为27.3%,且磷酸缓冲溶液对二者的影响要比溶解明胶的水大;X在反应初期（16 h内）增加明显,随反应时间的继续延长增加缓慢,24 h后趋于平衡,而eei随反应时间的延长呈逐渐降低的趋势;随固定化脂肪酶重复使用次数的增多,X在前3次中降幅不大,后几次中降幅逐渐增大,eei则呈逐渐稍微降低的趋势,重复使用10次后,二者分别降低了36.55%和0.52%。     

微乳液和微乳液凝胶中脂肪酶催化的酯合成反应

在ACT/异辛烷/水形成的油包水微乳液中,研究了Candidalipolytical(CL)脂肪酶催化庚酸和庚醇的酯化反应,动力学研究表明反应符合乒乓(Ping-Pong)BiBi机制,两底物酸和醇均有抑制效应,并测定了反应的表观动力学常数,将CL脂肪酶固定于含明胶的微乳液凝胶(MBGs)中,可制得固定化脂肪酶,含酶的MBGs在非极性有机溶剂中可作为一种新的固相催化剂,并研究了MBGs在异辛烷中催化合成酯反应的性能,所制得的MBGs重复利用性和贮存稳定性都非常好。     

十六烷基三甲基溴化铵/山梨醇酐硬脂酸酯微乳液凝胶固定化脂肪酶的催化活性及立体选择性

制备了能在水溶液中长时间稳定存在的十六烷基三甲基溴化铵/山梨醇酐硬脂酸酯（CTAB/Span-60）微乳液凝胶（MBG）,确定了Span-60在乳化剂EM（正丁醇与Span-60的混合物）中的质量分数范围;分别以正己酸与正己醇的酯化反应、α-单硬脂酸甘油酯的水解反应、消旋布洛芬与正辛醇的不对称酯化反应为指示反应,研究了CTAB/Span-60 MBG固定化脂肪酶的催化活性及立体选择性。 结果表明,Span-60在EM中的质量分数小于57%时可形成机械强度较好的CTAB/Span-60 MBG;其固定化脂肪酶在有机溶剂中的酯化活性随EM中Span-60含量的增加先是逐渐增大,35%时最大,后又逐渐小幅度降低,在所考察的Span-60含量范围内均比在CTAB MBG中高;在水溶液中固定化脂肪酶能顺利催化α-单硬脂酸甘油酯的水解反应,24 h后反应转化率不再随反应时间的延长而增加,其水解活性在重复使用9次后仅降低13.68%,表明CTAB/Span-60 MBG固定化脂肪酶能够顺利进行分离并重复使用;此体系的脂肪酶也选择性地催化生成S-构型布洛芬辛酯,产物对映体过量值（eee）随反应的进行缓缓下降,但降幅不大,即其立体选择性要比在CTAB MBG中高。 因此,CTAB/Span-60 MBG作为脂肪酶固定化载体既可用于有机溶剂中又可用于水溶液中的生物合成与生物转化反应,扩大了微乳液凝胶固定化脂肪酶的应用范围。     

无溶剂体系中脂肪酶催化红花油水解反应

无溶剂体系中脂肪酶催化红花油水解反应;水解;红花油;无溶剂体系;脂肪酶     

固定化脂肪酶催化合成生物柴油

固定化脂肪酶催化合成生物柴油;转酯反应;固定化脂肪酶;菜籽油;甲醇;生物柴油     

十二烷基苯磺酸/异辛烷微乳液中脂肪酶催化合成异丁酸异戊酯

在十二烷基苯磺酸(DBSA)/异辛烷微乳液中进行了脂肪酶催化合成异丁酸异戊酯的反应, 考察了微乳体系的含水量w₀、溶解酶缓冲溶液的pH值、反应温度等因素对酯合成反应转化率的影响; 与前期研究的CTAB微乳体系进行比较发现, DBSA微乳体系中的酯合成反应速率明显增加, 短时间内的转化率显著提高, 在温和条件下反应9 h后, 转化率达90%以上; 通过DBSA体系中有酶与无酶条件下反应进程的比较得知, DBSA作为一种质子酸对酯合成反应具有一定的催化能力; 提出了该体系中微乳催化、酶催化和质子酸催化的三重催化机理.     

固定化脂肪酶活性的X射线微区分析

利用X射线微区分析的方法，对吸附交联法得到的固定化脂肪酶的微观活性进行了分析。结果表明：以合成出的大孔吸附树脂为固定化酶栽体，酶活较高，活性脂肪酶分布较均匀。并得到了固定化脂肪酶的活性定位的最佳条件。     

非水相中固定化脂肪酶催化性能的研究

以离子交换树脂为载体,用离子交换吸附法固定化脂肪酶,对影响固定化过程的各种因素进行了考察,确定了最优条件。得到的固定化酶催化合成月桂酸月桂醇酯,考查了在不同lgP值有机溶剂中的催化反应,异辛烷为最佳反应介质,最佳水含量为8％,最佳酸醇摩尔比为1：2,最适催化温度为55℃,得到的活化能Eα为19．00kJ／mol。     

无溶剂及微乳液体系中脂肪酶催化红花油水解的动力学

 在无溶剂及二(2-乙基己基)丁二酸酯磺酸钠(AOT)/异辛烷/磷酸盐缓冲液微乳液体系中,研究了黑曲霉脂肪酶催化红花油水解反应的动力学. 结果表明,无溶剂及微乳液体系中反应的活化能分别为32.205和7.391 kJ/mol. 酶在无溶剂体系中的热稳定性高于微乳液中. 无溶剂及微乳液体系中的表观米氏常数分别为0.135和0.101 mol/L. 在两种体系中,乙醇对水解反应的抑制作用均为竞争性可逆抑制,且均在底物浓度大于0.819 mol/L时出现底物抑制现象. 结合胶团催化理论和酯键水解机理对两种体系中酶水解性能的差异进行了解释.     

烷基聚葡糖苷微乳液中脂肪酶催化的酯合成反应动力学

在烷基聚葡糖苷C10G1．54／正丁醇／环己烷／磷酸盐缓冲液体系形成的油包水微乳液中,研究了在较高底物浓度下,脂肪酶催化正己酸和正丁醇的酯合成反应动力学及其影响因素。结果表明,在正己酸的初始浓度CHA^0较小时,反应初速率V0随正己酸浓度增大而增大,但随正丁醇表观浓度增大而减小;在CHA^0较大时,反应初速率V0随正丁醇表观浓度增大而增大,但随正己酸浓度增大而减小．在正己酸和正丁醇摩尔浓度之比为3．0左右反应速率最大．这些实验结果与传统的米氏反应不符,为此,从界面膜的构成,尤其是两种底物在界面膜上的分布情况人手进行了探讨．考察了C10G1.54浓度、正丁醇浓度和两者总浓度等对反应初速率V0的影响．     

固定化脂肪酶催化合成6,6'-海藻糖月桂酸酯

 以吸附在硅藻土上的假丝酵母（Candidasp．1619）脂肪酶为催\r\n化剂，在无溶剂体系中，研究了月桂酸与海藻糖的酯化反应．结果表明\r\n，反应温度为47℃，pH为7．0，月桂酸与海藻糖的摩尔比大于6时酯化\r\n反应的转化率较高．在3．2mmol（0．64g）月桂酸、0．2mmol（0．07\r\n6g，即53μl浓度为1．43g／ml的糖溶液）海藻糖和200mg固定化脂肪酶\r\n（1000U）组成的反应体系中，于47℃振荡反应36h，以海藻糖月桂酸双\r\n酯计算，酯化程度达95％以上．用有机溶剂提取的反应产物经薄层色谱\r\n提纯后进行13CNMR分析，结果表明，产物主要是6，6’－海藻糖月桂酸\r\n酯，其纯度为90％～95％．     

烷基咪唑离子液体对脂肪酶催化酯水解反应活性的影响

考察了1-烷基-3-甲基咪唑类离子液体对柱状假丝酵母脂肪酶(CRL)催化橄榄油水解反应活性的影响,利用电导法确定了磷酸盐缓冲液中Br^-,Cl^-,[BF₄]^-系列咪唑离子液体的临界胶束浓度(CMC)和[PF₆]^-系列咪唑离子液体的溶解度.结果显示,离子液体的阴、阳离子对酶活性的影响规律与离子液体的Kosmotropicity性质无明显关联,但与离子液体在体系中的含量密切相关,在最适离子液体含量时,酶活性达到最高;阳离子[C_nMIM]⁺中的n越大,可促进酶活性的离子液体适宜含量越低;Br^-,[BF₄]^-系列离子液体的浓度超过CMC时则抑制酶活;阴离子对酶活性的最大促进作用顺序为Br^->Cl^->[BF₄]^->[PF₆]^-.离子液体对酶活性的影响随体系pH和温度的不同而改变,在最适离子液体浓度时的最适pH均为7.000.在pH 7.000,30 ^oC以及[C₈MIM]Br离子液体浓度为47.6 mmol/L的最佳条件下,最高相对酶活力和比活力分别达到1734%和54.4 U/mg protein.     

吐温-80对固定化脂肪酶催化酮基布洛芬氯乙酯对映体选择性水解反应的影响

酮基布洛芬为2-芳基丙酸类非甾体抗炎药的一种,其药效与立体构型有很大关系[1].生物法催化的动力学拆分是获得单一对映体酮基布洛芬的有效方法之一[2,3].最近,我们发现在利用皱褶假丝酵母(Candida rugosa)脂肪酶Lipase OF催化拆分酮基布洛芬氯乙酯时,向反应体系中加入非离子表面活性剂吐温-80,不仅可大幅度提高反应速度,而且更重要的是解决了原来Lipase OF选择性较差的问题,从而为酮基布洛芬的对映体拆分提供了一种新方法.     

AOT-水-正庚烷微乳液中脂肪酶催化拆分消旋布洛芬的研究

以手性高效液相色谱分析法为检测手段,研究了AOT-水-正庚烷微乳液反应介质中,脂肪酶催化消旋布洛芬的不对称酯合成反应。结果表明,在此反应介质中,消旋布洛芬与正辛醇能顺利地进行酯合成反应,转化率达0．3613,产物为光学纯度很高的S-构型布洛芬辛酯,其对映体过量值为0．9732。微乳液中的含水量叫。值（水与表面活性剂的摩尔数比）及AOT浓度主要影响酯合成反应转化率,对产物对映体过量值没有太大的影响;不同链长的脂肪醇不仅影响酯合成反应速率及其对应的最佳ω0值,还影响产物的对映体过量值。     

甲壳胺-硅胶复合载体的制备及其在脂肪酶固定化中的应用

固定化脂肪酶;甲壳胺-硅胶复合载体的制备及其在脂肪酶固定化中的应用     

共聚微球稳定皮克林乳液的研究及酶固定化应用

以苯乙烯（St）、马来酸酐（MA）、甲基丙烯酸缩水甘油酯（GMA）为单体，通过自稳定沉淀聚合反应制备了带有环氧基团的形貌规整、粒径均一的纳米粒子（PMG），该纳米粒子可作为乳化剂稳定皮克林乳液，并利用环氧基团来固定化脂肪酶。系统研究了单体投料比、溶剂对纳米粒子形貌和化学组成的影响，以及纳米粒子添加量、脂肪酶质量浓度、溶剂对皮克林乳液粒径和酶催化反应的影响。结果表明，当n(GMA)∶n(St)∶n(MA)为2∶1∶1、纳米粒子质量分数为0.5%、脂肪酶初始质量浓度为3 mg/mL、正庚烷与去离子水体积比为5∶5时，固定化脂肪酶的催化比活性最高，是游离酶催化比活性的7.5倍，且具有优良的重复使用性能。     

微水相中改性Ultrastable-Y分子筛固定化脂肪酶拆分(R,S)-2-辛醇

采用改性Ultrastable-Y分子筛固定化P. expansum PED-03脂肪酶(PEL), 利用固定化PEL在微水相中对(R,S)-2-辛醇进行拆分. 结果表明, 改性Ultrastable-Y分子筛固定化PEL所催化的拆分反应的转化率(c)和对映体过量值(e.e.)以及对映体选择性(E)均得到大幅度提高. 介质类型和体系含水量对酶促拆分反应有较大的影响. 在以正己烷为溶剂, 含水量为0.8%的体系中, 于50 ℃反应24 h的转化率(c)可达到理论值的97.68%, 对映体过量值(e.e.)可达到98.75%. 改性Ultrastable-Y分子筛固定化PEL催化效率高、立体选择性强, 且催化性能稳定, 在(R,S)-2-辛醇的酶法拆分方面具有良好的应用前景.