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用磷酸三酯法在溶液中合成了两个带有3′-(S)-胸腺嘧啶基-4′-(R)-羟基-5′-(S)-羟甲基四氢呋喃的三脱氧核苷酸3和4。与三脱氧核苷酸(2)相比,化合物3和4对核酸酶S1具有更大的稳定性。 相似文献
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高效毛细管电泳-安培检测研究核苷酸水解反应 总被引:3,自引:0,他引:3
核酸是重要的生命物质,近些年来,对核酸水解作用的研究已成为人们关注的焦点,寻找一种在温和的生理条件下能够迅速催化水解核酸的人工酶,对于进一步探索核酸的结构及其在生命活动中的作用,阐明细胞间信息传递的机理,以及对于抗癌药物的研制等具有重要意义.有关稀土金属离子及其配合物对核酸的催化作用已有报道[1~3],这种选择性的水解作用断裂点单一,无碎片产生,克服了以往通过氧化作用断裂核酸带来的弊端[4~5],但其作用的机理、水解体系的优化尚需进一步的探讨.以往对核酸水解作用的研究,主要是通过高效液相色谱(HPLC)[1,6]、化学滴定和… 相似文献
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近年来,毛细管电泳已成为一种高效快速的微化学分离分析新技术,在无机、有机及生物化学分析中得到了广泛的应用.但毛细管的内径小,进样量在pg~ng级,给样品的检测带来新的困难.因此,发展高灵敏度的显微在线检测器,已成为毛细管电泳技术发展中的重要环节.基于各种原理的检测器研究已有报道~[1].Dovichi等曾用热透镜技术在线检测了乙腈/ 相似文献
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任意多阶梯度场强毛细管凝胶电泳中谱带的迁移和展宽 总被引:2,自引:0,他引:2
在自行制备的毛细管凝胶电泳柱上,通过实验考察毛细管凝胶电泳(CGE)中场强(E)和组分迁移率(μ)的关系,发现在一般CGE使用的场强范围内,μ随E增大而成近似线性的增加。并讨论了产生这种现象的原因。以此为基础提供了任意多阶梯度场强毛细管凝胶电泳中组分的迁移时间和距离的计算公式,用于编制计算机程序。 相似文献
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毛细管电泳中聚合物溶液筛分脱氧核糖核酸 总被引:8,自引:0,他引:8
围绕着毛细管电泳中聚合物溶液筛分脱氧核糖核酸(DNA)的机理和分离介质、条件,综述了近年来该技术的发展,及其在DNA测序、聚合酶链反应(PCR)产物分析方面的应用及其发展前景。 相似文献
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动力学涂层毛细管电泳分离双链脱氧核糖核酸片段 总被引:2,自引:0,他引:2
以异丙醇为聚合反应链转移试剂,水相法合成了短链聚N,N-二甲基丙烯酰胺(PDMA),研究表明,该聚合物能在毛细管内壁形成稳定的动力学涂层,从而有效地抑制电渗流和毛细管内壁与DNA的作用。这种介质被成功地应用于DNA片段的高效分离。 相似文献
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毛细管电泳与MFOLD软件研究单链脱氧核糖核酸分离二级结构 总被引:3,自引:0,他引:3
从Gene Bank数据库中下载质粒基因序列,用DNAssist软件分析并最终建立了单点碱基突变模型,并以此为研究对象对单链DNA分离机理进行研究探讨。采用高效毛细管电泳-激光诱导荧光检测(CE-LIF)方法,以线性聚丙烯酸胺为筛分介质对模型进行分离分析,并与MFOLD软件所预测的单链二级结构进行对照分析。分离条件为:线性聚丙烯酸胺浓度为6%,负极进样,13kV分离,温度为19℃,λem=488nm、λex=520nm。结果发现毛细管电泳实际分析结果有4个单链峰,而MFOLD软件预测的只有3种二级结构,预测的准确度为75%,MFOLD软件虽然有局限性,但预测DNA二级结构仍有一定的参考价值。 相似文献
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《Analytical letters》2012,45(14):2573-2586
Abstract Capillary zone electrophoresis is a highly efficient analytical technique that has been shown to be particularly useful for the analysis of isomers. Using a cathodic injection and anodic detection scheme, ortho-, meta- and para-hydroxybenzoic acids were separated in a fused-silica capillary column with a phosphate buffer at pH 10.3 (25.0 mmol/1 phosphate + 0.20 mmol/1 cetyltrimethylammonium bromide (CTAB) + 10% (v/v) 1-propanol with an applied voltage of 10 KV followed by direct UV detection. The use of CTAB as electroosmotic flow modifier allows the rapid separation of the three isomers by reversing the direction of electro-osmotic flow. The influence of pH, CTAB concentration and organic solvents on the migration behaviour of the solutes were also studied. 相似文献
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毛细管凝胶电泳紫外检测核酸灵敏度 总被引:1,自引:0,他引:1
以已知浓度的DNA Marker为标准样品,常规压力进样,电动进样,柱头场放大及联合使用基质场放大和柱头场放大等方法进行CGE-UV分析,对比不同进样方法的检测灵敏度.以聚合酶链式反应(PCR)后的高盐DNA样品验证方法的可靠性.当DNA样品稀释达40万倍,与电动进样和压力进样相比,在对峰形和峰宽无明显影响下,将电动进样的时间延至420 s,三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液(TE)浓度降低至1.5%,柱头场放大灵敏度分别提高了约28和90倍;联合使用基质场放大和柱头场放大后,灵敏度分别提高3760和12000倍.DNA的检出限达0.1 μg/L(S/N=3,CGE-FASI-UV).同时以本法分析PCR后的DNA产物获得了极高的灵敏度(分别比普通的压力进样和电动进样提高50477倍和33354倍).本实验采用基质场放大和柱头场放大联用,方法操作简单,灵敏度高,适用于高盐微量的DNA样品分析. 相似文献