MAP-H~2O~2-HPR伏安酶联免疫分析新体系和光谱及电化学研究

提出了间氨基酸(MAP)-H~2O~2-辣根过氧化物酶(HRP)伏安酶联免疫分析新体系.本方法以线性扫描二阶导数伏安法检测HRP催化H~2O~2氧化MAP的产物,用于游离HRP和各种HRP标记物的测定,灵敏度均高于经典的ELISA显色光度法.测定游离HRP的线性范围为1.0x10^-^8-1.0x10-6/L,检测限达3.8x10^-^9g/L.制备出了HRP催化H~2O~2氧化MAP的产物纯品并应用电化学分析,高效液相色谱,元素分析,紫外-可见光谱,红外光谱,^1H核磁共振谱,^1^3C核磁共振谱及质谱等技术对体系酶促反应进行了深入的研究.在选择的酶促反应条件下,生成的产物为2-氨基-5-[(3-差苯基)]-2,5-环己烯基-1,4-二酮.提出了酶催化反应机理及其产物的电极还原过程。     

OAP-H~2O~2-HRP伏安酶联免疫分析新体系测定人血清铁蛋白

首次提出邻氨基酚(OAP)-H~2O~2-辣根过氧化物酶(HRP)伏安酶联免疫分析新体系并用于人血清中铁蛋白的测定.本方法以线性扫描二阶导数伏安法栓测HRP催化H~2O~2氧化OAP的产物,用于游离HRP和各种HRP标记物的测定,灵敏度均高于经典的ELISA显色光度法.测定游HPR的线性范围为1.0x10^-^1^2-4.0x10^-^9g/mL,检测限达6.0x10^-^1^3g/mL.本法对铁蛋白测定的线性范围为0.2-320ng/mL,用所建立的方法对人血清样品进行了测定,并与现行的ELISA显色光度法进行对照,二者相关性很好.对此伏安酶联免疫分析新体系的电极还原过程也进行了详细的研究.     

MAP-H2O2-HRP伏安酶联免疫分析新体系的光谱及电化学研究

提出了间氨基酚(MAP)-H2O2-辣根过氧化物酶(HRP)伏安酶联免疫分析新体系.本方法以线性扫描二阶导数伏安法检测HRP催化H2O2氧化MAP的产物,用于游离HRP和各种HRP标记物的测定,灵敏度均高于经典的ELISA显色光度法.测定游离HRP的线性范围为1.0×10-8～1.0×10-6g/L,检测限达3.8×10-9g/L.制备出了HRP催化H2O2氧化MAP的产物纯品,并应用电化学分析,高效液相色谱,元素分析,紫外-可见光谱,红外光谱,1H核磁共振谱,13C核磁共振谱及质谱等技术对体系酶促反应进行了深入的研究.在选择的酶促反应条件下,生成的产物为2-氨基-5-[(3-羟苯基)氨基]-2,5-环己二烯基-1,4-二酮.提出了酶催化反应机理及其产物的电极还原过程.     

以邻氨基酚为底物的伏安酶联免疫分析体系酶促反应的研究

辣根过氧化物酶 (HRP)催化H2 O2 氧化邻氨基酚的酶促反应与邻氨基酚的氧化产物的电极还原反应相偶合的伏安酶联免疫分析新体系具有很高的灵敏度 ,测定HRP的检出限为 6 .0× 1 0 -10 g/L ,线性范围为 1 .0× 1 0 -9～ 4.0× 1 0 -6g/L .制备出了HRP催化H2 O2 氧化邻氨基酚的产物纯品 ,并应用电化学分析、高效液相色谱、紫外 可见光谱、红外光谱、13 C核磁共振谱、1H核磁共振谱、质谱、元素分析等技术对体系酶促反应进行了深入的研究 .在所选择的酶促反应条件下 ,生成的产物为 3 氨基吩嗪 .提出了酶促反应及其产物的电极还原过程 .     

OPD-H2O2-HRP伏安酶联免疫分析体系酶催化反应的研究

应用电化学分析、高效液相色谱、紫外-可见光谱、红外光谱和核磁共振等技术对邻苯二胺(OPD)-H2O2-辣根过氧化物酶(HRP)伏安酶联免疫分析体系的酶催化反应进行了详细深入的研究.用化学方法制得了HRP酶催化H2O2氧化OPD的产物纯品.伏安法和高效液相色谱实验说明,在所选择的酶催化反应条件下,酶催化反应只生成一种产物;经紫外-可见光谱,红外光谱和13C核磁共振谱鉴定,产物为2,3-二氨基吩嗪.写出了酶催化反应过程,同时对酶催化反应产物的电极还原过程也进行了研究.     

PAP-H2O2-HRP酶促反应产物光谱及电化学研究

前文［１］首次提出了以对氨基酚（ＰＡＰ）为底物的ＰＡＰ－Ｈ２Ｏ２－辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）伏安酶联免疫分析新体系,并成功地应用于烟草花叶等植物病毒的血清学检测．在此之前,我们也曾报道过一些伏安酶联免疫分析新体系［２,３］．迄今,还没有人对 ＨＲＰ催化 Ｈ２Ｏ２氧化 ＰＡＰ的酶促反应进行过探讨．Ｐｒａｔｉ等［４］报道了在铜催化作用下,Ｏ２氧化对氨基酚生成３－［（４－个羟苯基）氨基」－４－（２－氨基－５－羟苯基）－６－［（４－羟苯基）亚胺基］－２,４－环己二烯基－１－酮．本文的实验结果与此文献不符． 为…     

伏安酶联免疫分析体系测定南方菜豆花叶病毒

本文提出用邻氨基酚 ( OAP) - H2 O2 -辣根过氧化物酶 ( HRP)伏安酶联免疫分析体系测定 HRP和南方菜豆花叶病毒 ( SBMV)。该方法是将 HRP催化 H2 O2 与 OAP的酶催化反应与邻氨基酚的氧化中间产物在滴汞电极上的还原反应相偶合 ,在 BR缓冲溶液中 ,在 - 0 .87V( vs.SCE)左右产生灵敏的伏安峰。利用该极谱波对 HRP的检测限为 5× 10 -12 g/m L,线性范围为 6.0× 10 -12～ 4 .0× 10 -9g/m L。用该方法测定南方菜豆花叶病毒取得了令人满意的结果。     

生物酶HRP催化H~2O~2氧化间苯二胺反应的研究

应用电化学分析,高效液相色谱(HPLC),紫外-可见光谱(UV-vis),红外光谱(IR)和核磁共振(NMR)等技术对辣根过氧化物酶(HRP)催化H~2O~2氧化间苯二胺(MPD)的反应进行了研究。伏安法和高效液相色谱实验说明,在所选择的酶催化反应条件下,酶催化反应生成一种产物。用化学方法制得了HRP酶催化H~2O~2氧化MPD的产物纯品。经UV-vis,IR和^1HNMR谱鉴定,产物为2,7-二氨基吩嗪。写出了酶催化反应过程,同时对酶催化反应产物的电极还原过程也进行了研究。     

OAP-H2O2-HRP伏安酶联免疫分析新体系测定人血清甲胎蛋白

本文提出邻氨基酚 (OAP)-H2O2-辣根过氧化物酶（HRP）伏安酶联免疫分析体系并用于人血清中甲胎蛋白(αFP)的测定。该方法是将HRP催化H2O 2 氧化 OAP 的酶催化反应与邻氨基酚的氧化中间产物(邻苯醌亚胺)在滴汞电极上的还原反应相偶合, 在BR缓冲溶液中, 在-0.87 V (vs.SCE) 左右产生灵敏的极谱波。根据测定标记在甲胎蛋白抗体上的HRP的量, 求得发生免疫反应的αFP的含量。该方法对甲胎蛋白测定的线性范围为1.25～400 mg/L。用所建立的方法对病人血清样品进行了测定, 并与酶联免疫吸附测定光度法(ELISA)进行对照,二者相关性很好。     

OT-H2O2-HRP伏安酶联免疫分析新体系

本文首次提出了邻联甲苯胺(OT)-H2O2-辣根过氧化物酶(HRP)伏安酶联免疫分析新体系。本方法以线性扫描二阶导数伏安法检测HRP催化H2O2氧化OT的产物, 用于游离HRP和各种HRP标记物测定, 灵敏度比经典的ELISA光度法分别高两个至四个数量级。测定游离HRP的检测限达到1.8×10^-^1^2 g/mL, 线性范围为5.0×10^-^1^2-1.0×10^-^8 g/mL。对此伏安酶联免疫分析新体系的偶合反应机理及电极还原过程也进行了详细的研究。     

ODA-H_2O_2-HRP伏安酶联免疫分析新体系的研究

提出邻联茴香胺-H_2O_2-HRP伏安酶联免疫分析新体系,并用于测定HRP和HRP标记物.该方法是将HRP催化H_2O_2氧化邻联茴香胺的酶催化反应与邻联茴香胺的氧化产物的电极还原反应相偶合,在BR缓冲溶液中,在-0.56V(SCE)左右产生灵敏的极谱波.应用此极谱波测定HRP的检测限为3.7×10~(-12)g/mL,线性范围为1.O×1O~(-11)～2.0×10~(-9)g/mL.对邻联茴香胺-H_2O_2-HRP伏安酶联免疫分析新体系的偶合反应机理及电极还原过程进行了较详细的探讨.     

PAP-H2O2-HRP伏安酶联免疫分析新体系测定人血清总甲状腺素

目前临床检测中测定总甲状腺素(T₄)的常用方法有间接血凝试验、琼脂双扩散及ELISA等方法^[1].其中ELISA法是目前较为流行的检测方法,但灵敏度不高.伏安酶联免疫分析法具有广阔的应用前景^[2,3].     

OAP-H2O2-HRP伏安酶联免疫分析新体系测定人血清总甲状腺素

提出邻氨基酚（ＯＡＰ）－Ｈ２Ｏ２－辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）发酶联免疫分析新体系并用于人血清中总甲状腺素的测定。本方法以线性扫描二阶导数伏安法检测ＨＲＰ催化Ｈ２Ｏ２氧化ＯＡＰ的产物,用于游离ＨＲＰ和ＨＲＰ标记物的测定,灵敏度的高于经典的ＥＬＩＳＡ显色光度法。测定游离ＨＲＰ的线性范围为１．０×１０＾１２￣４．０×１０＾－９ｇ／ｍＬ,检测限达６．０×１０＾１３ｇ／ｍＬ。本法对总甲状腺素测定的线性范围为１     

MAP-H2O2-HRP伏安酶联免疫分析测定南方菜豆花叶病毒

提出间氨基酚(MAP)-H₂O₂-辣根过氧化物酶(HRP)伏安酶联免疫分析新体系,并用于南方菜豆花叶病毒(SBMV)的测定.以线性扫描二阶导数伏安法检测HRP催化H₂O₂氧化MAP的产物,用于游离HRP及SBMV的测定,灵敏度均高于经典的ELISA显色光度法.本法对HRP测定的线性范围为1.0×10^-8～1.0×10^-6g/L,检测限为3.8×10^-9g/L;对SBMV测定的线性范围为4.0～5000ng/mL,检测限为4.0ng/mL.用所建立的方法测定病毒感染病叶澄清液的最高稀释比为1∶1.5×10⁵,并与现行的ELISA显色光度法进行对照,二者相关性很好.     

OAP-H2O2-HRP伏安酶联免疫分析新体系 测定人血清总甲状腺素

提出邻氨基酚 (OAP)-H     

间氨基酚-过氧化氢-辣根过氧化物酶伏安酶联免疫分析新体系测定人血清总甲状腺素

提出间氨基酚(MAP)-H_2O_2-辣根过氧化物酶(HRP)伏安酶联免疫分析新体系并用于人血清中总甲状腺素(T_4)的测定.本方法以线性扫描二阶导数伏安法检测HRP催化H_2O_2氧化MAP的产物,用于游离HRP和HRP标记物的测定,灵敏度均高于经典的ELISA显色光度法.本法对总甲状腺素测定的线性范围为0.5～320mg/L.用所建立的方法对人血清样品进行了测定,并与现行的ELISA显色光度法对照,二者相关性很好.     

硝基磺酚S作为酶联免疫分析中辣根过氧化物酶测定底物的研究

提出一种新的ＨＲＰ底物－硝基磺酚Ｓ,初步探讨了在ＨＲＰ催化下被过氧化氢氧化的机制,以硝基磺酚Ｓ为底物测定了酶促反应动力学常数Ｋｍ和Ｋｓ分别为４．５１×１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ和２８．１ｍｏｌ／Ｌ·ｓ＾－１。分别用于酶联免疫显色光度法和伏安酶联免疫分析法测定了ＩｇＧ－ＨＲＰ,其所能测定的最高稀释比分别为１：１．６×１０＾５和１：４．８×１０＾５。     

1,5-二羟基萘作为伏安酶联免疫分析体系底物的研究

提出了1,5-二羟基萘(1,5-DHN)-H₂O₂-辣根过氧化物酶(HRP)伏安酶联免疫分析新体系. 1,5-DHN为非电活性物质, 但其在碱性B-R缓冲溶液中可被空气氧化生成5-羟基-1,4-萘醌, 此物质为电化学可还原物质, 产生良好的伏安还原峰. 加入H₂O₂和HRP后, HRP催化H2O2氧化5-羟基-1,4-萘醌生成3-羟基邻苯二甲酸, 从而使伏安还原峰降低. 利用伏安峰的降低可以测定HRP和HRP标记物的活性, 进而可用于测定各种抗原和抗体. 此伏安酶联免疫分析体系与以前所报道的伏安酶联免疫分析体系具有不同的反应机理. 以前报道的伏安酶联免疫分析体系在无HRP和H₂O₂时无伏安峰, 加入HRP和H₂O₂后, HRP催化H₂O₂氧化体系底物所得产物产生伏安还原峰, HRP浓度与还原峰高成正比, 而此体系为HRP浓度与伏安峰高的降低成正比. 将文中建立的伏安酶联免疫分析体系与酶联免疫吸附间接法相结合, 用于测定烟草花叶病毒(TMV)提纯液, 线性范围是25.0 ~ 340.0 ng/mL, 检测限是25.0 ng/mL.     

联苯胺—H2O2—HRP偶合反应伏安酶联免疫分析新体系测定HRP的研究

提出了联苯胺－Ｈ２Ｏ３－ＨＲＰ偶合反应伏安酶联免疫分析新体系测定ＨＲＰ的方法。通过测定ＨＲＰ催化Ｈ２Ｏ２氧化联苯胺的产物间接测定ＨＲＰ的浓度。     

番红花化学成分研究 III. 番红花花粉中的番红花新苷甲和乙的结构

从番红花(crocus sativus L.)花粉中分到两个新苷, 命名为番红花新苷甲(1)和乙(2)。经理化性质和对它们的IR、UV、^1HNMR和MS数据的分析, 鉴定1为异鼠李素-4'-O-α-L-鼠李吡喃(1→2)β-D-葡萄吡喃糖苷, 2为β-对羟基苯基-乙醇-α-O-α-L-鼠李吡喃糖(1→2)-β-D-葡萄吡喃糖苷。