一株疏水性石油烃降解菌的鉴定

从石油污染的土壤中分离纯化得到1株能以石油为唯一碳源和能源生长的石油烃降解菌,命名为HDB-1,通过形态特征、培养特征、生理生化特征及16SrRNA基因序列分析,初步鉴定该菌为假单胞菌属细菌(Pseudomonas)。     

一株鸭源恶臭假单胞菌16S rDNA的序列测定与分析

从病鸭翅静脉无菌采集抗凝血,直接镜检和姬姆萨染色镜检,微生物感染呈阳性．从血液中分离出该微生物,用细菌16SrDNA通用引物扩增出约1500bp的条带,经DNA测序得到一条长1499bp的16SrDNA序列,与GeneBank已提交的序列进行BLAST相似性搜索表明该微生物应归属于假单胞菌属（Pseudomonas）,并用DNAStar进行同源性分析并构建系统进化树,显示与恶臭假单胞菌（Pseudomonas putida）同源性最近,首次发现恶臭假单胞菌可能感染家鸭．     

一株产CoQ10的红假单胞菌的研究

从滇池分离到一株革兰氏阴性杆菌，于光照厌氧及黑暗好氧条件下生长良好，活细胞在870、803nm处有吸收峰，具平行片层状的光合内膜系统，可归属于红假单胞菌属（Rhodopseudomonas)；该菌体中提取分主了得到的黄色结晶品，经Craven试验、高效薄层层析、高效液相色谱、紫外光谱、红外光谱、核磁共振及质谱证实，为CoQ10。     

烟碱降解菌CW6菌株的分离鉴定及其降解特性

以烟碱为唯一碳源,从湖北省襄阳市烟叶种植土壤中分离得到1株烟碱降解菌,命名为CW6,经常规的形态观察、生理生化分析以及16SrDNA序列同源性分析,初步鉴定该菌株为假单胞菌属(Pseudomonas).CW6菌株降解烟碱最适温度为30℃.当烟碱质量浓度为2.0g/L时,烟碱降解率达到88.18%.当烟碱质量浓度达到5.5g/L时,烟碱降解率达到45.83%.当烟碱质量浓度高于6.5g/L时,菌株生长和烟碱降解率均呈下降趋势,烟碱降解率低于8.53%.CW6菌株在烟碱质量浓度为2.0g/L的烟碱培养基中培养,不同时间样品紫外扫描显示:0h在259nm处有吸收波峰,A259值为0.9946,当培养时间达到48h时,259nm处烟碱特征吸收峰降低至0.1370.     

一株嗜盐古菌DSFD111的分类学鉴定

采用形态学和系统发育分析对一株嗜盐古菌DSFD111进行了分类学鉴定.分离到的DSFD111菌株为革兰氏阴性球菌,不产芽胞,细胞内含类脂粒.最适生长温度为37℃,最适pH为7,最适生长NaCl浓度为4.3mol/L,表明该菌株属于极端嗜盐菌.根据16S rRNA基因序列的系统发育分析,DSFD111菌株归于盐盒菌属(Haloarcula),与最近缘的Haloarcula argentinensis的相似度为99%.     

一株原油降黏细菌的筛选

自环境中分离出一株假单胞菌，在厌氧条件下能显著降低高黏度原油黏度，降黏率最高可达68％，气相色谱显示，降解前后原油中各组份含量发生显著变化。     

黏细菌分离纯化的研究进展

黏细菌属于原核生物,作为一种可产生丰富而有用的次级代谢物的微生物类群而受到研究者青睐,由于分离纯化黏细菌相当困难和耗时,并且难于培养,同时方法特殊,极大地限制了对这类微生物物种资源的开发,其应用研究较其他的微生物类群更为落后.所以,探索更好的分离纯化黏细菌的方法非常重要.对黏细菌的分离、纯化、纯度检验和菌种保藏等方面已有研究做了较为全面的综述,希望能对研究黏细菌者有一些帮助.     

一株拮抗姜瘟青枯劳尔氏菌的泛菌的分离及鉴定

从生姜田土中分离到一株对姜瘟青枯劳尔氏菌(Ralstonia solanacarum)有强拮抗作用的泛菌菌株Q6,对该菌株进行了形态特征、培养特征、生理生化特征的鉴定及16S rDNA 序列的分析.以16S rDNA序列为基础构建了包括12 株相关种属细菌在内的系统发育树,其中与11个泛菌属的菌株的16S rDNA序列的同源性为95.54%～99%.     

一株产辅酶Q10的光合细菌菌株的分离及鉴定

从水塘污泥中富集分离到一株产CoQ10含量较高的光合细菌菌株,并对其进行系统鉴定.采用了丙酮作为CoQ10的提取溶剂,样品经超声波破碎后,用紫外分光光度法(UV)作为CoQ10的定性定量方法,成本低且快速,可以作为筛选CoQ10含量较高菌株的方法.以此方法筛选得到菌株LZC,其CoQ10产量为9.49μg/mL菌液.16S rDNA序列系统发育分析表明,菌株LZC在系统进化树上与GenBank中序列号为AB251407.1、AB251408.1、AB017799.1、DQ342322.1的红假单胞菌(红细菌)聚为一族,初步确定菌株LZC为生芽红假单胞菌(Rhodobacter blasticus).菌株LZC至少能稳定传代15次.     

铜绿假单胞菌的LexA蛋白在大肠杆菌中的高效表达与纯化

目的:对铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)的阻遏蛋白LexA进行基因克隆、重组表达及蛋白纯化.方法:采用PCR法从PAO1株基因组中扩增出1 086 bp的LexA基因,将此基因片段插入到表达载体pET32a( )上,并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达.包涵体洗涤后用8 mol/L尿素溶解,以镍离子亲合柱层析作为第1步纯化,Superdex75凝胶过滤层析作为第2步精细纯化,反相高相液相色谱法(HPLC)测定蛋白的浓度.结果:LexA以包涵体形式表达,表达量为45%,经镍离子亲合柱层析纯化后LexA蛋白纯度达到85%以上,回收率大于80%,镍离子亲合柱层析和凝胶过滤层析两步纯化目的蛋白,经HPLC测定,最终目的蛋白的纯度为98.97%.结论:在pET32a( )表达系统中实现了PA的LexA蛋白的高效表达,两步纯化法获得高纯度的目的蛋白,为进一步鉴定LexA靶位点奠定了基础.     

红酵母苯丙氨酸解氨酶的分离纯化及性质研究

采用玻珠破壁 ,硫酸铵分级沉淀 ,凝胶过滤和离子交换等方法 ,从L 苯丙氨酸工业生产菌株红酵母中分离纯化苯丙氨酸解氨酶 (PAL) ,纯化倍数为 1 39,收率为 1 2 6%,纯化到的酶经聚丙烯酰胺凝胶电泳和SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳均为单一蛋白带 ,其亚基分子量约为79.4kD该酶最适反应温度为 40℃ ,最适反应pH为 8.5 ,以L Phe为底物 ,40℃ ,pH 8.5的Km值为 3 87× 1 0 - 4 mol/L 除了Mg2 +和Na+,其它金属离子如Fe3+,Cu2 +,Co2 +,Hg2 +等对其都有明显的抑制作用 .     

芽孢杆菌WF63脂肪酶分离纯化及酶学性质

芽孢杆菌WF63脂肪酶发酵上清液经硫酸铵沉淀、Sephaery1 S200柱层析、CMSephrose FF柱层析,得到纯化的脂肪酶,纯化倍数为9.45倍,活性回收率为4.27%.对该酶性质研究表明:该酶水解橄榄油的最适温度为50℃,最适pH为8.0,在60℃以下和pH4~10之间有很好的稳定性.K+,Mg2+对该脂肪酶的水解活性有促进作用,而Na+,Mn2+,Ca2+对脂肪酶则没有显著的促进作用,Fe2+对酶活的抑制作用不明显.浓度为0.1%时,Triton X-100对脂肪酶活力有明显促进作用;Brij 35,Tween-80对酶活力的影响不明显;离子型表面活性剂SDS则表现出抑制作用.     

光强对栅藻净化市政污水水质的影响研究

微藻是一种广泛存在的自养型微生物,同时能够降解水体中的营养物质和积累油脂,光照强度是影响藻类生长的重要条件之一;利用原始市政污水来培养栅藻,通过调节光强的不同,分别研究了栅藻在1000lux和3000lux光照强度下对污水水质的影响,结果表明：栅藻的藻密度在3000lux条件下要高于1000lux,其中栅藻在3000lux下培养时最大藻密度为268×10^5个／mL,明显高于其他3组;不同光强下,栅藻在光照为1000lux和3000lux条件下TN去除率分别为90％和94％;TP去除率分别为98％和99％,高于相应污水组的67％和94％,在一定范围内,光照强度的提高能够促进藻类的生长,提高藻细胞的活性,从而提高栅藻对水体中污染物质的去除率。     

两株细菌对偶氮染料活性艳红X—3B脱色的研究

从太原市纺织绒染厂废水处理站曝气池分离筛选到一株假单胞菌和一株黄单胞菌,探讨了这两株菌在不同碳源、不同ｐＨ和不同温度条件下对活性艳红Ｘ—３Ｂ的脱色效果。试验结果表明,假单胞菌和黄单胞菌分别以葡萄糖,果糖和无水乙酸钠为碳源时,脱色效果都较好,且黄单胞菌以可溶性淀粉作碳源时也有较高的脱色率。这两株菌脱色的最适ｐＨ均为８．０。假单胞菌脱色的最适温度为２５℃,黄单胞菌脱色的最适温度为３０℃。     

南海海洋细菌 Pseudomonas sp.产生的一种抗肿瘤蓝色素

Pseudomonas sp.是从大亚湾表面海水分离到的一株新的海洋细菌,在改变培养条件之后,能产生不同的次级代谢产物.从该菌培养液的脂溶性部分分离得到一种蓝色素Blue-1, 它的结构通过NMR, 2D-NMR, FABMS,元素分析得到确定,与从陆生菌 Chromobacterium violaceum(Bacillus violaceus) 中分离得到紫色杆菌素 (violacein)的结构一致.抗肿瘤活性试验结果表明,Blue-1对肿瘤细胞生长有很强的抑制作用,对MCG803的IC50为4.6 μg/mL,对BEL-7402的IC50为6.8 μg/mL.     

三相分离甾短杆菌胆固醇氧化酶及其性质

三相分离(TPP)是将硫酸铵与叔丁醇混合后形成有机相、中间沉淀相和水相。在20°C,调节发酵上清液的pH至6.0,加入硫酸铵使终浓度为400 g/L,溶解后加入与上清液等体积的叔丁醇,静置1 h分相,胆固醇氧化酶在有机相和水相之间形成蛋白沉淀,12 000 r/min离心10 min收集中间蛋白相,用pH 7.5,10 mmol/L的磷酸缓冲液溶解。结果表明:利用三相分离技术从乳化体系中分离纯化胆固醇氧化酶,比酶活提高了3.49倍,收率达93%。回收的酶液进一步经过DEAE-Sepharose Fast Flow纯化,比酶活从3.56 U/mg提高到30.15 U/mg。该酶最适反应温度为60°C,最适反应pH为7.5,酶的等电点为8.5,该酶在37°C,pH 6.0~8.0较为稳定。Hg2 和Ag 离子完全抑制胆固醇氧化酶的活性。     

大亚湾海洋细菌Pseudomonas sp.中的红色素

海洋细菌Pseudomonas sp.，采集于大亚湾，从该菌的菌体提取物分离得到2个红色素：灵菌红素A和新的衍生物二甲基灵菌红素B。它们的结构通过NMR，LC-MS等确定，并得出灵菌红素是具有强烈抗微生物和细胞毒性的化合物，同时研究了它的培养条件。     

鞘氨醇单胞菌N1菌株的16SrDNA序列分析和溴氨酸降解的动力学

对降解蒽醌染料中间体溴氨酸的N1菌株进行了16S rDNA序列分析和溴氨酸生物降解的动力学研究．N1菌株经过16S rDNA序列测定和同源性分析,被鉴定为鞘氨醇单胞菌（Sphingomonas sp．,以前曾称为Pseudomonas sp．）．在高浓度溴氨酸时N1菌株的降解过程存在底物抑制现象,其行为符合Andrews提出的描述微生物菌体生长的非竞争性底物抑制模型．本文对此方程进行了非线性回归,确定了模型参数,实验数据对该动力学方程能很好拟合．此外,从模型中得出,溴氨酸浓度为520～580mg／L时,μ与q均达到较高值,这一实验结果为溴氨酸废水的生物处理工艺提供了重要参考条件。     

假单孢菌PKE117木素过氧化物酶的酶学性质及基因克隆

对纯化得到的假单孢菌PKE117的胞外木素过氧化物酶的酶学性质进行了初步研究,发现其最适pH为5.0,最适温度为30℃,以藜芦醇为底物,在25℃,pH3.0的琥珀酸钠缓冲液中与底物反应时的Km值为(0.277±0.0008)mmol/L,vmax为(0.049±0.001)mmol.mg-1protein.min-1。根据LiP已知保守序列设计引物,提取质粒,扩增得到一条199bp的DNA片段lip1和一条563bp的DNA片段lip2,序列比对结果显示与已报道的白腐真菌过氧化物酶基因的同源性不是很高。核苷酸翻译后的氨基酸序列比对结果发现,LiP1与Pycnoporus sanguineus的漆酶的同源性达到100%,与Mycobacteriumbovis的木素过氧化物酶的同源性达到80%;LiP2与Arabidopsis thaliana的过氧化物酶同源性达到100%,与Hordeum vulgare的过氧化物酶1同源性为75%。