中枢去甲肾上腺素与电针镇痛的耐受

本文报道大鼠经持续6小时电针后,镇痛作用逐渐减弱,形成电针耐受.电针耐受动物的脑和脊髓内NE的更新十分活跃.脊髓内的NE具有镇痛作用,但长时间电针使NE持续大量释放,可使脊髓神经元对NE的作用发生耐受.此时由脊髓蛛网膜下腔注入NE的前体以加强NE的作用,可部分翻转电针耐受.脑内NE所起的作用与脊髓内NE不同.给大鼠脑室注射α阻断剂可部分翻转电针耐受,说明这时脑内NE功能活动过强,通过α受体对抗电针镇痛.这种对抗作用可能与脑内NE对5-羟色胺神经元的抑制作用有关。     

中枢5-羟色胺在电针镇痛耐受中的作用

给大鼠多次电针,电针镇痛效果逐渐减弱,而产生电针镇痛耐受,并与吗啡镇痛产生交叉耐受。脑室注射5-羟色胺(5-HT)的前体可以翻转电针镇痛耐受。测定电针镇痛耐受的动物脑内5-HT含量和更新率并不降低,5-HT受体的最大结合力也未见下降。多方面的资料表明,机体对内源性释放的5-HT发生耐受,可能是电针镇痛耐受的一个重要原因。     

钙离子在电针镇痛、电针耐受和吗啡耐受发展中的作用

本文研究了Ca~(2+)在电针镇痛、电针耐受和吗啡耐受发展中的作用,同时了解电针耐受发展是否能被蛋白质合成抑制剂抑制。实验结果表明,和吗啡耐受一样,电针耐受动物的脑Ca~(2+)和cAMP水平均明显增高。用蛋白质合成抑制剂茴香霉素(Anisomycin)、放线菌素(Actinomycin)或环己亚胺(Cycloheximide)处理后,电针镇痛耐受发展被抑制,同时使脑Ca~(2+)和cAMP水平降低.从脑Ca~(2+)和cAMP水平的变化看,电针、吗啡和镧系元素引起的镇痛,以及电针和吗啡的耐受发展不仅相似,很可能还有共同的离子基础和作用机理,同时提示蛋白质合成抑制剂阻断电针和吗啡的耐受发展似与新的多肽或RNA合成相关。     

解吸电喷雾电离飞行时间质谱成像分析大鼠脑组织中小分子神经化学物质的分布

采用解吸电喷雾电离飞行时间质谱成像(DESI-TOF-MSI)技术分析了大鼠脑组织中小分子神经化学物质及其代谢产物的分布。制备大鼠全脑水平切面冷冻切片,采用DESI-TOF-MSI质谱扫描成像,考察喷雾溶剂组成及比例对神经化学物质分别在正离子和负离子模式下的检测信号强度的影响。对比正、负离子模式下的高分辨质谱信息及HMDB数据库检索分析,在大鼠脑组织中共检测到25种神经化学物质及其代谢产物,并且在0.1%甲酸-甲醇喷雾溶剂条件下检测到神经化学物质分子离子峰信号强度提升最大。应用HDImaging v1.5软件对数据进行精细成像分析,结果表明,喷雾溶剂中添加0.1%甲酸对成像效果的提升程度与质谱信号强度提升趋势相似,并且本方法具有较高的重复性。其中,γ-氨基丁酸和天冬氨酸主要分布在大脑皮层中,丝氨酸在全脑分布,谷氨酰胺分布于海马区周围,神经化学物质与其前体和主要代谢产物在脑中的空间分布区域相同。本研究结果表明,DESI-TOF-MSI技术可用于大鼠脑组织中小分子神经化学物质分布的分析,为小分子神经化学物质在脑中的空间分布和空间代谢研究提供了快速、有效的可视化分析方法。     

糖尿病大鼠脑能量代谢改变的核磁共振磷谱研究

应用链脲佐菌素(Streptozocin,STZ)制备糖尿病(Diabetes mellitus,DM)大鼠模型,采用离体的核磁共振磷谱(31P Magnetic resonance spectroscopy,MRS)方法检测糖尿病大鼠脑组织的生化改变。全脑的31P MRS谱图结果显示,STZ诱导1周后,磷酸单酯和磷酸二酯的含量无明显改变,表明糖尿病大鼠脑中并没有发生膜性结构的改变。二磷酸腺苷峰增高,磷酸肌酸(Phosphocreatine,PCr)和三磷酸腺苷(Adenosine triphosphate,ATP)含量无明显改变,但是PCr/ATP降低,说明PCr作为能量缓冲底物维持能量平衡。此外,pH值降低,表明在糖尿病大鼠脑中细胞内环境改变。当糖尿病发展到15周时,磷脂膜代谢和脑能量代谢紊乱。31P MRS不仅能够无创性提供磷脂代谢情况及能量状况,还可以测得细胞内pH值等方面的生化信息,有助于理解糖尿病脑病的发病机制,并为临床的早期诊断和治疗提供理论依据。     

电针显著增加大鼠纹状体和垂体中脑啡肽原mRNA含量

电针能增加纹状体、下丘脑和脑脊液中脑啡肽的含量。进一步的研究表明大鼠纹状体内脑啡肽含量的上升伴有其前体和中间体水平的升高。为阐明这些现象,我们运用重组DNA技术测定了大鼠纹状体和垂体中脑啡肽原mRNA的水平。经点点杂交分析(Dot-blot Hybridization) 脑啡肽原 mRNA和人脑啡肽原cDNA探针专一性的结合,30min的电针后电针组大鼠纹状体中脑啡肽原mRNA升高3—5倍。这个增加发生在电针结束1h后,且可持续48h。但垂体中脑啡肽原mRNA则在电针一结束时就能观察到增加约3倍,在电针后1—24h约上升5—6倍。     

溴端基聚丁二烯氧化机理的研究

本文对聚丁二烯氧化后的样品的^1^3CNMR谱在100-107PPm范围内出现的峰加以讨论, 进一步深入了解聚丁二烯的氧化机理, 以四溴化碳存在下经乳液聚合制得的溴端基聚丁二烯作为样品, 使甲电泳与薄层色谱结合的方法进行层析。     

改进遗传算法用于未知组分数的重叠色谱峰的解析

按照指数修正的Gauss卷积色谱峰模型，构造了结合模拟退火及变长染色体的改进遗传算法，并结合爬山法，可以方便快捷地进行数目未知的重叠色谱峰的精确解析；此法成功地应用于大鼠脑微透析液氨基酸定量分析中，解析结果良好。     

在线微透析-液相色谱-串联质谱法测定人参水提物对糖尿病脑病大鼠脑内神经活性物质的影响

评价人参水提物对糖尿病脑病大鼠学习记忆能力及脑内神经活性物质的影响。建立糖尿病模型,采用Morris水迷宫实验以逃避潜伏期(ELT)、穿越目标区域次数及中心区域(%)为指标评价大鼠的学习记忆能力。利用在线微透析-液相色谱-串联质谱法,Venusil C18柱梯度洗脱,MRM方式检测各组大鼠海马区8种神经活性物质水平并进行比较。结果表明:糖尿病大鼠人参治疗后认知能力明显改善(p<0.05);在线检测方法线性良好(R2>0.99),准确度和精密度满足分析要求;相比模型组,人参组大鼠脑内牛磺酸、乙酰胆碱水平显著升高(p<0.01),谷氨酸、丝氨酸、天门冬氨酸、γ-氨基丁酸、多巴胺和五羟色胺水平均显著降低,8种神经活性物质水平均向正常水平调节。     

硝酸镥急性毒性的体液核磁共振氢谱研究

采用现代核磁共振技术,通过分析灌胃给药0．01、0．05、0．2、2、10和100ms／kg剂量Lu(NO3)3 24h内大鼠尿液及24h后大鼠血清的核磁共振氢谱(^1HNMR),由体液中内源性代谢物浓度的变化研究了稀土化合物在动物体内急性毒性。较高剂量组体液中的氨基酸、尿囊素、柠檬酸、氮氧三甲胺和肌酸酐等重要内源性代谢物的核磁共振谱峰强度发生了明显的变化,说明动物体内的代谢物出现异常：高剂量的稀土的引入可能使动物肾脏和肝脏均受到损害,且受损程度随稀土剂量的增高而渐趋严重。     

有机合成与脑化学

设计和合成能选择性地调节神经中枢内信号传导过程的小分子化合物是现在脑化学中的一个热点。本文以调节谷氨酸受体及其亚基、蛋白激酶C 及其异构酶的化合物为例, 论述了有机合成化学在脑化学发展中的作用及面临的新挑战。     

分级冷凝生物油组分富集与组分稳定性研究

利用GC-MS分别检测分级冷凝装置和常规冷凝装置制备的核桃壳生物油,对比常规冷凝生物油与分级冷凝多品级生物油有机组分的相对峰面积,发现分级冷凝对组分富集有较大影响,其中,乙酸在第四级生物油内相对峰面积从5.38%上升至9.44%;愈创木酚在第二级内从3.46%上升至6.23%;紫丁香醇在第一级内从1.48%上升至4.44%;异丁香酚在第一级内从5.52%上升至17.84%。经过75 d、15℃恒温恒湿储存后分级冷凝生物油水分增加,分别增加了1.58%、1.88%、1.80%、2.43%;脂肪类有机物峰面积减小;酚类有机物峰面积增大。第一、二级生物油内小分子有机物含量较少,老化反应强度较低;第三、四级生物油内小分子有机物含量较多,老化反应强度较高。根据GC-MS检测结果将有机物分类,统计各类有机物在储存前后的含量变化,分析储存过程中各类有机物发生的老化反应种类以及反应强度。     

电化学活化碳纤维微电极和脑神经递质及抗坏血酸在体测定

本文采用一种简单电化学方法,即恒电流法处理自制碳纤维电极,在脑神经递质测定中显示了很高的灵敏度和分辨能力.活化后的电极对多巴胺的检测限达5×10^-8mol.dm^-3,对多巴胺和抗坏血酸的伏安峰分离达170mV.作者使用该电极,采用半微分伏安法测定了活体大鼠脑内抗坏血酸,3,4-二羟苯乙酸和5-羟吲哚乙酸的浓度分别为1.7×10^-4,2.1×10^-5和 3.3×10^-6mol·dm^-3.本文对电极的制作,活化条件,伏安峰判别,在体药物实验和电极活化机理等进行了研究和探讨.     

开环棉籽糖分子内交联血红蛋白及其戊二醛的二次交联

用高碘酸钠氧化制备开环棉籽糖(O-Raffinose),将其作为交联剂对脱氧态无基质血红蛋白(Stroma-freehemoglobinSFHb)进行修饰.十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺不连续电泳(SDS-PAGE)结果显示,开环棉籽糖交联血红蛋白(O-Ra-Hb)与SFHb相比抗解聚性有明显提高;琼脂糖(Sepharose)凝胶层析结果显示,SFHb和O-Ra-Hb出峰时间和峰形大小基本相同,说明交联反应主要发生在分子内的亚基间,基本没有分子间交联产物.用戊二醛(GDA)在优化条件下对O-Ra-Hb进行分子间二次交联,SDS-PAGE结果显示,二次交联产物稳定性比O-Ra-Hb有了进一步提高;Sepharose凝胶层析结果表明,产物中分子量为65000的未聚合的O-Ra-Hb组分为22.6%,分子量为130000～600000的组分为76.9%,分子量为600000以上的组分仅为0.5%,达到了预期目的.     

光响应偶氮苯基长链小分子功能化聚乙烯醇的合成与性能

以对甲氧基苯胺为起始原料，经重氮化、亲电加成、取代成醚和酰氯化系列反应制得具有连续柔性亚甲基（五个）的偶氮苯长链小分子（3）；再通过酯化反应将3接枝到聚乙烯醇（PVA）分子链上，合成了具有光响应行为的偶氮苯基长链小分子功能化聚乙烯醇（4），其结构经FT IR表征。并对4进行了UV-Vis、 DSC和 TG分析。结果表明：经偶氮苯化合物功能化PVA的最大分解峰推迟了120 ℃，热稳定性显著提高；分别经过30 s和3 min的紫外光和可见光照射后，偶氮苯官能团发生顺反异构转化，表明功能化PVA具有可逆光致异构化行为。     

满山红化学成分的研究(第Ⅲ报)

从满山红挥发油的含氧部分,经硝酸银硅胶层析分得八种成分.其中六种成分根据光谱分析及衍生物制备分别鉴定为牻牛儿酮、薄荷醇、杜松脑和α,β,γ-桉叶醇.另外二种成分得量很少,尚未鉴定.     

离子交换介孔分子筛DEAE-SBA-15的制备及其用于分离纯化粉尘螨主要变应原Derf2

通过3-含氧缩水甘油基-丙基-三甲氧基硅烷(GPTS)将二乙胺基乙基(DEAE)嫁接在介孔分子筛SBA-15的表面,制得弱阴离子交换层析剂DEAE-SBA-15,使其既具有分子筛作用,又具有离子交换作用的特点.经DEAE-SBA-15层析后,从粉尘螨代谢培养基中获得单一的洗脱峰,SDS-PAGE显示一条谱带,其相对分子质量为14000,表明经分离纯化所得到的蛋白质是粉尘螨主要变应原Derf2.对螨性哮喘患者皮肤点刺试验表明,所得Derf2仍具有变应原活性,且仅通过一次柱色谱即得Derf2,表明DEAE-SBA-15是一种较好的离子交换层析剂.     

一个解决溶剂峰分离的新手段

在凝胶色谱的测试中,由于样品和溶剂的原因,经常会出现溶剂峰.目前,普遍认为,溶剂峰的出现是有两个原因造成的,一是样品中未反应的单体、合成过程中加入的低分子添加剂等小分子的物质,或者一些容易吸潮的样品,吸收了空气中的水份.另外一个原因是凝胶色谱仪器用的流动相的溶剂和溶解样品的溶剂不是同一批号.例如,新出厂的四氢呋喃(THF)试剂,为了防止试剂的氧化,一般都加入一些抗氧化剂.溶剂峰出现的干扰了我们的数据处理的结果.     

邻苯二甲醛柱前衍生反相高效液相色谱法测定氨基酸类神经递质

以邻苯二甲醛柱前衍生,ODS(C_(18))柱分离,pH 6.0乙酸盐缓冲溶液与甲醇二元梯度洗脱,荧光检测,仅9min内分离测定了大鼠脑中5种氨基酸递质的含量。在1～10μmol·L~(-1)浓度范围内,氨基酸的峰面积与其浓度呈现良好的线性关系,相关系数在0.9978～0.9999之间。     

亚硒酸钠对大鼠代谢产物影响的核磁共振研究

本文采用核磁共振(^1H NMR)技术研究了在最高耐受摄入量条件下补充亚硒酸钠对大鼠尿液代谢产物的影响。结果表明,在大鼠尿液中甲酸、乙酸、乳酸、丙氨酸、琥珀酸、甘氨酸、马尿酸、苯丙氨酸、色氨酸等代谢物谱峰信号显著增强,而柠檬酸、肌酸、尿素、尿甘素和氧化三甲胺(TAMO)的谱峰信号则显著降低。乳酸、柠檬酸和琥珀酸是体内三羧酸循环的中间产物,其代谢异常是能量代谢紊乱的标志;马尿酸、苯丙氨酸、丙氨酸的代谢异常与肾小球的滤过和回收功能有关;乙酸和甘氨酸的代谢异常则是肝功能损伤的标志,组织切片的结果也证明大鼠的肝和肾已经发生损伤,与^1H NMR的结果相一致。采用HPLC检测到补充亚硒酸钠后尿液中8-OHdG(8-hydroxy1-2′-deoxyguansoine)水平显著升高,证明体内氧化损伤的发生。以上结果表明,在最高耐受摄入量条件下补充亚硒酸钠是不安全的,用NMR方法对阐明硒的毒理学分子基础是有效的。