毛细管电泳紫外检测法同时分析樟芝多糖水解液中8种单糖

本文报道了同时分析D-木糖、阿拉伯糖、葡萄糖、鼠李糖、D-甘露糖、半乳糖、D-葡萄糖醛酸和D-半乳糖醛酸8种单糖的毛细管电泳紫外检测方法。利用本研究所建立的方法,可以同时检测樟芝多糖水解液中的8种单糖,方法的检测限为0.11～0.22μg/mL,回收率在88%～104%之间,相对标准偏差(RSD)小于3%。本研究为分析表征樟芝多糖提供了一种可靠的方法。     

毛细管电泳-电化学检测法测定淮山中薯蓣皂苷和腺苷含量

建立了毛细管电泳-电化学检测(CE-ED)法测定淮山中薯蓣皂苷和腺苷的含量。考察了检测电位、运行缓冲液浓度和pH、分离电压及进样时间等的影响。在优化的实验条件下,对0.1mg/L薯蓣皂苷、腺苷在9min内实现了分离,其线性范围分别为0.1~1 000μg/L和0.1~1 200μg/L;检出限分别为0.04μg/L和0.03μg/L,峰电流的相对标准偏差(RSD,n=6)分别为1.7%、1.5%,迁移时间的RSD分别为0.7%、0.6%。该方法已用于淮山样品中薯蓣皂苷和腺苷的测定,样品加标回收率在98.0%~102.5%之间,RSD≤2.3%。     

高效液相色谱-蒸发光散射法测定皂荚壳多糖的单糖组分及其含量

提出了高效液相色谱法测定皂荚壳多糖的单糖组分及其含量的方法。皂荚壳样品经乙醇-水(95+5)溶液提取,滤液经分级沉淀除去蛋白质,过中空纤维膜净化。以ZORBAX Carbohy-drate色谱柱(4.6mm×250mm,5μm)分离,以不同体积比的乙腈和水为流动相进行梯度洗脱,用蒸发光散射检测器检测。鼠李糖、核糖、木糖、阿拉伯糖、果糖、甘露糖、葡萄糖、山梨醇和半乳糖等9种单糖的质量浓度分别在一定的范围内与其峰面积呈线性关系,方法的检出限(3S/N)在0.010～0.048g.L-1之间。采用标准加入法做回收试验,平均回收率在99.3%～101%之间,测定值的相对标准偏差(n=8)均小于0.2%。     

气相色谱法分析蔗渣半纤维素的糖组成

用一根2米×4毫米螺旋形不锈钢色谱柱,分段装入3％XE—60和3％OS—138固定相,氮作载气,在半小时内可将鼠李糖、岩藻糖、来苏糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖等糖腈乙酰酯分离开。4,4′—二异丙基联苯作内标,配制已知浓度的阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖和内标的吡啶溶液,在不同反应条件下制备糖腈乙酰酯,测定各单糖糖腈乙酰酯对4,4′—二异丙基联苯的相对S′值,研究反应条件对糖腈乙酰酯得率的影响。定量分析了不同碱浓度抽提得的蔗渣半纤维素的糖组成,指出蔗渣半纤维素中除绝大部分为阿拉伯木聚糖外,尚有少许的阿拉伯半乳聚糖和葡萄甘露聚糖。     

高效液相色谱法测定烟草料液中的糖

研究了用蒸发光散射检测器检测，高效液相色谱法测定烟草料液中糖的方法。料液中的糖用固相萃取预分离，然后以Waters carbohydrate高效糖柱为固定相，V（乙腈）：V（水）=70：30作为流动相分离，蒸发光散射检测器检测；样品中鼠李糖、木糖、阿拉伯糖、果糖、甘露糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖8种糖的加标回收率分别为：97．0％、95．6％、102％、102．1％、95．0％、101．8％、102．6％、97．8％；线性范围分别为：鼠李糖、果糖、葡萄糖、蔗糖0．1～20pg，木糖、阿拉伯糖、甘露糖、麦芽糖0．2～25μg。相对标准偏差均小于3．2％。方法的检出限达：鼠李糖20ng、木糖26ng、阿拉伯糖28ng、果糖14ng、甘露糖20ng、葡萄糖10ng、蔗糖12ng、麦芽糖15ng，用该方法测定了烟草料液中的糖。     

海水小球藻中多糖的提取及其单糖组成的气相色谱-质谱分析

在温度为70℃、功率为600 W、提取时间为30 m in的条件下,海水小球藻中的多糖可以得到较好的提取。经过优化,当超声波作用时间为90 m in、超声波功率为300 W、水解液为1 mol/L乙酸时,小球藻多糖的超声水解效果最好。碱提、水提、酸提海水小球藻多糖中的单糖组成,经过GC-MS分析,它们的单糖组成各不相同。碱提粗多糖中所含单糖为鼠李糖、L-岩藻糖、D-阿拉伯糖、D( )-木糖、D-甘露糖、D-葡萄糖、D-半乳糖,各单糖百分含量分别为20.68%、0.32%、1.0%、2.20%、4.58%、50.28%、20.91%(W/W);水提海水小球藻粗多糖中含鼠李糖、核糖、岩藻糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖8种单糖,它们百分比分别为2.32、2.36、0.24、0.89、0.56、3.44、78.21、11.99%(W/W);酸提粗多糖中所含单糖为鼠李糖、核糖、岩藻糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖,各单糖百分含量分别为2.75、1.75、0.23、1.04、0.61、5.99、74.33、13.30%(W/W)。本实验所建立的微波辅助提取、超声水解多糖、GC-MS分析多糖中的单糖组成等方法,具有简便、快速、准确的特点。可用于海藻和其它植物中的多糖研究。     

树莓多糖中单糖组成的GC-MS分析

建立了GC-MS测定树莓多糖中单糖组成的分析方法。树莓多糖经三氟乙酸水解后,采用盐酸羟胺肟化和乙酸酐乙酰化衍生,利用GC-MS测定树莓多糖中的单糖组成。最终测得树莓多糖由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成,其摩尔比为2.0∶19.9∶1.0∶1.1∶7.1∶2.3,其中阿拉伯糖和葡萄糖的所占比例较高。     

纳米铜/石墨烯修饰电极用于离子交换色谱测定五种单糖

把纳米铜和石墨烯修饰在玻碳电极表面,制备了纳米铜/石墨烯复合修饰电极。采用电化学方法,在!1.5~0 V的循环扫描电位条件下,氧化石墨烯(GO)和Cu2+同时在玻碳电极上被电化学还原,形成石墨烯(Gr)和纳米铜(CuNPs)复合膜。所制备的修饰电极对葡萄糖等单糖化合物具有较高的电催化活性,且电极稳定性和重现性均良好。将此修饰电极作为电化学检测器,与高效阴离子交换色谱联用,分离测定了5种单糖化合物(岩藻糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖和甘露糖)。结果表明,岩藻糖和阿拉伯糖的线性范围为0.1~100 mg/L,半乳糖、葡萄糖和甘露糖的线性范围为0.5~100 mg/L,5种单糖化合物的线性相关系数均大于0.998,相对标准偏差RSD(n=6)为1.9%~2.5%,检出限在0.02~0.10 mg/L之间;将此方法用于测定样品桑黄粗多糖的单糖组成,测得5种单糖的回收率为84.8%~94.5%,准确度和精密度均较好。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定螺旋藻多糖的单糖组成

建立了同时测定螺旋藻多糖水解产物中鼠李糖、木糖、阿拉伯糖、果糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖、甘露醇、核糖、岩藻糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸12种糖类化合物的超高效液相色谱-串联质谱分析方法。螺旋藻样品经超声波辅助提取,用三氟乙酸水解,经Waters Acquity BEH Amide色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm)分离,以10mmol/L甲酸铵和10 mmol/L甲酸铵-乙腈为流动相,在电喷雾电离源负离子(ESI-)模式下,用多反应监测(MRM)模式检测。结果表明,12种糖类化合物的定量限为0.005~0.15 mg/kg,线性范围为0.05~5 mg/L。按照样品中每种糖本底含量的50%、100%、150%进行添加,回收率为80.21%~121.6%。应用该方法对螺旋藻样品进行分析,结果发现:大部分样品都能检测到岩藻糖、半乳糖、阿拉伯糖、鼠李糖、葡萄糖、果糖、木糖、核糖,含量在0.3~889.4 mg/g之间。此外,测定的15个样品中岩藻糖、半乳糖、阿拉伯糖、鼠李糖、葡萄糖、果糖、木糖、核糖是共有组分,含量差异较大,但在所有样品中均未检测到甘露醇和甘露糖。该方法的建立可为阐明螺旋藻多糖的结构组成及其活性提供技术支撑及基础数据。     

离子色谱-脉冲安培法测定芦荟多糖中7种单糖的含量

采用水提醇沉法提取芦荟鲜叶中的多糖，经三氟乙酸水解，利用Dionex CarboPac PA10高效阴离子色谱柱分离，氢氧化钠梯度淋洗，积分脉冲安培检测，建立了芦荟多糖中岩藻糖、鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、甘露糖和木糖7种常见单糖的测定方法。结果表明：7种单糖在线性范围内的相关系数（R²）均高于0.997，检出限为0.007~0.024 mg/L，加标回收率为97.5%~102.5%，相对标准偏差（RSD）为0.1%~4.8%。该法简单、快速、灵敏、准确，可用于芦荟多糖中单糖含量的测定和多糖组成的研究。     

白芷多糖的分析

研究了白芷多糖的结构和单糖组成。采用紫外光谱和红外光谱法对白芷多糖进行定性分析。结果表明,白芷多糖具有多糖特征性的紫外和红外吸收峰,其分子中存在酰胺结构;凝胶渗透色谱法测定结果表明,白芷多糖的峰值分子量为88538;采用气相色谱法测定白芷多糖中单糖的种类和构成比例,结果表明,白芷多糖由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖等7种单糖组成,并计算出其中6种单糖的摩尔组成比例。     

毛细管电泳-电化学发光法检测淮山中乐果的残留量

采用毛细管电泳-电化学发光(CE-ECL)法检测淮山中乐果的残留量。考察了检测电位、缓冲液浓度及其pH值、分离电压、进样电压和时间等实验参数对测定乐果的影响。在优化的实验条件下,乐果在0.50~10 000μg/L范围内与ECL强度呈良好线性,检出限为0.050μg/L。对0.500mg/L乐果溶液连续6次测定,峰高的相对标准偏差(RSD)为1.8%,迁移时间的RSD为1.0%。该方法用于淮山中乐果残留量的测定,加标回收率在98.3%~103.0%之间,RSD≤2.3%。     

气相色谱定量分析单糖的研究

单糖糖腈乙酰酯制备简单,性质稳定,是气相色谱分析葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖、甘露糖等醛糖的较理想衍生物。本文研究了XE-60和OS-138两种固定液对糖腈乙酰酯的分离,以求配制出适用单糖含量有数量级差别的糖样分析柱;选用4,4′-二异丙基联苯为内标,研究反应条件对糖腈乙酰酯得率的影响;测定阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖(衍生成糖腈乙酰酯)对内标的相对响应值以用于单糖的定量分析。     

柱前衍生超高效液相色谱-串联四极杆质谱法测定仙草多糖组成及其含量

建立了测定仙草多糖组成及其含量的超高效液相色谱-串联四极杆质谱分析方法。仙草样品在碱性条件下用沸水提取,提取液经固相萃取小柱净化后加三氟乙酸在110℃水解,然后采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生。以Waters ACQUITY UPLC BEH C18(2.1 mm i.d.×50 mm,1.7μm)为分析柱,乙腈和缓冲盐溶液(0.5 mmol/L乙酸铵-0.05%乙酸)为流动相进行梯度洗脱分离,流速0.5 mL/min,电喷雾正离子多反应监测模式检测,内标法定量。结果显示8种单糖在1～100μmol/L浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数r2均大于0.96,方法的回收率为84%～112%,相对标准偏差(RSD)不高于4.7%。仙草多糖由甘露糖、鼠李糖、核糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和木糖8种单糖组成,其摩尔百分比为7.4%、5.7%、4.2%、0.9%、28.4%、26.5%、16.4%和10.6%。该法简单、快速、灵敏高、重现性好,可用于仙草多糖的单糖组成分析和含量测定。     

柱前衍生化HPLC法测定酵母细胞壁中的甘露聚糖与β-葡聚糖

采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)为柱前衍生化试剂,结合反相高效液相色谱法,建立了同时测定酵母细胞壁中甘露聚糖和β-葡聚糖的方法。样品中的多聚糖经盐酸高温水解得到甘露糖和葡萄糖,经PMP衍生后,以0.02 mol/L乙酸铵-乙腈(80.5∶19.5)为流动相等度洗脱,反相C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm)分离,紫外检测器(波长250 nm)检测,所测2种单糖的含量通过换算后得到甘露聚糖和β-葡聚糖的含量。结果表明,甘露糖和葡萄糖在10.0~1 000 mg/L质量浓度范围内与对应峰面积呈良好的线性关系,相关系数(r2)大于0.999。样品在28.0~80.0 mg范围内加标水平的平均回收率为88.1%~91.0%,相对标准偏差(RSD)小于3%,甘露糖和葡萄糖的检出限(LOD)分别为0.10 mg/L和0.08 mg/L。该方法灵敏度高、准确性好、实用可靠,适用于酵母细胞壁样品中甘露聚糖和β-葡聚糖含量的分析测定。     

苧麻果胶及半纤维素糖基组成的研究

苧麻用草酸铵抽提果胶,用氢氧化钾和氢氧化钠抽提半纤维素。果胶和半纤维素水解成单糖,再制备成糖腈乙酰酯和二硫缩醛硅烷化衍生物,作气相色谱分析,研究其糖基组成。实验结果表明,苧麻果胶糖基以半乳糖醛酸及半乳糖醛酸甲酯为主,其次为鼠李糖、半乳糖和阿拉伯糖,还有少量的岩藻糖、葡萄糖和木糖等。苧麻半纤维素中存在着葡萄甘露聚糖和鼠李半乳糖醛酸聚糖等多糖,前者糖基组成以葡萄糖和甘露糖为主,后者则以鼠李糖、半乳糖及半乳糖醛酸为主,它与果胶的糖基组成相似,但中性糖基占主要成份,用草酸铵难以将其抽出,用碱抽提则比葡萄甘露聚糖容易。     

铁皮石斛原球茎多糖DCPP3c-1的分离纯化及结构初步分析

铁皮石斛原球茎粗多糖(DCPP)经阴离子交换纤维素柱(DEAE-2)和凝胶柱(Sephadex G-200)依次层析,分离纯化得灰色多糖DCPP3c-1.其纯度经比旋光度法、柱层析、紫外扫描检测,组分和结构经薄层层析、高效液相色谱、红外光谱及高碘酸钠氧化等试验分析.结果显示DCPP3c-1为均一组分,相对分子质量为72.4 ku.由甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖组成,其分子物质的量之比为1.120 4:1:1.046:23.354:3.828:1.046.分子中1→6残基占14%,1→2或1→4残基占40.7%,1→3键占45.3%.红外光谱显示其具有多糖特征吸收峰,并存在吡喃糖苷键.DCPP3c-1是首次从液体悬浮培养的原球茎中分离得到的新型酸性杂多糖组分.     

HPLC衍生化法分析决明子多糖水解产物中单糖组分及其多糖组成特征的研究

分别利用分光光度法和1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生化/HPLC法分析了12批不同批次药材的决明子多糖及其水解产物中的单糖组分,以水解的单糖组分建立了决明子多糖的HPLC指纹图谱,并研究了决明子多糖的组成特征。结果表明,经过纯化的决明子多糖含量在93.41%~98.57%之间,以甘露糖为参照峰建立了12批药材的指纹图谱,相似度在0.963~0.999之间,多糖水解产物中单糖组分的含量在1.617~304.5 mg/g之间,7个共有峰组分含量大小分布均依次为:甘露糖木糖半乳糖葡萄糖阿拉伯糖葡萄糖醛酸氨基半乳糖,显示了决明子多糖的基本组成结构特征,12批药材的决明子多糖中各单糖的平均摩尔比为甘露糖∶木糖∶半乳糖∶葡萄糖∶阿拉伯糖∶葡萄糖醛酸∶氨基半乳糖=43.0∶24.2∶15.4∶5.6∶5.5∶3.4∶2.9。指纹图谱相似度分析和多糖的组成特征分析对市售药材的分析鉴定结果一致,可作为决明子多糖结构分析及其质量控制的依据。     

GC和HPLC分析北豆根多糖的单糖组成的方法比较

采用GC法和HPLC法对北豆根多糖的单糖组成进行分析比较。采用糖腈乙酸酯衍生化—GC法和1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生—HPLC法分别对北豆根多糖的单糖组成进行测定,并评价两种方法的适用性。GC法检测出D-鼠李糖(D-Rha)、D-阿拉伯糖(D-Ara)、D-木糖(D-Xyl)、D-甘露糖(D-Man)、D-葡萄糖(D-Glc)和D-半乳糖(D-Gal);HPLC法检测出D-甘露糖(D-Man)、D-鼠李糖(D-Rha)、D-葡萄糖(D-Glc)、D-阿拉伯糖(D-Ara)、D-半乳糖(D-Gal)、D-木糖(D-Xyl),其中D-阿拉伯糖(D-Ara)和D-半乳糖(D-Gal)的色谱峰重叠。两种方法均检测出6种中性糖组分,对比北豆根多糖的单糖组成分析GC法和HPLC法联用较为适合。     

气相色谱法测定磨甘蔗木素及磨甘蔗酶解木素残留的碳水化合物组成

 ]本文应用三氟乙酸水解磨甘蔗木素及磨甘蔗酶解木素，用糖腈乙酰酯衍生物气相色谱法对木素残留的碳水化合物组成进行了测定和研究。通过改进用肌醇乙为内标，气相色谱联用计算积分机，测定了鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖等的校正因子，并缩短了衍生物制备时间和提高了定量分析的准确性。测得各单糖的回收率均在90％以上。