光固化聚乙二醇水凝胶及其固定化枯草杆菌的研究

制备了一系列光固化聚乙二醇水凝胶固定化载体，研究了该水凝胶的结构、性能及其固定化枯草杆菌发酵产出α－淀粉酶的特性。结果表明，用水凝胶作载体制备的固定化枯草杆菌具有强度高、对温度和酸碱度变化的适应性强、贮存及重复使用性能好等优点。而且其产出α－淀粉酶的活力比相应的游离细胞高出２０％　以上。固定化细胞半连续发酵１７批，历时３７天，产酶活力仅下降２０％。基本能达到实际应用的要求。     

P(DMAA-co-AM)水凝胶制备及其固定α-淀粉酶研究

采用氧化还原引发体系,水溶液聚合法制备P(DMAA-co-AM)水凝胶,并以其作为载体固定α-淀粉酶。采用单一变量法研究交联剂(N,N’-亚甲基双丙烯酰胺)用量、引发剂(过硫酸铵)用量、单体浓度和单体配比对凝胶性能的影响。以水凝胶的最大平衡溶胀度为指标,得出制备P(DMAA-co-AM)水凝胶的优化条件:交联剂用量为0.3%,引发剂用量为0.6%,单体浓度为20%,N,N′-二甲基丙烯酰胺与丙烯酰胺的摩尔比为2∶1。在优化条件下,采用原位聚合法固定α-淀粉酶,测定不同单体配比的P(DMAA-co-AM)水凝胶固定化α-淀粉酶的活性。     

聚乙烯醇凝胶固定化简单节杆菌的研究

研究了以聚乙烯醇（ＰＶＡ）凝胶为载体，用包埋法固定化简单节杆菌（ＡｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒＳｉｍｐｌｅｘ）Ｂｙ－２－１３的制备条件及固定化菌的酶的一般性质．固定化菌的最大酶活力收率可达１００％，其ｐＨ稳定性及储存稳定性均高于游离菌．固定化菌经六次重复使用，酶活力仍不低于原始活力．     

壳聚糖与丙烯腈接枝共聚物的制备及固定化α-淀粉酶研究

本文以过硫酸钾/亚硫酸氢钠为引发体系,制备了丙烯腈接枝壳聚糖的共聚物,并以 其为载体固定化α-淀粉酶,探讨了固定化酶的最佳制备条件和固定化酶的性质,并与游离 酶、壳聚糖作为载体的固定化α-淀粉酶进行了比较,结果表明,丙烯腈接枝壳聚糖共聚物 是固定化α-淀粉酶的优良载体。     

P（DMAA-co—AM）水凝胶制备及其固定a-淀粉酶研究

采用氧化还原引发体系,水溶液聚合法制备P（DMAA-co-AM）水凝胶,并以其作为载体固定a-淀粉酶。采用单一变量法研究交联剂（N,N＇-亚甲基双丙烯酰胺）用量、引发剂（过硫酸铵）用量、单体浓度和单体配比对凝胶性能的影响。以水凝胶的最大平衡溶胀度为指标,得出制备P（DMAA-co-AM）水凝胶的优化条件：交联剂用量为0．3％,引发剂用量为0．6％,单体浓度为20％,N,N’-二甲基丙烯酰胺与丙烯酰胺的摩尔比为2：1。在优化条件下,采用原位聚合法固定a-淀粉酶,测定不同单体配比的P（DMAA-co-AM）水凝胶固定化a-淀粉酶的活性。     

双水相萃取法从发酵液中分离提取α-淀粉酶和蛋白酶的研究

以ＰＥＧ／硫酸铵双水相体系，经一次萃取从α－淀粉酶发酵液中分离提取α－淀粉酶和蛋白酶。萃取最适宜的条件为１５％ＰＥＧ１０００、２０％（ＮＨ４）２ＳＯ４，ｐＨ＝８，α－淀粉酶收率９０％，分配系数为１９．６；与蛋白酶的分离系数高达１５．１，比活率为原发酵液的１．５倍，蛋白酶在水相中的收率高于６０％。本文对反萃取条件进行了初步研究。与传统的提取法相比，本法可直接处理发酵粗滤液，提高工效，降低能耗和酶活损     

免疫吸附剂吸附类风湿因子（RF）

以聚乙烯醇水凝胶为载体，氨基酸为选择性配基，制备亲合性免疫吸附剂，用于清除类风湿性关节炎患者体内的类风湿因子（ＲＦ），实验中对水凝胶载体交联度、选择性配基种类、手臂效应等与吸附及选择性能的关系进行了研究。实验数据表明：当水凝胶交联度为４０％时，联接Ｌ－丝氨酸对ＲＦ具有最好的吸附选择性能。对患者血浆中ＲＦ－ＩｇＭ、ＲＦ－ＩｇＧ、ＲＦ－ＩＧＡ的吸附率分别达到６２．８％、４７．２％、和６０．０％，而对血浆蛋白无吸附。     

壳聚糖固定化胰蛋白酶的研究

以壳聚糖为载体，戊二醛为交联剂，采用两种方法制备了固定化胰蛋白酶。考察了固定化反应中pH值，戊二醛的浓度，以及给酶量对固定化胰蛋白酶活力的影响，并研究了这两种固定化胰蛋白酶的性质。实验结果表明，以戊二醛预交联的网状壳聚糖为载体制备的固定化胰蛋白酶具有更加优良的性能，在最佳固定化反应条件下，酶的活性加收率可达56％。此固定化胰蛋白酶的最适pH为7．0－8．5，最适温度为60℃，Km值为2．52mol/L，固定化胰蛋白酶表现出较好的热稳定性，pH贮存稳定性，以及在乙醇水溶液中的稳定性。     

固定化乳杆菌细胞的离子交换吸附发酵生产乳酸

本文提出了固定化乳杆菌细胞的离子交换吸附发酵生产乳酸的新方法，该法以海藻酸钙凝胶为载体包埋固定化细胞用于生产乳酸，将离子交换树脂填充柱与发酵反应器相连接，用于从发酵液中及时地分离出产物乳酸。这种新方法成功地消除了产物乳酸对乳酸菌生长和产物形成的抑制作用。与常规的发酵法相比，利用离子交换树脂吸附发酵使糖转化率和乳酸生产速率分别由８６．２％和０．３２８ｇ／Ｌ·ｈ提高到９４．７％和０．４８２ｇ／Ｌ·ｈ。     

壳聚糖与丙烯腈接枝共聚物的制备及固定化a—淀粉酶研究

主以过硫酸钾／亚硫酸氢钠为引发体系,制备了丙烯腈接枝壳聚糖的共聚物,并以其载体固定化a-淀粉酶,探讨了固定化酶的最佳制备条件和固定化酶的性质,并与游离酶、壳聚糖作为载体的固定化a-淀粉酶进行了比较,结果表明,丙烯腈接枝壳聚糖共聚物是固定化a-淀粉酶的优良载体。     

壳聚糖固定L-天门冬酰胺酶的研究

研究了以壳聚糖为载体，戊二醛为交联剂，固定化Ｌ－天门冬酰胺酶的最适条件，并对固定化天门冬酰胺酶的理化性质进行了初步探讨。分别从不同固定化程序、缓冲液及保护剂等方面进行了固定化天门冬酰胺酶的条件优化；固定化酶的活力回收可达２０％左右。固定化酶的最适范围变宽，由游离酶的最适ｐＨ＝４～６变为ｐＨ＝６～１０。连续使用６次后仍可基本维持固定化酶的活力。固定化酶对胃蛋白酶的水解性也较游离酶大大提高。     

甲烷生物催化氧化制甲醇:固定化细胞催化剂的制备及其催化性能的研究

研究了利用无机载体（活性炭、氧化铝、分子筛等）吸附法和天然藻胶（海藻酸钙等）包埋法制备的固定化甲烷氧化细菌的催化性能及其在生物反应器中的反应，结果表明，在进行甲烷制甲醇的反应中、活性炭吸附制备的固定化细胞的操作稳定性最好，但其初始酶活性与休止游离细胞相比损失了６０％￣８０％，海藻酸钙包埋的固定化细胞初始酶活性高（与游离细胞相比，可保持５５％￣９０％的酶活性），但反应中甲醇累积速度很低，而双重介质（     

α—胰凝乳蛋白酶的固定化及其对DL—苯丙氨酸的光学拆分

以氨丙基多孔球为载体，戊二醛为交联剂制得固定化α－胰凝乳蛋白酶。其含酶量为３．６ｍｇ／ｇ，米氏常数Ｋｍ＝１．２×１０＾－３ｍｏｌ／Ｌ，最适宜温度为３５℃，ｐＨ值为７．０，对热、酸碱、甲醇以及尿素的稳定性有较大提高，Ｃａ＾２＋激活效应明显。用该固定化酶连续拆分ＤＬ－苯丙氨酸制备Ｌ－苯丙氨酸时，拆分产率高于９０％，产品纯度超过９６％；连续使用２个月后仍能保持较高酶活力。     

甲醛活化壳聚糖制备固定化l—天冬酰胺酶

研究了以甲醛活化的壳聚糖为载体固定化ｌ－天冬酰胺酶，其活力回收可达到１１３％，比用以戊二醛为交联剂进行固定化的活力回收要高出五倍多。分别从缓冲液的ｐＨ值及甲醛用量等方面进行了固定化ｌ－天冬酰胺酶的条件优化，并且对固定化酶的性质作了探讨。     

MethylomonasZ201细胞在戊二醛活化DEAE—纤维素上的共价固定化

以戊二醛活化的ＤＥＡＥ－纤维素为载体，采用共价键法固定化ＭｅｔｈｙｌｏｍｏｎａｓＺ２０１细胞，固定化细胞催化丙烯环氧化的最优细胞／载体比为３２ｍｇ干重细胞，最适ＰＨ值达温度分别为７．８和３５℃，用纯氧代替空气作为氧源，分别使游离和固定化细胞的ＭＭＯ活性提高了８％和３５％，外泊性电子给体甲酸钠对固定化细胞ＭＭＯ活性的激发作用小于游离细胞，失活动力学分析结果表明，固定化细胞的稳定性高于游离细胞。     

α－葡萄糖基甜菊糖的酶促合成反应（Ⅱ）

研究了以球形纤维素弱阴离子交换剂作载体，固定化葡萄糖基转移酶ＧＴ－１转化甜菊糖为α－葡萄糖基甜菊糖反应的各种影响因素。结果表明，甜菊糖的酶促转化到达一定程度后，继续增大酶用量及淀粉用量，对转化结果没有太多改善，固定化酶重复使用８次，活力下降较少，说明固定化效果良好。     

水凝胶的制备及应用

本文回顾了“普通”和“环境敏感”水凝胶的制备方法及其作为生物材料在固定化酶、固定化细胞、免疫测试和药物控制释放等领域的应用。     

地衣杆菌α-淀粉酶基因在酿酒酵母中的表达

利用酵母MF-α1因子的启动子和信号序列构建载体并将缺失了启动子和信号序列的地衣杆菌α-淀粉酶基因重组进该载体上信号序列的下游,组建含α-淀粉酶基因的表达载体,经校正读码框架后实现α-淀粉酶基因在酿酒酵母中的表达和产物的分泌;比较了酵母分泌的酶与在枯草杆菌中表达产生的酶的某些性质;讨论了基因表达和分泌的机制。     

聚丙烯酰胺固定化糖化酶特性的研究

本研究以丙烯酰胺单体通过反向悬浮聚合技术合成聚丙烯酰胺作为载体材料，采用包埋—交联法固定化葡萄糖淀粉酶，并对其特性进行了研究．结果表明，该固定化酶最适pH值为5．0，最适温度为55～58℃，而且具有较好的贮存稳定性和操作稳定性，8个月后该固定化酶的残余活力仍保持在94％左右，可重复使用43批次，此固定化酶酶活回收率达到56％．实验表明丙烯酰胺悬浮聚合固定化糖化酶的方法是简便可行的．     

丙烯气相一步氧化制环氧丙烷用Ag-Mo催化剂的研究

 用浸渍法和溶胶－凝胶法制备了一系列以银及氧化钼为活性组分，负载于不同载体上的催化剂．在以分子氧为氧化剂，且原料气中不添加任何抑制剂的情况下，采用微反－色谱联合装置考察了催化剂对丙烯气相一步氧化制环氧丙烷的催化性能．结果表明，载体和助剂对催化剂上丙烯环氧化性能产生明显的影响．以TiO2－ZrO2为载体，CsNO3－NaCl为助剂的Ag－MoO3催化剂具有较好的催化性能，在400℃下，氧的转化率和环氧丙烷的选择性可分别达到11．3％和34．8％；在450℃下，氧的转化率和环氧丙烷的选择性可分别提高到33．0％和35．3％．采用溶胶－凝胶法制备的MoO3／SiO2催化剂对丙烯气相一步环氧化反应也具有一定的催化活性．