反相高效液相色谱负峰测定法研究以及酮类的测定

研究了反相液相色谱中负峰现象及产生的原理,应用计量置换作用原理解释了样品在色谱柱中的计量置换保留行为;应用负峰法测试了甲基脂肪酮各组分的含量.本研究采用Agilent C18色谱柱(150 mm×4.6 mm, 5 μm), 流动相为V(甲醇)∶ V(水, 含0.01 mmol/L磺基水杨酸)=60∶ 40, 紫外检测器(λsig=310 nm, λref=275 nm). 本方法简便,线性相关系数r均大于0.9993; 甲基酮的定量下限为0.041 μg; 相对标准偏差为0.52%～0.80%.     

反相高效液相色谱紫外检测法测定季戊四醇

季戊四醇是一种工业用途比较广泛的有机化工产品,主要用于涂料工业。在生产季戊四醇的过程中,往往伴随着二季戊四醇副产物的生成,即使在季戊四醇最终产品中,也含有一定量的二季戊四醇。目前尚缺乏完善的方法对二者进行同时测定。中华人民共和国国家标准推荐工业用季戊四醇含量的测定方法为重量法(GB／T7815-1995),虽然此法准确度高,但比较繁琐费时,并且只适合于单季戊四醇含量的测定。     

用反相液相色谱分离多肽时峰容量与色谱柱长度关系的研究

在蛋白质组学研究中,多肽混合物的有效分离对蛋白质鉴定和蛋白质之间相互作用的研究起着决定性的影响。基于此,用反相液相色谱研究了在两个不同长度的色谱柱上分离多肽混合物时色谱柱长度与峰容量的关系,同时考察了梯度洗脱时间对峰容量和峰宽的影响。实验结果表明,色谱柱长度对峰容量有显著的影响,而延长梯度洗脱时间不仅可以增加峰容量,而且可以增加峰宽。这说明用毛细管液相色谱 串联质谱联用方法对多肽混合物进行分离鉴定时,采用较长的色谱柱和较长的梯度洗脱时间有利于对更多的多肽进行分析鉴定。     

反相高效液相色谱分离黄酮类化合物的研究

根据18种黄酮类化合物在C_3、C_(18)和CN三种固定相上的梯度洗脱反相高效液相色谱分离的研究,建立了一种连续快速分离植物提取物中黄酮类化合物的方法。此法可在55 min内完成一个样品的分离及柱平衡。最佳波长和温度分别是280nm和35℃。     

反相高效液相色谱与紫外光谱对硝基苯类化合物的联合定性

结合高效液相色谱和紫外光谱各自的优点和信息，建立了有机化合物的高效液相色谱和紫外光谱联合定性方法。在高效液相色谱中，二极管阵列检测器实时在线地提供样品组分的紫外光谱，由此建立紫外光谱谱图库，并发展了谱图库检索算法，同时测定了硝基苯类化合物的反相色谱用热力学参数ａ、ｃ值。结果表明，该法是可行的，满足定性所需的精度。     

亚氨基二乙酸的高效液相色谱测定

利用高效液相色谱，采用外标法测定样品中亚氨基二乙酸的含量，紫外检测器检测波长为210nm，色谱柱为SAX强阴离子交换柱，用0．005mol.L^-1磷酸二氢钾缓冲液（PH2．5）为流动相，对样品进行分析，其线性相关系数为0．9996，标准偏差为0．035，回收率为98．5％－101．5％。     

多肽和蛋白质的反相高效液相色谱研究--色谱行为的多样性

以Ｃ８柱为固定相,研究了微管结合蛋白２中两段重要肽段（肽１,肽２）和猪胰岛素在反相色谱上的保留行为。当以甲醇溶液为流动相时,猪胰岛素保留因子的对数值（ｌｎＫ’）随流动相有机溶剂体积分数（ψ）的变化呈现很好的线性关系。当以乙腈为流动相测定肽１的ｌｎＫ’随ψ变化关系时,所得结果显示ｉｎＫ’与ψ呈现良好的二次曲线关系。以乙腈为流动相测定肽１和肽２和Ｖａｎ’ｔ Ｈｏｆｆ曲线（ｌｎｋ’与１／Ｔ的关系图）时,     

反相高效液相法测定四环素类抗生素

 利用高效液相法 ,在C18柱上以甲醇 乙腈 0 0 1mol/L草酸溶液 (pH 2 0 ) (体积比为 11∶2 2∶6 7)为流动相 ,采用 2 6 7nm紫外光进行检测 ,在 2 2min内将 7种四环素类抗生素全部洗脱并达到基线分离。探讨了流动相的pH值、草酸的浓度、流动相中有机相的比例以及检测波长等因素对分离度和灵敏度的影响。采用标准加入法定量 ,对两种实际样品进行了分析。结果表明 :该方法操作简单、灵敏度高、定量准确。     

反相高效液相色谱二极管阵列检测器对戊四硝酯粉质量的研究

建立了戊四硝酯粉含量及有关物质的RP-HPLC测定法。采用ODS色谱柱,甲醇/水(70∶30)为流动相,使戊四硝酯与有关物质基线分离,二极管阵列检测器检测波长206nm。本方法操作简便,重现性好。     

植物激素的反相高效液相色谱法分离和测定

探讨了分离和测定８种植物生长激素的反相高效液相色谱法。结果表明：以含有０．８％醋酸的甲醇和水作为流动相,采用梯度洗脱,可在１６ｍｉｎ内将８种物质完全分离并可进行定量测定,线性关系良好。方法具有快速、简便、准确的特点。     

反相高效液相色谱法分离蛋白质的研究

采用反相高效液相色谱法考察了几种大孔硅胶烷基键合固定相在等度淋洗条件下进行蛋白质分离的色谱性能。研究了冲洗剂中有机溶剂异丙醇的浓度、离子对酸（ＴＦＡ）浓度对蛋白质保留时间的影响。探讨了蛋白质在ＲＰ－ＨＰＬＣ中的保留机理。结果表明,大孔硅胶（２０～３０ｎｍ）短链（Ｃ４和Ｃ８）烷基键合固定相适合蛋白质的分离。     

γ-干扰素在反相高效液相色谱柱上色谱行为与分离的研究

用高效液相色谱法对基因工程下游包涵体所含目标蛋白进行分离纯化,较系统地研究了γ－干扰素在反相柱上的色谱行为及其影响因素。结果表明,复性后γ－干扰素伴有错配聚合体产生,其保留行为及洗脱谱图随构象不同而改变。分离系统的疏水性和粘度是影响γ－干扰素在固定相与流动相间传质扩散的重要因素。     

反相高效液相色谱法分离重组促红细胞生成素

利用反相高效液相色谱法对重组促红细胞生成素进行了纯化。结果表明,利用Ｃ４反相柱和乙腈－三氟乙酸流动相在洗脱梯度和上样样品纯度等条件都较适当时,可以简单、快速、高效地从粗品中分离出重组促红细胞生成素,获得的产品纯度高,接近１００％;比活性好,约为１．９６×１０８ＩＵ／ｇ蛋白。     

反相高效液相色谱法快速测定复合甜味剂中Aspartam

利用反相高效液相色谱法快速测定各种复合甜味剂中Ａｓｐａｒｔａｍ,用ＯＤＳ短柱（ＵｌｔｒａｓｐｈｅｒｅＸＬ－ＯＤＳ,３μｍ,４．６ｍｍｉ．ｄ．×７．０ｃｍ）,以ＣＨ３ＯＨ－０．０２ｍｏｌ／ＬＮＨ４Ａｃ为流动相进行分离,紫外检测器２２０ｎｍ检测,根据色谱保留时间结合对组分不停泵紫外光谱扫描进行定性,用外标法峰高定量,方法最小检出浓度为５μｇ／Ｌ,标准曲线在４０～２００ｍｇ／Ｌ浓度范围内呈线性,相关系数在０．９９９以上,平均添加回收率为９２％,其它复合组分不干扰测定。方法简便、快速、灵敏,非常适合于日常监督检测。     

反相离子对色谱/蒸发光散射检测器分离唑来膦酸及其有关物质

采用反相离子对高效液相色谱／蒸发光散射检测法研究了唑来膦酸及其有关物质的色谱分析与分离方法。优化了色谱条件，固定相为Hypersil C8柱，以含10 mmol／L正戊胺的5mmol／L乙酸铵缓冲液（用乙酸调节pH至7．0）-甲醇（体积比为97：3）为流动相，流速为1．0mL/min，蒸发光散射检测器检测。在该色谱条件下，唑来膦酸与其有关化合物（包括合成过程中残余的原料咪唑乙酸及分解产物亚磷酸、磷酸盐）的分离良好，唑来膦酸色谱峰与最近杂质峰的分离度大于1．5。本法简便快速，为唑来膦酸的常规分析提供了有效可靠的方法。     

反相高效液相色谱法用于葛根黄酮提取物的分离与主要活性成分的测定

采用反相高效液相色谱法，在C18柱上以甲酵—水为流动相进行梯度洗脱，在0-10min内将葛根黄酮提取物进行分离，并在250nm检测，采用标准加入法对实际样品中的葛根素含量进行了分析。结果表明：平均回收率为94.8％，RSD为2．4％。     

聚合物涂敷反相高效液相色谱固定相

对聚合物涂敷反相高效液相色谱固定相的制备及其特性进行了综述。根据制备方法对固定相进行了分类,并指出该类固定相对色谱峰拖尾现象的改善引人注目,且就涂敷物对基质孔径及色谱性能的影响进行了讨论。另外,对该类固定相的稳定性进行了阐述。     

反相高效液相色谱法同时测定桑叶提取物中芸香甙和槲皮素的含量

用Ｐ１００型高效液相色谱系统、ＤＬ－８００色谱工作站、ＹＷＧ－Ｃ１８色谱柱,以甲醇－水－磷酸体系（６０∶４０∶０．４,Ｖ／Ｖ／Ｖ）为流动相分离并同时测定了桑叶提取物中芸香甙与槲皮素的含量。芸香甙、槲皮素含量与峰面积呈良好的线性关系。芸香甙的变异系数为１．９８％,回收率为１０４．０％;槲皮素的变异系数为９．８％,回收率为１０３．２％。     

反相高效液相色谱法检测鲫鱼肌肉中伊维菌素

以鲫鱼肌肉为材料,建立了一种简便、准确的反相高效液相色谱法,用于鱼肉中伊维菌素的药物残留检测和药代动力学研究.鲫鱼肌肉中的伊维菌素用乙酸乙酯提取,离心后的上清液于45 ℃下氮气吹干,残渣用甲醇-水(4∶ 1,V/V)混合液溶解,正己烷去脂,离心后取下清液,进样20 μL进行HPLC分析.本方法考察了提取剂、柱温和流动相的影响,确定了以乙酸乙酯为提取剂,柱温25 ℃和甲醇-水(90∶ 10,V/V)为流动相的优化条件.方法线性范围为0.025～2.50 μg/g,相关系数r=0.9997,检出限为11 ng/g.批内RSD为1.0%～5.8%,日间RSD为1.0%～7.7%,相对回收率(99.8±4.1)%, 绝对回收率为(95.9±3.9)%.本方法具有操作简便,结果准确可靠的特点.