多肽及蛋白质的化学合成研究

多肽与蛋白质作为生物体内的活性物质和生命活动的物质基础,在信号传递、能量利用、免疫应答等基础生理过程发挥着至关重要的作用,并与多种疾病的发生密切相关。获得一定数量高纯度的多肽和蛋白质是研究其结构、生物学功能以及开发相关药物的重要前提。天然多肽与蛋白质的来源主要有动植物的组织器官、微生物的次级代谢产物等。目前,自然提取、重组技术和化学合成是多肽与蛋白质的主要获得途径。相较于从天然产物中提取分离和基因重组表达,化学合成能够方便地在多肽与蛋白质的任意位点引入非天然氨基酸或特定类型的翻译后修饰基团,如糖基化、磷酸化、荧光团及光交联反应基团等,极大地促进了多肽与蛋白质在基础医学及生物医药研究领域的应用发展。本综述全面介绍了多肽与蛋白质的各种化学合成研究策略,并讨论了这些策略的基本原理、优缺点及应用价值,旨在为多肽及蛋白质的合成研究提供参考。     

Rink Amide树脂结构对多肽合成的影响研究

研究了Rink Amide树脂取代度、溶胀度及肽链的长度不同对肽合成收率的影响,并对影响Rink Amide树脂溶胀度的因素进行了研究,结果表明,合成长肽时低取代度、高溶胀度的Rink Amide树脂能获得较好的肽收率。     

电化学检测磷酸化多肽的研究

建立了一种非探针标记型磷酸化多肽的电化学检测方法,该方法以N,N-二(羧甲基)-L-赖氨酸(Lys-NTA)和Fe3+修饰的金电极作为磷酸化多肽的捕获和传感界面,利用磷酸化多肽能够与之形成金属离子螯合物而发生特异性结合并引起电极表面修饰层通透性改变等特点,采用铁氰化钾作为电化学指示剂,用循环伏安法和交流阻抗法对磷酸化多...     

O-磷酸酰化多肽及其类似物的化学合成

O-磷酸酰化多肽及类似物对研究和阐明蛋白质可逆磷酸化对生命活动的调节机制具有极其重要的作用,本文总结了近年来发展起来的用现代化学方法合成O-磷酸酰化多肽及类似物的有效策略,如总体磷酸化法、磷酸化单体法等,并概述了常用的磷酸化方法及磷肽类似物的合成方法等。     

多肽固相合成中茚三酮定量监测法的改进

在多肽的固相合成过程中,定量监测 N~α-保护基脱除反应后自由氨基和成肽反应后残余氨基的含量,以保证这两步反应进行完全是十分必要的。为此目的,已发展了多种方法,例如     

磷酸化血管紧张素Ⅱ的合成及性质

蛋白质磷酸化和去磷酸化几乎调节着生命活动的所有过程，包括细胞的增殖发育和分化、神经活动、肌肉收缩、新陈代谢和肿瘤发生等［1]，而磷肽则是体现其母体蛋白磷酸化过程结构变化的最好模型［2]．磷肽合成的常用方法是将合成好的未被磷酸化的多肽与ATP在磷酸激酶的作用下进行酶法磷酸化，但是该法对于不能被磷酸激酶磷酸化的多肽并不适用．迄今为止，磷肽及其类似物的化学合成仍非轻而易举之事［3，4]     

Fmoc保护氨基酸与Wang树脂的缩合反应

研究了保护氨基酸、Wang 树脂取代度、树脂粒度、搅拌方式对Fmoc-氨基酸-Wang树脂连接效率的影响. 结果表明, 保护氨基酸分子量的大小会因产生不同的位阻而影响缩合反应的效率, 分子量越小缩合效率越高; Wang树脂的取代度较高时, 已缩合的氨基酸给后续保护氨基酸的缩合形成阻碍, 使缩合效率降低; 粒径较小和搅拌较好时, 对保护氨基酸的粒内外扩散有利, 可提高反应速度和缩合效率.     

蜈蚣毒素多肽RhTx的高效化学合成及复性折叠研究

二硫键的氧化折叠是合成二硫键构象锁定多肽的关键步骤.前人发展的二硫键氧化折叠策略主要有一次氧化折叠、多次氧化折叠和一锅法氧化折叠.目前对三种策略复性效率和收率等的比较性研究较少.分别采用三种氧化折叠策略制备目标蜈蚣毒素多肽RhTx.结果 表明,两次氧化折叠策略的分离收率高于一次和一锅法氧化折叠策略,一锅法氧化折叠策略可...     

多肽固相合成中反相高效液相色谱的若干应用

多肽化学合成技术的发展,特别是多肽自动合成仪的出现大大加快了合成速度,这无疑也大大加快了其结构与功能关系研究的进程。但是直接由固相合成树脂上获得的产物往往混有部分缺失肽等杂质,结构各异的各种肽段对脱保护等条件的要求也不尽相同,因此在多肽合成工作中高效液相色谱已成为一项必不可少的配套技术。 本文介绍在本实验室利用反相高效液相色谱(RP-HPLC)配合多肽自动合成工作的部分结果。     

蝎子毒素多肽WaTx的高效化学合成及氧化折叠研究

相比于1-羟基-7-氮杂苯并三氮唑(HOAt)、1-羟基苯并三唑(HOBt)等传统偶联试剂, 新型多肽偶联试剂2-肟氰乙酸乙酯(Oxyma)具有安全、偶联效率高、消旋率低等优势, 在多肽合成特别是微波固相合成中得到广泛应用. 但是, 不同反应温度(例如28、50和75 ℃)对N,N'-二异丙基碳二亚胺(DIC)/Oxyma的偶联效率以及对甲硫氨酸(Met)等易氧化氨基酸的影响尚有待研究. 瞬时受体电位锚蛋白1(TRPA1)通道在感受温度、听觉和炎症痛中发挥重要作用. 蝎子毒素多肽芥末受体毒素(WaTx)是一种新型、非共价结合的TRPA1特异性激动剂. 本研究利用6-氯苯并三氮唑-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸酯(HCTU)/N,N'-二异丙基乙胺(DIEA)和DIC/Oxyma缩合体系, 首次探索了不同温度下线性WaTx的合成效率以及Met残基的氧化情况. 通过一次氧化折叠和两次氧化折叠策略, 实现了WaTx的体外快速复性折叠, 利用圆二色谱和钙荧光检测等技术评价WaTx的结构和活性. 本研究建立了WaTx的温和、高效合成以及复性折叠方法, 为固相多肽合成特别是手动固相合成WaTx等含有易氧化基团的二硫键构象锁定多肽提供了重要参考.     

糖肽的固相合成

目前糖肽的固相合成可以分为两种策略：构建单元策略和固相糖基化策略。本文对O-连接和N-连接糖肽固相合成的研究进展进行了综述。     

Nitrogen-Containing Six-Membered Heterocycles: Solid-Phase Synthesis

Solid-phase organic synthesis is a rapidly expanding area of synthetic chemistry that is being widely exploited in the search for new medicinally important compounds using combinatorial techniques. In recent decades, a large number of reports related to solid-phase synthesis of heterocycles have appeared because of the wide variety of their biological activity. In this review, we report the important role of solid-phase synthesis in the synthesis of nitrogen containing six-membered ring heterocycles.     

Solid-Phase Synthesis of Nitrogen-Containing Five-Membered Heterocycles

In recent decades, a large number of reports related to solid-phase synthesis of heterocycles have appeared, owing to the wide variety of their biological activity. This review introduces the key concepts of solid-phase methodology and combinatorial synthesis with particular focus on the important role of solid-phase synthesis in the synthesis of nitrogen-containing five-membered ring heterocycles.     

Solid-Phase Synthesis of N-Aryl Succinimides

A new method upon adopting a solid-phase strategy for synthesis of N-aryl succinimides is described here, using the silica-bound benzoyl chloride (SBBC) as dehydrating agent in reaction with N-arylsuccinamic acids. The main advantage of this method is the recyclability of SBBC.     

固相有机合成中的连接基团

介绍了固相有机合成中的连接基团,特别是带有隔离单元的连接基团、无痕迹连接基团、安全拉手型连接基团和复合型连接基团的基本概念、发展近况以及它们的应用.     

取代的丙烯酸乙酯的固相合成研究

近十多年来,利用聚合物试剂进行非序列性的固相普通有机台成已有诸多报道。固相合成法的突出特点是操作简单,分离容易,由于高分子效应,所以常常可以使反应条件温和或者使反应具有较高的选择性。     

自组装多功能反应器固相合成依非巴特

采用集反应、搅拌、鼓泡、N2气保护和过滤五重功能的自组装反应器,研究了树脂种类、溶剂、缩合试剂和反应时间对环肽依非巴特产率的影响。结果表明,以Rink Amide AM树脂为固相载体,HBTU/HOBt/DIEA为肽键缩合剂,DMF为溶剂,反应2 h,粗肽得率高达86.6%,经液相色谱纯化后纯度达98%以上。     

FTIR分析在固相有机合成中的应用

综述了近几年来透射、漫反射、衰减全反射、光声及显微红外光谱技术在固相有机合成中的应用研究进展,对它们各自在定性、定量研究固相有机合成中的特点进行了比较.