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相似文献
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1.
荧光法研究秋水仙碱和牛血清白蛋白的相互结合作用   总被引:25,自引:2,他引:25  
用荧光光谱法、分光光度法研究了水溶液中秋水仙碱与牛血清白蛋白 (BSA)的相互结合反应。研究表明 :二者以摩尔比 1∶1牢固结合 ,其平衡常数K0 =1.92× 10 5L/mol。根据F rster非辐射能量转移机理 ,求算了给体 (BSA)与受体 (秋水仙碱 )间距离r =3.6 3nm和能量转移效率E =0 .17。实验表明 :秋水仙碱与牛血清白蛋白的相互结合作用为单一的荧光静态猝灭过程  相似文献   

2.
用荧光光度法及吸光光度法研究了在PH 7.0的三(羟甲基)氨基甲烷-HCl缓冲溶液中靛蓝二磺酸钠(IDGS)与牛血清白蛋白(BSA)的相互结合反应.根据福斯特无辐射能量转移机理,求算了靛蓝二磺酸钠与牛血清白蛋白给体-受体间距离为3.63 nm,能量转移效率为0.44,临界能量距离为2.44 nm.靛蓝二磺酸钠与牛血清白蛋白的相互结合作用为静态和动态猝灭过程,其作用机制为能量转移机制.  相似文献   

3.
各种离子对血卟啉与牛血清白蛋白相互结合反应的影响研究   总被引:68,自引:3,他引:68  
应用荧光法研究了水溶液体系中血卟啉与牛血清白蛋白分了间相互结合反应,其结合常数KA=2.2×10^4,结合位置数为1.依据Forster非辐射能量转移机理,探讨了血卟啉与牛血清白蛋白相互结合时,其给体-受体间距离和能量转移效率,进一步研究了各种离子与牛血清白蛋白的结合反应,其结合淬灭能力大小顺序为Cr(Ⅵ)〉Fe^3+〉Cu^2+〉NO2〉Br^-,并探讨不同阴,阳离子及血卟啉与牛血清白蛋白间相互  相似文献   

4.
牛血清白蛋白偶氮胂Ⅲ—镱(Ⅲ)结合反应及其应用   总被引:4,自引:0,他引:4  
俞英  黄发德等 《分析化学》2001,29(10):1205-1208
研究了在酸性溶液中BSA与偶氮胂Ⅲ-镱(Ⅲ)络合物的结合反应。发现加入BSA后偶氮胂Ⅲ-镱(Ⅲ)的吸收光谱产生减色效应和红移,探讨了实验条件对结合反应的影响。随着BSA量的增加,650nm吸收峰线性下降,基于此建立了蛋白质定量分析方法,并运用于实际样品的测定,结果与紫外分光光度法测得的结果吻合。用分光光度法研究BSA与偶氮胂Ⅲ-镱(Ⅲ)之间的结合模型,发现结合反应符合Scatchard模型。进一步的研究发现BSA与阳离子表面活性剂、偶氮胂Ⅲ-镱(Ⅲ)这间的作用机理相类似。  相似文献   

5.
偶氮砷Ⅲ与牛血清白蛋白作用的分光光度研究   总被引:16,自引:4,他引:16  
李娜  李克安 《分析化学》1996,24(1):10-14
本文研究了溶液基本条件如酸度和离子强度等对偶氮砷Ⅲ-牛血清白蛋白分子复合物形成的影响,在ph2.0条件下,标准工作曲线的线性范围为0~60ng/L,桑德尼灵敏度为0.15μg/cm^2。采用平衡透析法,双波长法及摩尔比法测定了pH2.0时牛血清白蛋白对偶氮胂Ⅲ的最大结合数。结果表明有两类结合,第一类结合的最大结合数为30~40结合常数约10^6mol^-1L。  相似文献   

6.
溴甲酚绿与血清白蛋白的结合反应   总被引:40,自引:4,他引:40  
魏永巨  李克安 《分析化学》1996,24(4):387-391
用分光光度法研究了溴甲酚绿(BCG)与牛血清白蛋白(BSA)在酸性溶液中的结合反应。认为BCG与BSA主要由于静电引力而结合,疏水作用力对结合反应也有影响。讨论了反应过程中的平衡关系,推导了求算表观结合常数,最大结合数及摩尔吸光系数的线性回归公式,考察了影响染色反应灵敏度的因素,发现溶液酸度、离子强度对染色反应有显著影响。  相似文献   

7.
埃铬青R与牛血清白蛋白的结合反应   总被引:15,自引:0,他引:15  
魏永巨  李克安 《分析化学》1996,24(10):1175-1177
在PH2.4含0.5%NaCl的溶液中,牛血清白蛋白与埃铬青R(ECR)发生相互作用而导致溶颜色发生变化。测得这一反应的表观结合常数为5.2×10^5;最大结合数为38;桑德尔灵敏度指数为0.75μg/cm^2.  相似文献   

8.
用荧光光度法研究了降血压药物多沙唑嗪与血清白蛋白的相互作用,救 是不同温度下药物与血清白蛋白相互作用的形成常数;讨论了微量金属离子对药物与血清白蛋白形成常数的影响,并根据热力学常数确定了该药物与血清白蛋白之间的作用力类型为疏水作用力;研究了多沙唑嗪的适宜条件并成功应用于血样中含量的测定。  相似文献   

9.
用荧光光谱法、紫外-可见分光光度法研究了水溶液中罗红霉素、阿奇霉素与牛血清白蛋白(BSA)的相互结合反应,表明两者以摩尔比1:1结合,结合常数分别为K=3.6×104L·mol-1,K=7.2×104L·mol-1.根据Forster无辐射能量转移理论,求算了牛血清白蛋白与罗红霉素、阿奇霉素给体-受体间作用距离分别为0.49,1.58 nm,能量转移效率E分别为0.738,0.779.罗红霉素或阿奇霉素对牛血清白蛋白荧光猝灭为由于两者之间的结合反应而引起的静态猝灭过程.  相似文献   

10.
人血清白蛋白和牛血清白蛋白荧光量子产率的测量   总被引:12,自引:0,他引:12  
以L-色氨酸荧光量子产率0.14为标准,测量了人血清白蛋白和牛血清白蛋白水溶液在不同激发波长下的荧光量子产率。在pH6.4和25℃条件下,人血清白蛋白和牛血清白蛋白在最大激发波长280nm的荧光量子产率分别为0.132和0.130。实验发现,pH对蛋白质荧光强度有明显影响,溶解氧对荧光量子产率基本没有影响。  相似文献   

11.
在模拟人体生理环境下,用荧光分光光度法及紫外-可见分光光度法研究了解热镇痛药对乙酰氨基酚(简写作PTL)与牛血清蛋白(BSA)之间的相互反应.试验结果发现:由于非辐射能量转移引起的荧光猝灭,BSA的荧光强度因与PTL相互之间的结合反应而明显降低.按Stern Volmet方程和Lineweaver-Burk方程对所得实际数据进行了处理,求得此结合反应的静态平衡常数(KLB)为2.592×103 mol·L-1(297 K),其结合位置距212位色氨酸1.94 nm.根据结合反应的热力学参数,推断PTL与BSA之间的结合力为疏水作用力.  相似文献   

12.
通过紫外-可见光谱、荧光光谱、同步荧光光谱、圆二色谱、衰减全反射红外光谱、负染-透射电镜、等温滴定微量热等实验方法系统地探讨了咪唑型离子液体与牛血清蛋白(BSA)的缔合特性.结果发现,离子液体[Bmim]Cl的加入使得BSA的紫外吸收强度增加,同时也会导致其荧光猝灭,并且这种猝灭是静态猝灭.同步荧光的研究结果表明,[Bmim]Cl分子可与蛋白质中接近色氨酸残基的区域发生相互作用,使蛋白质的构象和内部的疏水结构发生改变;负染色法透射电镜直观地显示了加入离子液体后形成的蛋白质-离子液体复合物结构逐渐变大;圆二色谱和衰减全反射红外光谱表明:在离子液体与BSA缔合过程中,离子液体的加入使得BSA二级结构中的α-螺旋和β-折叠的含量降低,从而引起蛋白质二级结构的变化;表面张力法和等温滴定微量热法进一步证实上述缔合作用为静电作用和疏水作用共同作用的结果,但离子液体的烷基链与BSA疏水内腔之间的疏水作用是离子液体与BSA缔合的主要驱动力.  相似文献   

13.
利用荧光技术研究了在人体生理酸度条件下,苏丹Ⅰ与牛血清白蛋白相互作用,发现苏丹Ⅰ对牛血清白蛋白有较强的荧光猝灭作用,用Stern-Volmer和Line Weaver-Burk方程处理荧光猝灭数据,得到了反应的结合常数、结合热力学性质和结合位点等参数。根据热力学常数确定了该药物与血清白蛋白之间的作用力类型,在此基础上依据F rster非辐射能量转移机理探讨了苏丹Ⅰ与BSA相互结合时其供体-受体间的距离。  相似文献   

14.
荧光素与牛血清蛋白的作用及其分析应用   总被引:2,自引:0,他引:2  
宋功武  方光荣  詹红菊  陈冬 《分析化学》2000,28(12):1565-1565
1引言根据染料与蛋白质的相互作用建立测定蛋白质的分析方法已有不少报道,但寻找简便、快速、准确的测定蛋白质的分析方法仍然是人们研究的热点。生物大分子与小分子配体相互作用的研究,目前多用透析,超滤或凝胶色谱等实验方法。当小分子配体与生物大分子结合前后的吸收光谱有一定差别时,用光度法在不经分离的情况下进行研究比上述方法要简便得多,且实验得信息较为可靠。本文正是利用荧光素与BSA相互作用形成复合物最大吸收峰的波长480nm,比试剂本身红移约9nm,提出的分析方法,线性范围宽,灵敏度高,方法简便、快速,干…  相似文献   

15.
荷花碱与牛血清白蛋白的相互作用   总被引:5,自引:0,他引:5  
利用多种光谱技术研究了在pH7.40的Tris-HCl缓冲体系下,荷花碱与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用。研究发现荷花碱对牛血清白蛋白有较强的荧光猝灭作用且为静态猝灭。用Stern-Volmer和Line weaver-Burk方程处理荧光猝灭数据,得到反应的结合常数在293K时为1.70×104L/mol,结合的ΔH°=-20.2kJ/mol,ΔS°=12.0J/(K.mol)。该药物与血清白蛋白之间的作用力为疏水作用和静电作用。根据Frster非辐射能量转移理论求得荷花碱与BSA相互结合时,其供体-受体间的距离为2.59nm。用圆二色谱等手段表明结合对蛋白的构象产生了影响。同时考察了中药活性成分甘草次酸和脂肪酸对结合的影响。  相似文献   

16.
Three independent techniques have been used to investigate the interaction between bovine serum albumin (BSA) and xanthoxylin (XT). UV-Vis absorption spectroscopy measurements showed that there is a XT-BSA complex formed with an overall binding constant of K=1.01×105 L⋅mol−1. Spectroscopic techniques including synchronous fluorescence and Fourier transform infrared (FT-IR) were used to assess the structural effects of XT binding on BSA. The FT-IR experiments showed that there is a decrease of the amount of α-helix from 50.2 to 48.1% and an increase of the β-sheet from 32.9 to 36.9% in the XT-BSA complex. In addition, XT binds to site I of the protein with a distance of 2.07 nm between tryptophan residues and XT.  相似文献   

17.
利用荧光光谱、紫外-可见吸收光谱、圆二色谱、分子模拟等方法,在近似生理条件下,以牛血清白蛋白(BSA)为模式蛋白质,研究了桑色素(Morin)和血清白蛋白相互作用的热力学行为及其特征。荧光光谱结果表明:Morin能有效猝灭BSA的内源荧光,猝灭机制为静态猝灭;通过van’t Hoff方程,获取了BSA与Morin结合的热力学参数(?H?、?S?、?G?等),发现Morin与BSA两者之间的相互作用是一个吉布斯自由能降低的自发过程,且氢键和范德华力是二者结合的驱动力。通过分子模拟方法,发现Morin结合在BSA分子亚结构域IIIA的疏水腔内位点II,荧光共振能量转移结果表明Morin和与BSA的两个色氨酸残基的平均距离为3.09nm。圆二色谱结果表明Morin分子的结合会引起BSA分子α-螺旋含量降低。  相似文献   

18.
塞来昔布衍生物是一类应用非常广泛的治疗急慢性炎症的新型非甾体抗炎药。本文综合利用荧光光谱、紫外吸收光谱、圆二色谱和分子模拟等方法,研究了塞来昔布衍生物1-苯磺酰胺-3-羧基-5-苯基吡唑(BCBP)与牛血清白蛋白(BSA)相互作用的热力学行为。荧光光谱和紫外吸收光谱的分析表明:BCBP能有效猝灭BSA的内源荧光,猝灭机制为静态猝灭。通过所获取的相互作用热力学参数,可知两者之间的相互作用是一个吉布斯自由能降低的自发过程,且二者之间的主要作用力为氢键和范德华力。圆二色谱的分析发现BCBP引起BSA的构象发生改变,其α-螺旋含量降低,无规卷曲含量升高。分子对接的结果与实验结果相符。  相似文献   

19.
对硝基苯胺与牛血清白蛋白的相互作用研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
用荧光光谱和质谱研究了对硝基苯胺(PNA)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用.结果表明,对硝基苯胺能与BSA相结合,结合后对硝基苯胺的ESI-MS选择正离子峰明显减弱,并有规律地猝灭BSA的内源荧光,其机理属静态猝灭过程.实验获得了不同温度下,对硝基苯胺与BSA作用的结合常数和热力学参数,根据所得结果可推断对硝基苯胺与BSA的主要作用力为疏水作用力.由Frster非辐射能量转移理论计算得出了对硝基苯胺与BSA结合位置的距离.采用同步荧光研究发现,对硝基苯胺能进入BSA的疏水区,从而对BSA的构象产生一定的影响,这与对硝基苯胺的生物毒性有关.  相似文献   

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