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高等植物根原生质体的分离和培养 总被引:6,自引:0,他引:6
本文由12种植物,其中包括8种豆科植物(绿豆、黑绿豆、大豆、豌豆、木豆、蚕豆、苜蓿和胡卢巴)和4种十字花科植物(油菜、本油菜、甘兰和白芥)的萌发种子的幼根分离得到了根原生质体.根原生质体在培养中表现出活跃的分裂能力.除了在木豆和蚕豆中仅观察到细胞分裂外,其余10种植物的根原生质体均形成了愈伤组织。其中苜蓿根原生质体通过形成胚状体再生了植株,而油菜和甘兰的根原生质体通过愈伤组织诱导成芽也再生了植株,由此证明了根原生质体的全能性.这为那些在分离或培养原生质体方面仍存在困难的植物种提供了另一可供选择的系统.本文还讨论了这一系统的优点以及存在的问题。 相似文献
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从三叶半夏(Pinellia ternata Breit)叶肉原生质体再生植株 总被引:1,自引:0,他引:1
从三叶半夏叶片分离到大量、具活力的叶肉原生质体,采用无机盐、激素、蔗糖浓度不同的液体和固体双层培养基培养。4—7天内原生质体出现第一次分裂,分裂频率为3—8%,3周后形成80—100个细胞的细胞团,转入液体培养基中振荡培养,1月后将形成1—2mm直径的愈伤组织再转入固体分化培养基中,愈伤组织先增殖、生长,3—4周后分化出绿芽和小苗,再1月后,由原生质体再生的半夏小植株已长至6—10cm高。半夏原生质体再生植株的发生途径有器官型和胚状体型两种方式。比较和讨论了悬浮培养、双层培养和组份浓度差液-固体双层培养对原生质体培养的效果。 相似文献
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人工促使烟草和菠菜胚性细胞间染色质穿壁实现植株再生——一项新的细胞工程技术(L.B技术) 总被引:1,自引:0,他引:1
本文采用了一项新的细胞工程技术。它包括亲本胚性细胞团的诱导、分离和纯化;不同亲本胚性细胞的离散、组合、离心增殖培养和细胞间重建联系和联结;活性K~+溶液处理、强化离心穿壁培养促使不同亲本细胞间染色质和细胞质广泛穿壁转移;选择培养系统的建立和再生植株等操作程序。采用这项技术成功地实现了烟草和菠菜胚性细胞间染色质和细胞质的穿壁转移,并再生了植株。遗传学和细胞学研究表明,再生植株具双亲的遗传性状和染色体。这项技术的建立可能发展成为一项新的细胞工程技术,将在理论和实践上给我们带来新的希望和设想。 相似文献
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大豆(Glycine max(L.)Merr.)未成熟子叶组织的体细胞胚胎诱导和植株再生的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
本文利用大豆未成熟子叶作外植体,进行大豆体外培养并诱导体细胞胚胎形成和植株再生的研究。结果表明,高浓度生长素10mg/l NAA或5mg/l 2,4-D是大豆体细胞胚胎形成的先决条件。附加10mg/1 NAA的Murashige和Skoog培养基(简称MS培养基)能够直接在子叶表面诱导体细胞胚的形成,其频率可达85%;附加5mg/l 2,4-D的MS培养基首先诱导未成熟子叶产生胚性愈伤组织,然后产生大量体细胞胚,频率高达94%。我们成功地获得再生的大豆完整小植株15株,消除了大豆基因工程的障碍之一。 相似文献
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采用海藻酸钙包埋法制备固定化细胞,将这种固定化的活细胞培养85h后,测其环氧化活性。催化剂经反应约6h失活,用甲烷/空气=1的混合气培养再生16h,催化剂完全恢复活性,经7次再生后的催化剂活性依然不变。文中还考察了催化剂活性与再生时间的关系,发现当再生时间为6.5h时,催化剂活性最高。用2%的甲醇培养再生16h,催化剂完全失活。用0.5%的甲醇培养基溶液再生30min,其活性可超过新制备的催化剂。还作了甲醛、甲酸钠使整细胞中NADH再生的试验。发现甲烷和空气是使细胞内NADH再生的最好方法。 相似文献
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根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的百脉根(Lotus corniculatus L.)的转化 总被引:1,自引:0,他引:1
本文报道一个简单有效的豆科植物转化再生实验系统。百脉根(品种:里澳)子叶外植体,被含非致瘤性Ti质粒载体的根癌农杆菌感染。该载体带有一个嵌合的npf-Ⅱ基因和一个胭脂碱合成酶基因。在合卡那霉素的选择培养基上,有40%的外植体在3周内出芽。长大的芽可在生根培养基上生根并移栽成活,开花结实。从一个切块得到了16个抗性再生植株。对再生植株的胭脂碱检测、NPT-Ⅱ活性检测及DNA分子杂交实验及种子后代的胭脂碱检测结果表明,外源基因整合到百脉根基因组上,获得表达并能通过有性生殖过程传递。 相似文献
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小麦胚性非再生细胞中游离氨基酸分析 总被引:1,自引:0,他引:1
利用毛细管电泳技术分析了小麦胚性非再生细胞中游离氨基酸的组成与含量。与已经发表的胚性再生细胞游离氨基酸浓度比较发现,两类胚性细胞中游离氨基酸的含量差异明显:在9种可以分开的游离氨基酸中,胚性再生细胞中的游离精氨酸、赖氨酸、谷氨酸和天冬氨酸分别是胚性非再生细胞中的10、3、2和2倍,其它氨基酸的浓度在两类细胞中没有明显的变化。本研究不但为检测植物细胞氨基酸成分提供了方便快捷的方法,而且为进一步探索小麦两类胚性细胞在分子水平上的差异和形成机理提供了生化基础。 相似文献
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《电化学》2015,(1)
植物细胞活性氧爆发在植物的抗病以及信号转导中起着非常重要的作用,植物内活性氧产生及代谢受到复杂而精确的机制调控,从而维持正常的活性氧水平以发挥其生理功能.然而,在单细胞水平开展活性氧爆发实时监测及其调控机制研究一直受到很大的挑战.本文以碳纤维微盘电极(CFMDE)为基底电极,利用Nafion的模板效应,采用电化学沉积法制得纳米铂颗粒修饰电极(NPt/Nafion/CFMDE);同时采用基于聚二甲基硅氧烷(PDMS)的软光刻技术,制备了一种高效固定植物悬浮细胞的琼脂糖阵列微孔芯片.使用NPt/Nafion/CFMDE实时监测了单个拟南芥原生质体活性氧爆发,并证明电化学监测活性氧的主要成分为过氧化氢.在此基础上,采用浅层培养法培养原生质体再生植物细胞壁.电化学监测结果表明,与单个原生质体相比,植物细胞在受到刺激时释放的过氧化氢量显著降低;然而当采用过氧化物酶抑制剂抑制植物细胞壁上过氧化物酶活性后,植物细胞释放过氧化氢量显著回升.研究结果表明,细胞壁在活性氧爆发过程具有很好的调控功能,可望促进植物细胞活性氧爆发及其调控机制的研究. 相似文献
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植物细胞活性氧爆发在植物的抗病以及信号转导中起着非常重要的作用,植物内活性氧产生及代谢受到复杂而精确的机制调控,从而维持正常的活性氧水平以发挥其生理功能. 然而,在单细胞水平开展活性氧爆发实时监测及其调控机制研究一直受到很大的挑战. 本文以碳纤维微盘电极(CFMDE)为基底电极,利用Nafion的模板效应,采用电化学沉积法制得纳米铂颗粒修饰电极(NPt/Nafion/ CFMDE);同时采用基于聚二甲基硅氧烷(PDMS)的软光刻技术,制备了一种高效固定植物悬浮细胞的琼脂糖阵列微孔芯片. 使用NPt/Nafion/CFMDE实时监测了单个拟南芥原生质体活性氧爆发,并证明电化学监测活性氧的主要成分为过氧化氢. 在此基础上,采用浅层培养法培养原生质体再生植物细胞壁. 电化学监测结果表明,与单个原生质体相比,植物细胞在受到刺激时释放的过氧化氢量显著降低;然而当采用过氧化物酶抑制剂抑制植物细胞壁上过氧化物酶活性后,植物细胞释放过氧化氢量显著回升. 研究结果表明细胞壁在活性氧爆发过程具有很好的调控功能,可望促进植物细胞活性氧爆发及其调控机制的研究. 相似文献
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高效抗虫转基因烟草的研究 总被引:21,自引:0,他引:21
苏云金杆菌HD-1的杀虫蛋白基因经5′端改造,3′端进行4种不同长度缺失后插入到含有双增强子的35S启动子,翻译增强子“Ω′”片段的双元载体中,借助土壤农杆菌LBA 4404将在此双元载体上的杀虫蛋白基因及新霉素磷酸转移酶基因(NPTII)转入到生产品种烟草NC89的染色体上,从而获得了抗卡那霉素的转化再生烟草植株。用1—3龄烟青虫对这些转化植株进行大量重复虫试结果表明用4种不同长度B.t.基因转化的再生植株中都有抗虫性高的植株,其中以1.8kb的B.t.Cry IA(c)基因转化的植株杀虫效果最好,这一组转基因植株的平均杀虫率在90—100%的约占该组总虫试植株的50%。对高抗虫性植株的子一代(T1)和子二代(T2)进行遗传分析,分子生物学分析和进一步的抗虫试验表明B.t.基因已遗传到子代并初步选到了高抗虫性的转基因纯合株系D8-14和D19-8等。 相似文献
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球状再生纤维素偕胺肟螯合树脂的制备及其性能研究 总被引:4,自引:0,他引:4
本文采用再生纤维素作基体,通过丙烯腈的加成反应引入氰乙基,再在羟胺的甲醇溶液中作用,获得一种球状再生纤维素偕胺肟螯合树脂。本文详细讨论对这种树脂制备反应的影响因素以及采用正交试验优选反应条件。通过红外光谱分析等实验对树脂的性能进行研究。实验结果表明:以上制备的树脂对某些金属离子具有选择性吸附。 相似文献
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本文按常规方法制备感染有大麦条纹花叶病毒(BSMV)的大麦叶片超薄切片中,很容易观察到薄壁细胞内的BSMV颗粒。但病叶的筛管、导管和胞间连丝中从未观察到该病毒颗粒。未标记免疫酶技术的研究表明:病叶筛管里毫无例外地存在着大量的BSMV蛋白;在幼嫩的木质部和胞间连丝中,也常常能观察到BSMV蛋白;有时成熟的导管中亦充满着BSMV蛋白。这说明在BSMV所侵染的大麦植株中BSMV蛋白与植株内正常的代谢物质一样,经筛管、导管和胞间连丝转移。基于这些结果作者讨论了大麦条纹花叶病毒以核酸的形式在植林内运转的可能性。 相似文献