基于自组装技术制备硫酸链霉素修饰电极及其对DNA的检测

抗生素(antibiotics)又称抗菌素,是由一些微生物合成的、能抑制或杀灭某些病原体的化学物质.由于抗生素对革兰氏阳性菌及革兰氏阴性菌等引起的多种感染有良好的杀灭和抑制作用,被广泛地应用于临床、兽药、农业等方面,但是抗生素在动物性食品中的残留对人体的危害也越来越引起人们的关注,因此对于抗生素检测的研究开发得到迅速发展.硫酸链霉素为氨基酸糖苷类抗生素,临床上主要用于治疗结核病及敏感革兰氏阴性杆菌感染.     

超高效液相色谱-串联质谱法对奶粉中氯霉素残留的检测

氯霉素(chloramphenicol,CAP)是一种广谱抗生素,常用于动物各种传染性疾病的治疗,对多种病原菌有较强的抑制作用.在奶牛生产中,抗生素类药物的使用频率很高,尤其是治疗乳房炎、腹泻等疾病时,常常大剂量反复使用,从而在一段时间内造成奶及奶制品中的残留,形成"有抗奶",对人体造成危害.因此许多国家(包括中国)禁止在奶源动物身上使用氯霉素.     

GC-MS/NCI稳定同位素稀释技术检测动物源性食品中氯霉素的残留量

建立了一种用于各种动物源性食品中氯霉素残留量的气相色谱-负化学离子源质谱(GC-MS/NCI)检测方法。以氘代氯霉素(D5-CAP)为内标物,用乙酸乙酯对各类样品中的氯霉素进行提取,用正己烷和40 g/L NaCl溶液液液分配除脂肪,基质复杂的样品再用Oasi HLB固相萃取柱净化,经硅烷化衍生后由GC-MS/NCI在选择离子监测模式下进行测定。多数样品在0.2,0.5,1.0μg/kg3个添加水平下氯霉素的回收率处于87.8%和107.0%之间,相对标准偏差(RSD)不大于8.5%。方法在2.0~80.0μg/L范围内有良好的线性关系,基质复杂样品中氯霉素残留的检出限达到0.1μg/kg,基质简单样品的检测限可达0.05μg/kg。方法适合各种动物源性食品中氯霉素残留量的确证分析。     

固相萃取/超高效液相色谱-质谱法筛查及检测养鱼河水中抗生素

建立了固相萃取/超高效液相色谱-串联三重四极杆质谱(UPLC-MS/MS)快速检测养鱼河水中4类(喹诺酮类、氯霉素类、四环素类以及磺胺类)15种抗生素的分析方法。取500 m L水样过滤,用盐酸调至p H4.0,加入0.5 g乙二胺四乙酸二钠(Na2EDTA)混匀后,再用HLB固相萃取柱对水样进行富集。利用超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF MS)结合基于UNIFI软件的常用抗生素数据库对养鱼河水中可能存在的抗生素进行快速筛查,筛查结果主要为喹诺酮类、氯霉素类、四环素类、磺胺类4类15种抗生素。为了提高检测结果的准确性,使用UPLC-MS/MS采用分时段多反应监测离子模式(MRM)分析样品中的抗生素,并用外标法定量。15种抗生素的空白基质加标回收率为61.0%~98.4%,相对标准偏差(n=3)为4.6%~14.0%,其线性关系良好,相关系数r≥0.990,检出限为0.01~0.3 ng/L。该方法灵敏度较高,重复性好,可用于对北京养鱼河水中抗生素的检测。     

液相色谱-质谱法同时检测畜禽肉中五种大环内酯类抗生素

大环内酯类抗生素(macrolideantibiotics,MALS)对革兰氏阳性菌和支原体有较强的抑制能力,支原体在畜禽中是感染面较广的多发病,因此这类抗生素在动物药品和饲料添加物中占有重要位置。然而,人们在获得经济利益的同时对抗生素的副作用也有了进一步的认识。欧盟一些国家早已禁止在供肉食动物的饲料中添加抗生素。而我国在这方面还没有严格限制,动物性食品中抗生素残留,将对人类的健康构成潜在的危害,也会直接影响我国的出口贸易。本研究利用液相色谱／电喷雾质谱-质谱法(LC-ESI-MS2),对5种大环内酯类抗生素(红霉素、金霉素、吉他霉素、泰乐菌素、罗红霉素)同时进行正离子二级质谱分析。该方法分析速度快(仅用6min)、灵敏度高、抗干扰性强,检出限红霉素、吉他霉素可达0.3ng,金霉素、泰乐菌素、罗红霉素可达0.6ng。     

毛细管电泳法检测蜂蜜中残留的抗生素

 用毛细管电泳法对 5种常用的抗生素四环素 (TC) ,土霉素 (OTC) ,多西环素 (DOC) ,金霉素 (CTC)和氯霉素 (CP)进行了分离。研究了电泳缓冲液的 pH、不同有机试剂添加剂、温度等因素对抗生素分离的影响。实验结果表明 ,体积分数为 4%的N 甲基吗啡啉的加入可大大改善分离效果。在各自相应的浓度范围内 ,峰面积和样品浓度之间呈现良好的线性关系 ,重现性好。氯霉素的检测极限为 10 μg/L ,四环素、土霉素、多西环素为 2 0 μg/L ,金霉素为 40 μg/L(信噪比 >5 )。该方法成功地应用于蜂蜜中残留抗生素的测定 ,具有操作简单、快速方便、灵敏度及自动化程度高。     

新国标拦截重金属污染食品

食品中污染物是影响食品安全的重要因素之一。"食品污染物是食品从生产(包括农作物种植、动物饲养和兽医用药)、加工、包装、贮存、运输、销售、直至食用等过程中产生的或由环境污染带入的、非有意加入的化学性危害物质。"     

蜂蜜中氯霉素残留量测定的不确定度评估

按照SN/T1864-2007《进出口动物源食品中氯霉素残留量的检测方法第2部分:液相色谱串联质谱法》对蜂蜜中氯霉素残留量进行分析。通过建立数学模型,对测量结果的各不确定度来源,如标准使用液、内标、回归方程、方法重复性等引入的不确定度分量及其灵敏系数进行分析和量化。当蜂蜜中氯霉素残留量为0.108μg/kg时,扩展不确定度为0.012μg/kg(k=2)。     

采用液相色谱-串联质谱同时检测动物源性食品中胺苯醇类药物及其代谢产物

建立了采用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)同时测定动物源食品中氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考以及氟苯尼考胺残留量的方法。三类胺苯醇类药物及其代谢物用氨化乙酸乙酯(97+3v/v)提取,C18小柱净化;其中氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考用内标法定量,氟苯尼考与氟苯尼考胺用外表法定量。方法的定量测定低限氯霉素为0.1μg/kg,甲氟霉素、氟苯尼考胺为1.00g/kg,各基质的加标平均回收率在73.8%～120.5%之间,相对标准偏差≤25%。     

硝呋烯腙的纯化及其在饲料中的HPLC及LC-MS检测技术研究

硝呋烯腙(nitrovin),化学名称1,5-双(5-硝基-2-呋喃基)戊二烯-3酮咪基腙,是20世纪70年代中期发现的一种新型抗生素,作为生长促进剂和抗菌剂广泛用于猪、禽和牛上,一般的添加剂量为10～30 mg/kg. 近年来随着人们对动物食品安全的关心,尤其是对动物产品中抗生素残留的关注,我国农业部于2002年的193号文件明令规定禁止使用硝呋烯腙于食品源性动物.     

在线凝胶渗透色谱-气相色谱串联质谱法测定动物源性食品中氯霉素

建立了在线凝胶渗透色谱-气相色谱串联质谱(GPC-GC-MS/MS)测定动物源性食品中氯霉素的方法。样品经提取、净化、衍生化和定容后,用大体积进样装置取100μL进样,过凝胶渗透色谱柱后由切换阀排出残留的脂肪和色素等大分子物质,剩余的组分经色谱柱分离,质谱选择EI源多反应监测模式(MRM)检测,内标法定量。氯霉素浓度在0. 25～10 ng/mL范围内和其衍生物与内标衍生物的峰面积比呈线性关系,相关系数r=0. 9976,检出限为0. 05μg/kg,在低、中和高3个添加水平下,回收率在84. 0%～96. 1%之间; RSDs在2. 1%～8. 2%之间。该方法检出限低,精密度和准确度高,适用于动物源性食品中氯霉素的测定。     

高效液相色谱法同时测定动物源性食品中5种磺胺及3种四环素族抗生素残留

建立了动物源性食品中5种常用磺胺(磺胺甲噁唑、磺胺2甲氧嘧啶、磺胺二甲基嘧啶、磺胺-6甲氧嘧啶、磺胺喹噁啉)及3种四环素族(土霉素、金霉素、四环素)抗生素残留的高效液相色谱同时测定方法.样品经提取,固相萃取净化,浓缩后进行HPLC分离,结合保留时间及二极管阵列检测器(PDA)光谱分析信息定性.添加水平为20、50、100μg/kg时5种磺胺及3种四环素族的平均回收率范围为70%~92%,变异系数小于15%.结果表明,该法简单、快速、灵敏,适用于动物源性食品中多磺胺组份及四环素族组份残留的同时测定.     

蜂蜜中氯霉素残留的气质分析方法研究

氯霉素(chloramphenicol)又名左旋霉素,是一类广谱抗生素,作为药物常用于家禽疾病治疗和预防.氯霉素对人的造血系统、消化系统具有严重的毒性反应,有可能引发人的再生障碍性贫血.因此欧盟等国家规定蜂蜜及其它动物源食品中氯霉素的最高残留量不得超过0.1μg/kg.本文对蜂蜜样品的提取、净化和富集方法进行了较为系统地研究,建立了固相萃取-气相色谱-质谱联机分析蜂蜜中的氯霉素残留量的方法.对氯霉素在固相萃取柱上的保留行为进行了研究,优化固相萃取条件,发现在选定的条件下,不同浓度的氯霉素在硅胶柱和C18柱上的回收率均在90%以上,蜂蜜加标的回收率在80%～95%,相对标准偏差在7.2%～18.2%,最低检出限为0.1μg/kg.对氯霉素的三甲基硅烷化衍生物采用选择离子的模式进行检测(376,378,466、468、470),衍生物的峰面积与样品浓度在0.55～220 ng/mL范围内呈良好的线性关系,线性回归系数为0.9998.     

基于磁性金属有机框架化合物-适配体探针的氯霉素仿生比色传感器研究

构建了一种基于磁性金属有机框架化合物( MOF)-适配体探针的仿生比色传感器,用于食品中氯霉素残留分析。首先将氯霉素( CAP)的适配体标记到Fe3 O4磁珠上获得捕获探针,进而采用该适配体的互补链标记到铁基MOF( Fe-MOF)上作为纳米示踪剂( MOF-cDNA),将捕获探针和示踪剂杂交结合后,可获得铁磁性仿生复合探针。当氯霉素和此类探针孵育后,其与捕获探针上的适配体结合,将纳米示踪剂释放到溶液中,并经过磁分离后进入上清液。由于Fe-MOF具有过氧化物酶的性质,可以催化TMB-H2 O2系统显色,由此构建了一种高选择性的氯霉素比色传感器。在最佳反应条件下,本法对氯霉素的检测范围在0.001~10 ng/mL之间,最低检出限为0.3 pg/mL(S/N=3),实际样品的加标回收率为86.9%~93.5%,且不受其它抗生素干扰。用此方法检测牛奶样品中氯霉素的结果与商业化ELISA方法一致。此类无酶标记仿生探针具有高催化活性且成本较酶标探针大大降低;该分析方法利用磁分离简化了前处理步骤,可用于奶制品中氯霉素的快速灵敏分析。     

气色相谱-质谱法测定化妆品中的氯霉素

氯霉素是一种广谱抗生素,化妆品卫生规范规定氯霉素等抗生素为禁用物质.关于氯霉素的检测多采用高效液相色谱(HPLC)[1]和高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)[2] 测定,或者经N,O-双三甲基硅烷基-三氟乙酰胺(BSTFA)、三甲基氯硅烷(TMCS)等硅烷化[3-4]后进行气相色谱(GC)、GC-MS测定.本文建立了采用较为普通的乙酸酐试剂进行衍生化,然后用GC-MS测定的方法.将该法应用于化妆品中氯霉素的检测,取得了较好的效果.     

几种动物源性食品中氯霉素残留量的气相色谱双电子俘获检测

研究了几种动物源性食品中氯霉素残留量的气相色谱测定方法;样品中氯霉素残留用乙酸乙酯提取,浓缩至干,溶于氯化钠溶液,用正己烷脱脂,水层再用乙酸乙酯提取,浓缩后用N,O-双(三甲基硅烷基)三氟乙酰胺(BSTFA)+1%三甲基氯硅烷(TMCS)衍生,用外标法定量;采用不同极性的色谱柱定性。当添加水平为0.3×10-9～10×10-9(w)时,回收率大于80%,相对标准偏差小于20%,线性相关系数r＝0.999。     

固相萃取-气相色谱质谱测定动物组织中氯霉素的残留量

对鸡肉、猪肉、猪肝、鸭肝等动物组织样品中的氯霉素残留的检测方法进行了研究。用乙酸乙酯和磷酸盐缓冲溶液提取动物组织中的氯霉素残留,用硅胶和C18固相萃取柱对乙酸乙酯提取物进行净化和富集。净化后的提取物用BSTFA衍生化和气相色谱-质谱-负化学电离源选择离子定量检测(选择离子为376,378,466,468,470)。通过对提取、净化富集条件的优化,建立了动物组织中氯霉素残留量的检测方法。该方法对不同基体样品的加标回收率为80％～100％之间;相对标准偏差小于20％;方法的检出限为0．1μg／kg。     

大辽河水系河水中16种抗生素的污染水平分析

采用固相萃取-液相色谱-串联质谱建立了水中磺胺(SAs)、氟喹诺酮(FQs)、四环素(TCs)和氯霉素(CAPs)4类共16种抗生素的同时定量分析方法。该方法采用正、负离子同时扫描模式,提高了分析速度;同时在固相萃取洗脱步骤中采用两种溶剂(甲醇及含氨水的甲醇)组合对目标抗生素进行洗脱,在减小洗脱溶剂用量的同时又提高了回收率。用此法对大辽河水系20个采样点的河水进行了定量检测。结果表明: 该法对水体中的目标抗生素有较好的灵敏度和富集效果,方法回收率为69.5%～122.6%,检出限为0.05～0.32 ng/L。在大辽河水系河水中共检出4类13种抗生素的残留,其中磺胺甲基异恶唑在所有采样点都有检出;氟喹诺酮类抗生素的局部残留浓度相对较高;四环素和氯霉素的检出频率和检出浓度相对较低。在河流的上游,这4类抗生素的残留水平较低,而在大城市如沈阳、本溪、辽阳的周围残留水平较高。通过对大辽河水系河水中的抗生素污染水平进行系统的分析比较,所得数据说明大辽河水系存在一定程度的抗生素残留污染,今后对周边地区抗生素污染排放需要加强科学管理。     

快原子轰击(FAB)离子化法测定头孢拉定的质谱及其裂解途径的解析

头孢拉定(Cefradine)是第一代合成头孢类抗生素药,也是目前最常用的抗生素之一。有胶囊、片剂也有注射针剂。具有广谱的抗菌性能,由于它对革兰氏阳性及阴性杆菌敏感,故对治疗呼吸道感染颇有效,用途广、用量大,属于高效的头孢菌素。国内不少药厂都有研制,为此,我们对其质谱行为进行了分析。头孢拉定,化学名(6R,7R-[(R)-2-氨基-2-(1,4-环己烯基)乙酰氨基]-3-甲基-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂双环[4.2.0】辛-2-烯-2-羧酸,其产品为一水化物。分子式C16H19N3O4S·H2O,结构见图1。     

牛奶中链霉素与双氢链霉素残留检测的液相色谱-串联质谱法研究

链霉素(streptomycin)是从放线菌属灰链丝菌培养液中提取的一种氨基糖苷类抗生素,兽医临床上常用于预防和治疗革兰氏阴性菌和结核杆菌等引起的感染.由于其抗菌谱广,而且价格低廉,因此在奶牛养殖业中常被大量应用于治疗奶牛乳腺炎等.