基于雌激素β受体结构雌激素类化合物的三维定量结构-活性关系与分子对接研究

雌激素类化合物由于其对人和野生动物健康的负面影响而受到广泛关注.雌激素受体存在α和β两种亚型,由于雌激素β受体（ERβ）与α受体（ERα）两者结合腔中的氨基酸序列存在明显差异,因此配体化合物在与雌激素β受体和α受体的结合活性和模式上也可能存在较大差别.本文以50个与雌激素β受体结合的化合物为研究对象,应用比较分子相似性指数分析（COMSIA）的三维定量结构-活性关系（3D-QSAR）分析方法研究化合物结构与活性之间的关系,比较了原子契合和基于受体结构两种分子叠合方式对模型质量的影响,建立了相关性显著、预测能力强的定量活性预测模型（R^2=0.961,qLOO^2=0.671,R^2Pred=0.722）,并结合分子对接方法揭示了影响化合物活性的分子结构特征和分子机理.     

基于AuNPs/PANI-NF复合膜的电化学细胞传感器对姜黄素诱导HeLa细胞凋亡的抑制作用检测

以聚苯胺纳米纤维(PANI-NF)-纳米金(AuNPs)复合膜构建传感界面,在AuNPs/PANI-NF界面上修饰转铁蛋白(Tf),利用转铁蛋白与人宫颈癌细胞(HeLa)表面大量表达的转铁蛋白受体(TfR)之间的特异性识别作用,将细胞捕获到传感器界面,导致电化学阻抗值变化。利用电化学阻抗谱研究姜黄素对HeLa细胞的抑制作用。结果表明,随着药物浓度的增大和作用时间的延长,电化学阻抗值下降,表明姜黄素对细胞的抑制作用增强。电化学阻抗值的变化率与药物浓度和作用时间具有量效关系;电化学方法检测显示,姜黄素对HeLa细胞的抑制作用趋势与MTT法及倒置显微镜检测到的姜黄素对HeLa细胞的抑制作用结果相吻合,从而建立了一种检测药物对细胞抑制作用的新方法。该方法具有简便、灵敏度高、费用低廉等优点。     

基于启发式变量筛选方法研究与雌激素β受体结合的化合物结构与活性之间的关系

雌激素类化合物由于其对人和野生动物健康的负面影响而受到广泛关注.雌激素受体存在两种亚型(ERα和ERβ),化合物与两种受体亚型在结合活性和化合物结构特征方面存在差异.以31种与雌激素β受体亚型(ERβ)结合的化合物为研究对象,采用启发式变量筛选方法,从1524个变量中筛选出5个与化合物活性(lgRBA)最相关的变量,然后采用多元线性回归(MLR)建立最佳预测模型.模型相关性显著,而且具有良好的稳健性和预测能力(r2=0.829,q2LOO=0.742,r2pred=0.772,q2ext=0.724,RMSEE=0.395).同时揭示了影响化合物与ERβ受体结合的配体化合物分子的结构特征,并对模型的应用域进行了研究.     

柠檬酸镧诱导肿瘤细胞凋亡的研究

采用噻唑蓝(MTT)法检测稀土化合物柠檬酸镧在1×10-3～5 mmol·L-1浓度范围内对体外培养的人乳腺癌细胞株MCF-7、前列腺癌细胞株PC-3、肝癌细胞株HepG2和宫颈癌细胞株HeLa生长的影响.结果表明,柠檬酸镧对各种癌细胞生长的影响存在浓度依赖性,在实验浓度范围内,低浓度无明显作用特征,高浓度抑制癌细胞生长;不同肿瘤细胞对稀土的响应不同,HeLa细胞相对敏感,其IC50值为(0.16±0.08)mmol·L-1,而MCF-7细胞为(0.18±0.02)mmol·L-1,PC-3细胞为(1.55±0.45)mmol·L-1,HepG2细胞为(2.71±0.11)mmol·L-1.进一步以0.15 mmol·L-1的柠檬酸镧作用于HeLa细胞,采用Hoechst 33258荧光染色、PI单染流式细胞仪检测、Annexin V-FITC/PI双染色法观察镧对HeLa细胞的毒性作用.结果表明,柠檬酸镧作用24 h后,HeLB细胞出现明显的凋亡特征,PI染色流式细胞仪检测可见凋亡峰,细胞周期分析表明sub-G1期细胞硅著增加,G0/G1期细胞显著减少(P<0.05),Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡率为(61.65±4.60)%(P<0.05).上述结果表明柠檬酸镧能诱导癌细胞发生凋亡.以HeLa细胞最灵敏而对HepG2并不敏感,其次序为HeLa>McF-7>Pc-3>HepG2.     

基于特异性蛋白Gαa的比浊法检测β-葡聚糖

通过基因重组技术,克隆表达了β-葡聚糖特异性结合美洲鲎G因子α亚基片段a(Gαa)蛋白,并建立了β-葡聚糖比浊检测方法。克隆的Gαa基因相对分子质量为40000(1251 bp),浓度为2 g/L,纯度达到98%以上。该蛋白能与βG特异性结合,紫外分光光度计在340 nm下检测的吸光度与βG含量呈正线性相关,线性范围3.125~200 mg/L,R2=0.997,检测限3.125 mg/L。结合力实验表明,该蛋白与βG具有良好的亲和性及特异性。该方法具有成本低、快速、专一性强等特点。     

互为同分异构体的植物雌激素与ERα及ERβ结合亲和力的分子动力学研究

本研究采用分子动力学模拟方法探究了互为同分异构体的2种植物雌激素芹菜素和染料木素与雌激素受体ER_α及ER_β之间的结合亲和力,选择内源性激素17β-雌二醇进行对比研究.研究结果表明,配体中官能团的位置、配体和受体之间形成的氢键数目、范德华能、静电能及溶剂化能等相互作用影响复合物的稳定性,进而影响结合能力.     

气相色谱-质谱联用法同时测定牛奶中的6种天然雌激素

天然雌激素是一类内源性激素,但其外源性摄入可能对人体健康造成危害。牛奶是人体外源性天然雌激素的重要来源之一,对牛奶中天然雌激素的准确分析是评价人体外源摄入的重要前提。该研究建立了一种气相色谱-质谱联用(GC-MS)同时测定牛奶中雌酮(E1)、17α-雌二醇(17α-E2)、17β-雌二醇(E2)、雌三醇(E3)、16α-羟基雌酮(16αOHE1)和16keto雌二醇(16ketoE2)6种天然雌激素的分析方法。选择不同类型牛奶样品,依次通过液液萃取、固相萃取富集净化,再利用BSTFA+1%TMCS进行衍生化,乙酸乙酯定容后采用GC-MS进行测定。结果显示,6种雌激素在5～100μg/L范围内线性关系良好,相关系数(r²)大于0.995;检出限(LOD)和定量下限(LOQ)分别为0.17～0.51μg/L和0.56～1.68μg/L;平均加标回收率为83.1%～119%,相对标准偏差(RSD)为2.1%～15%,该方法具有较好的准确性及稳定性。利用所建方法对实际牛奶样品中的天然雌激素进行检测,除常见的天然雌激素E1、E2、17α-E2之外,样品中还检测出16αOHE...     

基于纳米结构双层类脂膜的雌激素传感器

采用铂盘电极支撑的纳米金修饰的双层类脂膜(Pt/BLM/Au)来固定雌激素受体(ER),制备Pt/BLM/Au/ER用于检测雌激素的传感器.电极不同修饰状态分别用循环伏安法和交流阻抗法进行表征.以交流阻抗法测得电极结合雌激素后阻抗的改变与17β-雌二醇(E2)的浓度在5～150 ng/L范围呈良好线性关系,相关系数r=...     

3-芳基-7-羟基喹啉类拓扑异构酶Ⅱα抑制剂的合成及抗肿瘤活性研究

人脱氧核糖核酸(DNA)拓扑异构酶Ⅱα(topoisomerase Ⅱα, Topo Ⅱα)是重要的抗肿瘤药物靶标之一.为发现高效、低毒的Topo Ⅱα抑制剂,通过对先导化合物6-(3,4-二羟基苯基)萘酚(CS1)进行骨架跃迁,设计合成了21个3-芳基-7-羟基喹啉衍生物.采用DNA松弛实验评价体外Topo Ⅱα抑制活性,结果显示大部分化合物对Topo Ⅱα活性有抑制作用;采用人三阴乳腺癌MDA-MB-231细胞和人宫颈癌HeLa细胞生长抑制实验体外评价抗肿瘤活性,结果表明3-(2,4-二甲氧基苯基)-7-羟基喹啉(4j)对HeLa细胞有明显毒性(IC_(50)=0.8μmol·L~(-1)), 3-(4-羟基苯基)-7-羟基喹啉(4e)对MDA-MB-231(IC_(50)=1.1μmol·L~(-1))和HeLa(IC_(50)=4.2μmol·L~(-1))细胞均有明显毒性,阳性对照CS1对MDA-MB-231和HeLa细胞的IC_(50)值分别为3.8和2.5μmol·L~(-1).研究结果为设计合成新的喹啉类高效拓扑异构酶Ⅱα抑制剂提供了新思路.     

免疫组织化学技术在雌激素受体检测中的应用进展

介绍了雌激素受体的结构、类型、分布和作用,以及几种常用的免疫组织化学方法;总结了免疫组织化学方法在雌激素受体检测中的应用,并对其应用前景作了展望。     

ICP-AES测定铀污染土壤植物中铀的研究

采用电感耦合等离子体发射光谱(ICP-AES)对铀污染土壤植物中铀的测定方法进行了研究.在λU385.958 nm处,选择了仪器的最佳工作条件,考察了酸度和常见共存元素对测定的干扰情况,并且对比了干灰化消解和湿式消解对测定的影响.研究发现2%硝酸溶液为最佳介质,干扰离子对测定没有显著影响,干灰化消解比湿式消解得彻底.在选定条件下,方法检出限为0.18 mg·L-1,测定下限为0.61 mg·L-1,5.0000 mg·L-1的铀标准溶液的相对标准偏差RSD(n=10)为0.81%,方法回收率为96.2%～106.2%.该方法操作简单,快速.结果表明,用ICP-AES测定铀污染土壤植物样品中的铀是可行的.     

测定血清中Na 含量不确定度的评定

对血清中Na离子含量的测量不确定度进行评定。不确定度的来源主要包括Na离子标准工作液的配制过程、血清样品的定容消化制备、标准曲线拟合、钠离子各分量不确定度的合成等引入的不确定度计算出各分量的不确定度,通过合成得到测量结果的合成不确定度、扩展不确定度及测试结果的报告形式。     

Interpretation of inorganic arsenic metabolism in humans in the light of observations made in vitro and in vivo in the rat

The toxicity of inorganic trivalent arsenic for living organisms is reduced by in vivo methylation of the element. In man, this biotransformation leads to the synthesis of monomethylarsonic (MMA) and dimethylarsinic (DMA) acids, which are efficiently eliminated in urine along with the unchanged form (As_i). In order to document the methylation process in humans, the kinetics of As_i, MMA and DMA elimination were studied in volunteers given a single dose of one of these three arsenicals or repeated doses of As_i. The arsenic methylation efficiency was also assessed in subjects acutely intoxicated with arsenic trioxide (As₂O₃) and in patients with liver diseases. Several observations in humans can be explained by the properties of the enzymic systems involved in the methylation process which we have characterized in vitro and in vivo in rats as follows: (1) production of As_i metabolites is catalyzed by an enzymic system whose activity is highest in liver cytosol; (2) different enzymic activities, using the same methyl group donor (S-adenosylmethionine), lead to the production of mono- and di-methylated derivatives which are excreted in urine as MMA and DMA; (3) dimethylating activity is highly sensitive to inhibition by excess of inorganic arsenic; (4) reduced glutathione concentration in liver moderates the arsenic methylation process through several mechanisms, e.g. stimulation of the first methylation reaction leading to MMA, facilitation of As_i uptake by hepatocytes, stimulation of the biliary excretion of the element, reduction of pentavalent forms before methylation, and protection of a reducing environment in the cells necessary to maintain the activity of the enzymic systems.     

Use of matrix-modifiers in atomic-absorption determination of chromium in argillites

The direct atomic-absorption determination of chromium in argillites, without preliminary concentration and separation, has been studied. A map of selective flame zones for determining Cr in argillites has been designed. An express method for determining Cr in Estonian argillites has been suggested.     

Effect of vibration in processes of structure formation in polymers

It was shown that the strength characteristics of the samples produced from thermoplastics (low density polyethylene, polyamide 6, Armamid, and polyethylene terephthalate) increase as a result of short vibration treating with a frequency close to that of natural vibrations of the structural elements.     

Assessment of performance of laboratories in determining acrylamide in crispbread

A proficiency testing round was undertaken to assess the performance of laboratories to measure acrylamide in a sample of crispbread. Retail samples of crispbread were ground to a fine powder and after thorough mixing were packed in 40 g units for distribution. Ten samples were selected at random and analyzed in duplicate for acrylamide by liquid chromatography/mass spectrometry (LC/MS). Standard statistical tests showed that the material was homogeneous for the purposes of proficiency testing. Test samples were distributed to 55 laboratories in 16 countries in Europe, North America, Australia, and the Middle East. The results were analyzed by standard proficiency testing statistical procedures, and laboratories were awarded z-scores on the basis of their reported results. Based on a target standard deviation (sigmap value) taken from the Horwitz equation, for a robust mean value of 1.2 mg/kg acrylamide, satisfactory results (z-score within +/- 2 for those between 0.8 and 1.6 mg/kg) were obtained by 86% of the 37 laboratories that returned results. Only 1 laboratory was unsatisfactory and 4 had questionable results. About equal numbers of laboratories used gas chromatography (GC)/MS and LC/MS procedures with about 25% using MS/MS and one using GC with electron capture detection. There was no evident trend in performance or bias in results. GC/MS and LC/MS data were evenly distributed across the population of laboratories reporting results.     

超临界流体萃取技术在提取中药挥发油中的应用

用超监介CO2流体萃取技术对多种中药挥发油的提取进行了综述,并将其与传统的水蒸馏法进行比较。结果表明,用超临界流体法不仅挥发油的收率高,而且提取时间也大大缩短。     

茶叶中高氯酸盐检测方法研究进展

茶叶中新型污染物高氯酸盐在近年来受到越来越多的关注,相应的检测技术也在不断加强.参考国内外文献,综述了茶叶中高氯酸盐的检测方法.目前,茶叶中高氯酸盐的检测方法主要有离子色谱法（IC）、离子色谱-质谱法（IC-MS）和高效液相色谱-串联质谱法（LC-MS-MS）.比较了不同检测方法的局限性和优越性,重点比较了高效液相色谱-串联质谱法不同前处理方法、净化小柱和检测条件的优劣,对茶叶高氯酸盐检测技术的发展和研究进行了展望,为检测茶叶中高氯酸盐的新材料研发和检测新标准的建立提供理论依据.