与光系统Ⅱ颗粒结合的蛋白酶的进一步分析

依次用三种溶液抽提处理菠菜光系统Ⅱ颗粒，离心后分离得到主要含１８ｋＤ，２４ｋＤ和３３ｋＤ水溶性蛋白的三种抽提液，利用ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳检测到前两种抽提液中均含蛋白酶。抽提液分别温育时，１８ｋＤ蛋白被降解而产生１７．１ｋＤ，１６ｋｄ，１４．４Ｋｄ．１３．５ｋＤ和１２ｋＤ片段；２４ｋＤ蛋白被孜解成２２ｋＤ，２０ｋＤ和１８ｋＤ。     

nptⅡ基因在芥菜型油菜中的遗传规律

研究了转基因油菜Ｒ０、Ｒ１、Ｒ２代的Ｋｍ抗性。试验结果表明：芥菜型油菜Ｒ０的１，５，６，７，８，１０号无性系可抗Ｋｍ５０ｍｇ／Ｌ，其余的均抗Ｋｍ３５ｍｇ／Ｌ。Ｒ１种子在Ｋｍ２０ｍｇ／Ｌ的生根培养基上进行生根抗性试验，生根与不生根的比例经适合性检验（ｘ２检验）有１０个无性系符合孟德尔单基因分离的遗传规律，只有两个无性系不符合这一规律，出现了较高的抗性苗比例（３４：２；４０：６）。Ｒ２代共做了７个单株的种子抗性试验，其中６个单株的种子出现３：１的分离比，一个单株没有发生分离，种子全部可抗Ｋｍ。     

光系统Ⅱ核心天线蛋白CP43和CP47的圆二色和磁圆二色性研究

从菠菜中分离提纯了光系统Ⅱ核心天线复合物ＣＰ４７,利用吸收光谱、圆二色（ＣＤ）光谱和磁圆二色（ＭＣＤ）光谱对二者色素结合状态进行了研究。对ＣＰ４３和ＣＰ４７上色素结合状态的不同进行了讨论。ＭＣＤ光谱是一种高灵敏度的检测色素的光谱手段,适宜于对光合作用中色素－蛋白复合物的研究。     

活性氧对植物光系统Ⅱ的破坏作用

应用荧光发射和激光光谱，可见吸收光谱和ＳＤＳ－ＰＡＧＥ等监测手段，比较了ＰＳⅡ颗粒在光抑制光照下，以及在两次氯酸钠，过氧化氢，次氯酸钠和过氧化氢混合体系中处理时，色素含量，蛋白组分和ＰＳⅡ活性的变化。实验表明，在上述处理过程中，ＰＳⅡ颗粒的放氧活性，叶绿素等色素及多肽组分均受到破坏。     

强光光抑制引起的光系统Ⅱ膜复合物蛋白二级…

强光照射引起的光系统Ⅱ膜蛋白复合物的光抑制过程中，伴随着二级结构组成发生变化；短时间的光照对其二级结构的影响不大，但较长时间（４０ｍｉｎ）后可引起α螺旋含量下降，无规卷曲成分增加，在复合物中加入表面活性剂ＴｒｉｔｏｎＸ－１００后，可使β折叠的含量显著减少，同时还使ＰＳⅡ对强光的耐受性下降，表现在二级结构的变化加大，实验结果表明：稳定的膜结构可以提高光系统Ⅱ抵抗强光破坏的能力，光抑制主要影响膜蛋白复     

双硫腙修饰光极测定汞(Ⅱ)的研究

以双硫腙为探针构造了PVC膜修饰光极,就该光极的识别机理,酸度、响应时间、选择性等对光度测定的影响和光极再生方法进行了探讨,建立了一种新型的Hg2+离子选择性光极测定方法.结果表明,该修饰光极在pH4.5的缓冲溶液中对汞离子有灵敏的响应,测量范围0～10-5mol l-1,检测限达3.5×10-7moll-1,可应用于生活废水中汞离子的测定.     

短时间低温弱光胁迫对甜椒的光系统Ⅱ的功能调节

通过叶绿素荧光动力学研究了低温弱光胁迫对甜椒PSⅡ光化学效率的影响.结果表明,短时间低温弱光对光合色素含量的影响变化不大,但是甜椒叶片相对电导率和MDA含量的增加,甜椒PSⅡ反应中心受到伤害,光化学效率的降低,改变了激发能的分配.     

生菜遗传转化受体系统的建立及鲑鱼降钙素基因的导入

以散叶生菜大速生(Lactuca sativa var.capatata L.)为试材，以MS为基本培养基。采用不同激素配比，确定生菜高效诱芽培养基为MS 0．1 mg／L6-BA 0．05mg／LNAA；抗生素敏感性试验表明，筛选培养基中适宜的卡那霉素选择压为75mg／L，抑菌剂羧苄青霉素的适宜质量浓度为300mg／L；通过根癌农杆菌介导的叶盘法将鲑鱼降钙素(sCT)基因转入大速生散叶生菜，PCR检测转化率达25．4％。     

四个意大利蜜蜂品系苹果酸脱氢酶Ⅱ基因的遗传差异分析

研究了意大利蜜蜂(A.m.ligustica)4个王浆、蜂蜜生产性能不同品系-美意(Em)、澳意(Eo)、苏意(Es)和平湖浆蜂(Ep)的MDHⅡ同工酶基因型频率、基因频率及杂合纯合度.试验发现,MDHⅡ的a、b、c三个等位基因在4个品系中出现的频率不同.c在Em、Eo、Es和Ep中的基因频率分别为0.507、0.483、0.680和0.820,为优势等位基因.该结果表明在产浆性能高的品系中c基因频率较高,意味着可将c基因频率作为意蜂王浆产量性能的一个遗传标记.等位基因a在Em、Eo、Es和Ep中频率分别为0.323、0.263、0.193和0.087;在Em中出现的频率最高.而等位基因b在Eo中频率(0.253)高于其他3个品系(Em,0.170;Es,0.127;Ep,0.093).Ep的纯合度最高,达0.753,高于Em(0.533)、Eo(0.633)和Es(0.540).经独立性检验,4个意蜂品系MDHⅡ同工酶的基因型频率、基因频率、纯合度均达到极显著差异水平.     

修饰合成冬鲽抗冻肽基因的设计和克隆

动物界和植物界密码子使用频率不同,冬Ｄｉｅ抗冻肽中丙氨酸占６０％而且偏爱ＧＣＣ,３８个Ａｌａ密友子中２３个为ＧＣＣ。我们设计合成抗冻肽基因时采用了植物基因常用密码子,用甘薯信号肽序列取了抗冻肽的ｐｒｅ序列,省略了Ｐｒｏ序列,并 信号肽下游二、四、八拷贝正向串联的成太的修饰基因,经测序证实与设计完成一致。利用ＱＩＡ表达系统,在大肠杆菌中实现了ＤＨＦＲ－成熟抗冻肽单体和二体的融合表达。     

光系统Ⅱ反应中心复合物不均匀一性分析及其对策

应用ＦＰＬＣ，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、吸收光谱和荧光光谱等技术，揭示了利用交换柱层析制备的光系统Ⅱ反应中心Ｄ１－Ｄ２－Ｃｙｔｂ５５９ｔｊｔ ｗｇｋ ｔｒ ｒ ｉ ｆｑｕ ｇ ｎｔｇ ，ｙｇｓｖｇｅ ｇｍ ｏ ｑｃ ｇｘｉ ｘｅｇ ｗｖ ｉ ｍ ，ｑｃ ｇｘｉ ｘｅｇ ｗｖ ｔｆｃ ｗｖ ，ｆｃｕ     

铝胁迫对常绿杨幼苗光系统Ⅱ的影响

以常绿杨无性系A-61/186(Populus×euramericanacv.)为供试材料,研究铝胁迫对常绿杨叶绿素荧光特性的影响.结果表明:常绿杨水培实验苗叶片PSII实际电子传递量子效率yield值和最大量子效率Fv/Fm值的日变化均表现出了"早晚高、午间低"的变化趋势,且胁迫浓度越高、时间越长,午间下降趋势越明显.初始荧光F0和非光化学淬灭系数NPQ的日变化则呈现与yield和Fv/Fm相反的趋势,表现出"早晚低,午间高"的趋势.说明遭受铝胁迫的植株将更多地吸收光能通过非光化学的途径耗散,从而使其光合效率降低.光响应指标的分析进一步表明铝胁迫会降低常绿杨光合效率,较短时间胁迫下(60d),胁迫浓度达到0.518mmol·L-1,会对光合效能产生显著影响,随着胁迫时间(90d)的加长,胁迫浓度达到0.370mmol·L-1时,就会对光合效率产生显著影响.     

光照下叶绿素a分子对两种磷脂结构的影响：脂在光系统Ⅱ光破坏过程？…

在构造的脂－色素囊泡模型系统中，过度的光照会引起脂分子结构的变化，主要表现在其脂肪链的不饱和度增大及酯键参与形成氢键能力的降低。脂肪链中的端基成分基本保持不变。化学单纯态氧也可对脂分子造成类似影响，但单线态氧的攻击不影响酯键参与形成氢键的能力。结果表明在光合作用系统的天然光破坏过程中不但存在着蛋白和色素的破坏，还有可能存在脂分子的损伤。     

变性剂和巯基修饰对黄精凝集素Ⅱ构象和活性的影响

采用圆二色谱、荧光光谱，研究了黄精凝集素Ⅱ（Polygonatum cyrtonema Hua.LectinⅡ,PCLⅡ）在4mol/L和6mol/L盐酸胍中，以及巯基修饰后，其活性和分子构象的变化关系，研究结果表明：PCL Ⅱ是一种稳定的蛋白质，巯基剂虽不影响其活性，但可使其分子构象发生变化，去除修饰剂后其结构部分能够恢复。在4mol/L盐酸胍中，PCL Ⅱ活性及构象可发生很大变化，去除盐酸胍后其活性恢复；6mol/L盐酸胍中，呈现典型的无规卷曲构象，活性完全丧失，去除盐酸胍后活性仍不能恢复，表明活性中心已遭到不可逆的破坏。     

Pb(Ⅱ)在Nafion修饰电极上的机理研究 (Ⅱ)富集过程中的离子交换和物理扩散

测定Pb(Ⅱ)在Nafion修饰电极上离子交换富集过程中的离子交换系数及物理扩散系数,提出了该过程中,Pb(Ⅱ)在Nafion膜中的浓度分布模型和Pb(Ⅱ)离子交换与扩散模式.     

嗜热优雅粘囊藻的生长、放氧和超微结构

从温泉分离出一种嗜热蓝藻。它的生长最适温度为４５℃。在饱和光及４５一４７℃中藻的光合放氧活性可达４５０μｍｏｌＯ＿２．ｍｇｃｈｌａ￣（－１）·ｈｒ￣（－１）。在黑暗中藻的呼吸和放氢的最适温度都在４７℃。电子显微镜相片显示，藻细胞中类囊体十分发达，它连接着藻胆体，并包围着核质、多角体和蓝藻颗粒体。     

蓝藻基因表达载体系统的构建和应用

蓝藻是一类具植物型放氧光合作物特性的原核生物。多数蓝藻富含营养物质,无毒,是表达外源目的基因的独特受体系统。因此,构建适用于蓝藻表达外源目的基因的载体系统,并用于表达药物活性肽基因,已成为当前蓝藻基因工程研究的热点之一。本课题组10多年来率先在国内开展蓝藻基因工程研究,从蓝藻Plectonema botyanum中分离得到了约1.5kb的小质粒,以此为出发质粒,构建了蓝藻穿梭质粒pPRS-1和穿梭质粒表达载体pPKE2;同时根据DNA片段同源重组的性质,构建了蓝藻Calothrix sp.PCC7601、Synechococcus sp.PCC7942的基因整合平台系统。在国家863项目经费资助下,利用构建的蓝藻质粒载体和基因整合平台系统,把人源胸腺素基因转入蓝藻Calothrix sp.PCC7601和Synechoccus sp.PCC7942,并能高效表达,首次获得了可直接口服的含人源胸腺素的转基因蓝藻,这对研究和开发基因工程口服药物具有重大的科学意义和经济、社会效益。