肝素亲和柱与高效液相柱二步色谱法分离基因重组的人血小板第四因子

介绍利用肝素亲和色谱和高效液相色谱二步法分离纯化基因重组的人血小板第四因子（ｒｈＰＦ４）。采用肝素柱，用含不同浓度的ＮａＣｌ的磷酸盐缓冲液（ｓｏｄｉｕｍｐｈｏｓｐｈａｔｂｕｆｅｒ，即ＰＢＳ）（２０ｍｍｏｌ／Ｌ，ｐＨ７．４）分级洗脱，得到初步纯化的ｒｈＰＦ４（纯度达８０％）；再采用Ｃ１８柱，乙腈（含０．１％三氟醋酸即ＴＦＡ）－水（含０．１％ＴＦＡ）为流动相梯度洗脱，得到进一步纯化的产物。方法快速、准确、分离效果好，经过两次分离后产物纯度达９５％以上。     

反相高效液相色谱法分离重组促红细胞生成素

利用反相高效液相色谱法对重组促红细胞生成素进行了纯化。结果表明,利用Ｃ４反相柱和乙腈－三氟乙酸流动相在洗脱梯度和上样样品纯度等条件都较适当时,可以简单、快速、高效地从粗品中分离出重组促红细胞生成素,获得的产品纯度高,接近１００％;比活性好,约为１．９６×１０８ＩＵ／ｇ蛋白。     

用免疫亲和柱分离、高效液相色谱法测定花生和玉米中黄曲霉毒素的研究

建立了用免疫亲和柱分离净化、高效液相色谱法测定花生和玉米中黄曲霉毒素（ＡＦＴ）Ｂ＿１、Ｂ＿２、Ｇ＿１、Ｇ＿２的方法。采用６０％甲醇提取样品中的ＡＦＴ,氢氧化铁沉淀吸附除去样品液中大部分杂质,再经过亲和柱将ＡＦＴ截留,进一步与杂质分离,洗脱后,加三氟乙酸衍生化处理,反相高效液相色谱法分离定量。对样品中四种ＡＦＴ的最低可测下限浓度均为１μｇ／ｋｇ,样品加标５～１０μｇ／ｋｇＡＦＴ,回收率在７６．９％～１１３．６％范围内。     

免疫亲和柱净化/高效液相色谱法同时测定动物源性食品中16种磺胺类药物残留

建立了免疫亲和柱净化/高效液相色谱法(IAC/HPLC)同时测定动物源性食品中16种磺胺类药物残留的分析方法。样品经80%乙醇提取,稀释后用磺胺类药物免疫亲和柱净化,高效液相色谱法检测。以Agi-lent Eclipse XDB-C18为分离色谱柱,甲醇-磷酸盐缓冲液(pH 3.5)为流动相梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,进样量为50μL,检测波长为270 nm,整个分析过程不超过42 min。实验结果表明,磺胺类药物在10～200μg/L范围内线性关系良好,相关系数均大于0.999。在20、50、100μg/kg的加标水平下,16种磺胺类药物的平均回收率为62%～104%,相对标准偏差为0.9%～6.6%,检出限(S/N=3)为4～10μg/kg。该方法简便快速、灵敏度高、溶剂用量少且环保,适用于动物源性食品中磺胺类药物残留的测定。     

两步柱色谱法分离纯化重组肿瘤血管生长抑制因子Kringle 5

建立了一种用Ni2+螯合的Chelating Sepharose Fast Flow亲和柱色谱和Sephadex G-75凝胶排阻柱色谱分离纯化重组肿瘤血管生长抑制因子Kringle 5的方法。采用该工艺得到的重组Kringle 5经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析表明其纯度约为98%,且具有抑制鸡胚绒毛尿囊膜新生血管生成的生物活性。     

有机酸类化合物的反相高效液相色谱法的分离条件研究

 研究了在用RP HPLC法测定有机酸时如何对流动相的酸度进行控制 ,给出了流动相最佳pH的选择通式 :色谱柱允许的最低 pH值≤pH≤pKa- 2 ;研究了流动相中甲醇、乙腈存在时对此通式的影响。用研究得出的结论选择了测定甲酸、乙酸、丙酸、丁酸和丙二酸、丁二酸、戊二酸、己二酸时的色谱条件 ,并且研究了每种酸在各自浓度范围内测定的线性关系、回归方程、相关系数以及相对标准偏差。实验显示 ,在选定的色谱条件下进行分析测试时 ,各种酸的线性相关系数r >0 9995 ,相对标准偏差RSD <0 90 %。     

植物激素的反相高效液相色谱法分离和测定

探讨了分离和测定８种植物生长激素的反相高效液相色谱法。结果表明：以含有０．８％醋酸的甲醇和水作为流动相,采用梯度洗脱,可在１６ｍｉｎ内将８种物质完全分离并可进行定量测定,线性关系良好。方法具有快速、简便、准确的特点。     

高效液相色谱法测定乌梅有机酸

采用Kromnsil C18为分析柱,0．0lmol／L磷酸盐缓冲溶液(pH2．7)为流动相,紫外215nm检测,建立了乌梅中草酸、酒石酸、苹果酸、乳酸、乙酸、柠檬酸、琥珀酸等多种有机酸的高效液相色谱方法。方法的回收率为98％～105％;RSD为2．26％～7．82％;检出限为10～75ng(S／N=3)。测定了4种不同产地和种类的乌梅中的苹果酸、乳酸、乙酸、柠檬酸、琥珀酸的含量。     

反相高效液相色谱法测定人尿中利凡诺

建立了运用反相高效液相色谱法测定人尿中利凡诺的方法.采用Spherisorb C18色谱柱(250 mm×4.6 mm i.d.,5 μm);流动相: V(甲醇)∶V(乙腈)∶V(0.2 mol/L NH4Ac)=60∶37∶3;流速: 1.0 mL/min;柱温: 40 ℃;荧光检测器: 激发波长360 nm,发射波长500 nm.在5 ng/mL～1 μg/mL质量浓度范围内,呈现良好线性(r=0.9999),检出限为1 ng/mL.     

GDX树脂富集－反相高效液相色谱法分离测定酚类化合物

用ＧＤＸ－５０２树脂富集的酚类化合物，经反相高效液相色谱法分离和检测，具有较好的准确度和精密度。     

GDX树脂富集－反相高效液相色谱法分离测定酚类化合物

 用ＧＤＸ－５０２树脂富集的酚类化合物，经反相高效液相色谱法分离和检测，具有较好的准确度和精密度。     

反相高效液相色谱法测定阿莫西林

采用反相高效液相色谱法测定阿莫西林并对测定条件及有关参数进行了试验.用Shim-Pack VP-ODS柱作色谱柱,以磷酸盐缓冲液(pH 5.0)及乙醇以90比10的混合液为流动相,流速为1.0 mL·min-1,在228nm波长处测定阿莫西林的含量,其线性范围为0.045～0.60 g·L-1,相关系数为0.9974.将方法应用于阿莫西林胶囊的测定,测定结果的相对标准偏差值小于0.6%,用标准加入法作回收试验,回收率结果在94.7%～101.3%之间.     

高效液相色谱法测定血小板释放的5-HT

用HPLC／ECD法,采用国产10cmC18柱,测定激活因子诱导的血小板5－HT释放反应。日内变异系数为4.65％。线性范围为0.0025～1mg／L。方法具有速度快、灵敏度高、特异性强、样品制备简便、所需作本量少、试剂成本低等优点,能准确反应血小板做活状况,可应用于其它生物样本。     

反相高效液相色谱法在合成四苯基银桥联吡喃盐中的应用

建立了用反相高效液相色谱跟踪吡喃盐结晶过程的方法。采用HiQSilC18KYATech色谱柱，以乙腈：四氢呋喃：水=80：10：10(V／V／V)混合溶液为流动相，流速1．0mL／min，检测波长325nm。银桥联多苯基吡喃盐晶体，在1～200mg／L范围内与峰面积有很好的线性关系，相关系数r=0．9998。该方法对结晶前反应液中生成的吡喃盐进行了定性判断，同时对不同反应条件下的吡喃盐浓度变化进行了定量比较，明确了各因素对反应的影响，获得了满意的结果。     

人血清中吗啡含量的高效液相色谱法测定

采用C18 色谱柱 ,体积比70∶30的甲醇 -0.02mol·L-1 磷酸二氢钾缓冲液 (含0.001mol·L-1 三乙胺 ,pH=6.60)作流动相 ,紫外检测波长230nm ,可待因作内标 ,建立了反相高效液相色谱法测定人血清中吗啡含量的方法 ;对流动相、样品预处理和储备液稳定性进行了考察 ,提出用乙酸乙酯直接萃取血清中的吗啡 ,所得样品稳定性好 ,萃取回收率为74 %～80 %;该法快速 ,适于生物样品中吗啡含量的测定。     

反相高效液相色谱法分离制备蜂毒肽类似物

应用高效制备液相色谱法，对5种合成的蜂毒肽类似物分离制备。当用极性较强的洗脱液做流动相时，主峰的保留时间短，且主峰和前后的杂质峰不能很好的分开；随着洗脱液极性减弱至某一值时，主峰和杂质峰的保留时间均向后延长，且时间间隔加大，可以成功地对多肽样品进行分离制备。有多肽分子中各氨基酸保留常数加和值的方法可以预测不同多肽的保留时间，为选择分离纯化多肽所需的流动相提供了参考作用。经半制备分离纯化后的产物用分析型RP－HPLC测定达到了很高的纯度，氨基酸分析结果表明得到了所需的肽段，可以用于下一步的研究工作。     

免疫亲和柱净化、在线电化学衍生化高效液相色谱法检测花生中的黄曲霉毒素

 采用免疫亲和柱净化、在线电化学衍生化高效液相色谱法测定了花生中黄曲霉毒素（AFT）B 1,B2,G1和G2。以体积分数为80%的甲醇提取样品中的AFT,经免疫亲和柱净化洗脱 后,以Kobra Cell装置在线衍生,反相HPLC分离定量。4种毒素的分离在13 min内完成,检 出限均达到0.1 μg/kg。5次测定花生样品的RSD值为9.2%～15%;样品添加标样0.5 ～9.0 μg/kg,回收率为74.8%～97.3%。     

反相高效液相色谱法测定烧伤大鼠体内的肠三叶因子

 采用反相高效液相色谱法测定烧伤大鼠体内的肠三叶因子 (ITF) ,其中色谱柱为HypersilC4柱 ( 4 6mmi.d .× 2 5 0mm ,柱填料的孔径为 3 0nm ,粒度为 5 μm) ,流动相为乙腈 水 (含体积分数为 0 1%的三氟乙酸 )溶液 ,梯度洗脱 ,流速为 1mL/min。在 2 14nm检测波长下 ,ITF在 1mg/L～ 10 0mg/L时具有良好的线性关系 ,相关系数为0 9989,最低检测限为 0 5mg/L。ITF的加标回收率为 93 95 %～ 10 5 90 % ,日内测定结果的RSD <5 3 3 % ,日间测定结果的RSD <6 10 %。方法准确、灵敏 ,可作为一种有效的分析手段。