离体培养的人胎儿胃成纤维细胞的转化

用紫外线和乙基亚硝基脲先后处理离体培养的正常人胎儿胃细胞,建立了能长久传代的GTS 8502细胞系。该细胞具有典型的转化细胞的特征:核外形不规则、核质比大,核仁增多;细胞表面微绒毛较多;生长指数和分裂指数高;能形成明显的转化灶;在软琼脂培养基中能长成克隆;细胞膜蛋白性质改变;染色体异倍化,异常染色体频繁出现,异种接种肿块诱发率高。电子显微镜观察和组织化学分析等多种结果表明GTS 8502源于成纤维细胞。正常人细胞的体外转化的成功率很低。两种致癌物的协同作用,可提高转化率,从而可能使人细胞的转化成为检测环境致癌物的有效手段。哺乳类细胞的体外转化,多以啮齿类细胞为材料。也有不少实验室从事正常人细胞的体外转化试验,但成功报道仍属罕见。本实验室用两种致癌物先后处理离体培养的人胎儿胃细胞,选出转化细胞后继续培养,迄今已传至80余代,细胞形态及其他生物学特性稳定。该细胞系波命名为GTS 8502。     

人体肺腺癌细胞系——SPC-A-1的建立及其生物学特性

从一例男性原发性肺腺癌患者手术中,取得胸膜转移结节,经离体培养建成细胞系,定名为:SPC-A-1。对本系细胞进行生物学特性的观察分析的结果是:细胞群体的倍增时间约30小时,细胞形态以多形性上皮样细胞为主。在电子显微镜下,细胞表面具多量微绒毛,细胞核形态不规则,胞质内有粘液性分泌颗粒和类似于肺泡Ⅱ型上皮细胞的板层体,张力原纤维束以及细胞间的桥粒结构。细胞的染色体众数范围为75—80,其中均有一对异常长的具有亚中着丝点的染色体。动物异种移植形成恶性肿瘤结节,其组织结构与该病例的临床肺腺癌标本相似。PAS和粘液卡红染色反应阳性。以上特性表明:本细胞系是一个人体原发性肺腺癌细胞系。     

人直肠腺癌细胞系——HR-8348的建立和生物学特性

从一例男性直肠腺癌患者手术后,取得原发癌肿组织,经离体培养建成细胞系,定名为HR-8348。对本系细胞进行生物学特性的观察分析结果是:细胞在对数增殖期的倍增时间为36.05h,细胞分裂指数在第三天达高峰,为44.5‰。细胞形态以多边形上皮样细胞为主,在电子显微镜下可见细胞核及核仁呈恶性细胞特征,细胞表面有微绒毛.细胞核形态不规则,胞浆中核蛋白体较丰富,可见分泌颗粒,在少数细胞可找见张力原纤维柬以及细胞间的桥粒结构。AB染色反应阳性,细胞在半固体琼脂中集落形成率为12.9％。细胞在1μg/ml的PHA中即有凝集反应。细胞的染色体众数范围为69—75,有长的亚近端着丝点标记染色体。用定性和定量分析均证实该细胞具有分泌CEA的能力。小鼠皮下移植形成恶性肿瘤结节,其组织结构与该病例的临床直肠癌标本相似,该细胞系经多次检查未发现支原体污染。     

硒酸酯多糖抗石英细胞毒性的研究

本文采用家兔肺泡巨噬细胞体外培养法，以ＡＲ－ＣＭ阳离子测定系统和荧光试剂Ｆｕｒａ－２，研究了石英细胞毒性与肺泡巨噬细胞胞胞浆游离Ｃａ＾２＋浓度（［Ｃａ＾２＋］ｉ）的关系，并以细胞存活率，乳酸脱氢酶活性和脂质过氧化物表征了由石英引起的ＡＭ毒性及硒酸酯多糖对其毒性的拮抗效应，初步讨论了硒酸酯多糖拮抗石英细胞毒性的可能机理。     

人多发性骨髓瘤接种裸鼠皮下诱发裸鼠B淋巴细胞恶性转化

本文报道,用一例人多发性骨髓瘤患者的骨髓穿刺液接种于BALB/C/nu裸鼠皮下,然后用皮下新生肿物做细胞培养,结果人癌组织诱发了裸鼠本身B淋巴细胞恶性转化,意外地在体外建立了裸鼠B淋巴细胞传代细胞系,这个细胞系定名为NLB-SK。目前该细胞系已在体外培养十个月,传代72次,冻存后复苏良好。根据其细胞生物学特性,推测裸鼠B淋巴细胞恶性转化可归因于人恶性肿瘤细胞和裸鼠正常体细胞之间的水平致癌作用。     

卵磷脂抗石英毒作用的研究

本文采用家兔肺泡巨噬细胞(AM)体外培养法,以细胞内游离钙浓度([Ca~(2+)]_i)、细胞存活率、乳酸脱氢酶(LDH)和酸性磷酸酶(ACP)活性为指标,观察了卵磷脂、脑磷脂及现用防治硅肺药物克矽平(PVPNO)、柠檬酸铝等抗石英毒效果。结果表明:卵磷脂在所试各药物中效果最佳.初步探讨了卵磷脂拮抗石英细胞毒性的机理.卵磷脂有成为防治硅肺药物的可能性.     

小鼠粒细胞白血病细胞体外细胞系L_(833)的建立及其生物学特性的研究

本文用小鼠可移植性粒细胞白血病瘤株L_(801)的骨髓细胞,经体外培养建立了粒细胞白血病细胞系(株),定名为L(833)。三年来在体外已传至280余代,细胞生长迅速稳定,经不同途径动物接种致瘤率均为100％。经细胞学、细胞化学、病理学和超微结构等检查,均证明本细胞系(株)仍为粒细胞白血病细胞。L_(833)细胞系细胞染色体分析证明仍然是亚二倍体,众数39条,Y染色体丢失和存在一个标记染色体。L_(833)-A和L_(833)-B(利用半琼脂法分选出的细胞集落定名为A和B)染色体除了上述变化外,还各自存在一个标记染色体。本系细胞对所用各类抗癌药物均有不同程度的敏感性。对辐射(γ线)也很敏感,L_(833)和L_(833)-A的D_0值分别为98.8和104.9 rad。其结果和L_(801)基本是一致的,它的建立不但对于深入研究白血病和其药物筛选等有重要意义,而且利用体外瘤株进行有关研究更直观、经济和易于进行精确定量研究。     

生物荧光氧化硅纳米颗粒的研制与应用

运用OP-10(壬基酚聚氧乙烯醚)/环己烷/氨水微乳液自组装体系合成了罗丹明B嵌入的荧光氧化硅纳米颗粒.通过电镜检测、光谱分析以及荧光猝灭试验研究了荧光颗粒的特性.将荧光纳米颗粒与培养细胞共培育后,通过激光扫描共聚焦显微镜和流式细胞仪研究了不同时间点细胞内荧光信号和荧光强度.结果表明,合成的荧光氧化硅纳米颗粒粒径小（约20 nm）,分布均匀,形态规则,表面光滑圆润,发光性质稳定.它可被体外培养细胞有效摄入,并可在培养细胞中检测到较强的荧光信号和较高的荧光强度.这提示生物荧光氧化硅纳米颗粒在细胞生物学、超微化学与免疫检测等领域将具有重要应用前景.     

人胎盘的生殖内分泌学研究——Ⅱ.细胞滋养层细胞的激素分泌功能

本文采用了无血清培养技术,研究了细胞滋养层细胞在体外分泌hCG、孕酮、雌激素、cGnRH和β-内啡肽的功能,在8天的培养中发现,细胞滋养层细胞在培养24h去除内源激素后能持续地分泌少量的hCG;与此不同,孕酮的分泌量逐日上升,第6天的孕酮分泌量为第1天的两倍;在外加雌激素的前身物雄烯二酮的情况下,细胞能合成雌激素,其产量亦是逐日上升,反映出细胞芳香化酶活性的不断提高,这种酶活性的提高与雄烯二酮的存在与否无关;在两种滋养层细胞培养中,唯有细胞滋养层细胞培养液中测得有cGnRH,产量以第2天为最高,接近4pg/10~5个细胞,合体滋养层细胞在离体下能分泌β-内啡肽,但其产量逐日下降,与此相反,细胞滋养层细胞的培养液中不但测到β-内啡肽的存在而且其含量在培养4—6天间明显上升。     

镧钐铕及镱对体外培养人二倍体细胞的作用

本文报道镧、钐、铕和镱的氯化物对体外培养人二倍体细胞的作用。实验结果表明小剂量的LaCl_3,SmCl_3,EuCl_3及YbCl_3对人二倍体细胞无毒性作用,对细胞的生长有一定的促进作用;剂量为1mmol/L的四种化合物对人二倍体细胞的毒性与对照相比无明显差异。表明小剂量的四种稀土氯化物对体外培养人二倍体细胞和人癌细胞之间的反应性存在着差异,这种差异主要与两种细胞膜及表面结构不同有关。     

核酸适配体在多肽研究中的应用

多肽在生命体的生理过程中发挥着重要作用,其生理功能一直是生物学、药理学和医学等领域的重要研究内容.核酸适配体是经体外筛选获得的单链DNA或RNA,能与靶标高亲和力、高特异性地结合,有"化学抗体"或"化学家的抗体"之称.以多肽为靶标筛选获得的核酸适配体主要有两大用途:一是基于其识别功能,作为亲和试剂来建立分析检测方法或开展生物成像研究;二是基于它们的生物学活性,作为拮抗剂在活体水平影响靶标多肽的正常功能,阻碍下游信号通路,从而对疾病进行治疗.本文总结了近年来以多肽为靶标筛选的核酸适配体在体内及体外的用途,并探讨了其在筛选、表征及应用中存在的问题,并对其未来的发展趋势进行了展望.     

选择性识别平行性G-四联体的方酸类近红外荧光探针的研究

G-四联体是抗肿瘤药物筛选的一个重要靶点.开发针对某些拓扑结构的G-四联体荧光探针对于研究其结构和生物学功能具有十分重要的意义.设计、合成了四个方酸类花菁荧光染料即CSTS,CSBE,CSEM和CSBM,并检测了其对不同类型DNA的选择性识别作用.结果表明,所合成的四个化合物在缓冲溶液中几乎没有荧光发射,加入正平行G-四联体之后荧光增强大约1 000倍;而加入反平行G-四链体或单双链DNA荧光仅仅增强几十倍,说明其可以特异性识别平行G-四联体.但流式实验结果显示,CSTS不能透过细胞膜,同时存在高荧光背景的缺点,因此无法应用于活体分析.而另外三个不带阴离子侧链的衍生物则容易进入细胞,进入细胞的难易顺序为CSBECSEMCSBMCSTS.高选择性、低背景荧光和易进入细胞等优点使CSBE具有作为近红外荧光探针检测生物样品中正平行G-四联体的潜力.     

对-(二乙氨基)苯基锗倍半氧化物的合成及对体外培养癌细胞的作用

β-羧乙基锗倍半氧化物(Ge-132)的无毒广谱抗癌作用以及潜在的治疗艾滋病的功能~[1～3]促进了Ge-132及其衍生物合成及生物活性研究~[4～6],而对锗原子直接与苯环及其衍生物连接的有机锗倍半氧化物的研究则相对较少.我们曾报道了~[7]p-(二甲氨基)苯基锗倍半氧化物的合成、结构及对癌细胞的作用,p-(二乙氨基)苯基锗倍半氧化物的研究尚未见报道.本文采用改进的方法合成了p-(二乙氨基)苯基锗倍半氧化物(Ge-164).通过元素分析、IP、XPS和TG-DTA确定了组成和结构,观察了它对体外培养人乳腺癌细胞有丝分裂的影响.     

人体恶性胸膜间皮瘤细胞系SMC-1的建立和生物学特性

本文报道以一例混合型人体恶性胸膜间皮瘤手术切除标本,经体外培养和建成一长期传代的细胞系,命名为SMC-1.该系细胞呈多形性,具有明显的重叠性生长特征.细胞群体倍增时间约32小时,最高分裂指数达46—50%,染色体众数为69—70.异种移植可产生类似原培养材料组织结构的肿瘤.培养细胞、异种移植之肿瘤及原培养材料三者具有同一的组织化学特征.这些说明这是一例人体恶性胸膜间皮瘤细胞系.SMC-1细胞系的建成,对研究愈后极为凶险的恶性间皮瘤提供了有利条件。     

二维平面细胞微图案化技术及其生物学应用

可以控制细胞粘附形状、大小的方法统称为细胞图案化技术.这些方法结合微纳米制备、表面化学、电化学和光化学等手段可以动态控制细胞的粘附、迁移、分化及其相互作用,为细胞生物学研究提供了一个新平台.本文介绍了二维平面细胞图案化的各种方法,并对其优缺点进行了总结,评述了细胞图案化技术在细胞生物学基础研究、组织工程以及基于细胞的生物传感器领域的应用.     

低剂量氯化镨对体外培养大鼠胰岛β细胞分泌胰岛素的影响

以体外培养的大鼠胰岛细胞为对象，利用放射免疫检测技术，免疫组织化学技术及透射电镜观察低剂量PrCl3对胰岛β细胞分泌胰岛素功能的影响，当PrCl3浓度分别为0．01和0．1mmol.L^-1时，培养液中胰岛素含量及培养孔内β细胞数目明显高于对照组，对体外培养的大鼠胰岛β细胞分泌胰岛素具有促进作用。     

合成生物学展望

近年来,合成生物学快速发展成为一个新兴交叉学科领域,研究重点逐渐由基因线路、简单元件和模块的设计构建转向设计与构建复杂的人工生物系统.本文阐述了合成生物学与化学工程学科的内在联系,并从基因组的人工设计合成与编辑、人工细胞的设计合成、人工合成多细胞体系及其应用等方面展望了未来合成生物学的发展趋势.     

β—（酚酯基）乙基锗倍半氧化物的合成及对体外培养细胞的作用

β-羧基乙基锗倍半氧化物(即Ge-132)是一种无毒和具较强抗癌活性的有机锗化合物。为了进一步提高其抗癌活性。已对Ge-132进行了化学结构修饰。本文介绍8种未见报导的Ge-132衍生物,β-酚酯基乙基锗倍半氧化物的合成和体外培养细胞实验结果。     

用于肝细胞球形聚集体培养的生物材料*

在进行与肝脏疾病治疗的相关研究中,肝细胞的体外培养是一个关键的问题。由于微环境的变化,肝细胞容易在体外培养中逐渐丧失正常表型和肝特异性功能。研究发现,在适当条件下,肝细胞可以形成多细胞球形聚集体,肝细胞在球形聚集体中呈现出与体内形态相仿的立体结构,细胞的表型和功能都得到了较好的维持。因此,如何调控肝细胞球形聚集体的形成以及尺寸形貌,得到具有高细胞密度、能在体外长时间保持高水平肝特异性功能的肝细胞球形聚集体是这方面研究的热点。本文对近年来肝细胞球形聚集体培养的研究成果进行了综述。首先介绍了肝细胞在体内的生长环境和肝脏的细胞结构,然后对培养肝细胞的生物材料各方面的性质,如材料的化学组成、表面电荷、亲疏水性质、表面形貌以及立体结构对肝细胞球形聚集体的影响进行了阐述。同时也简要介绍了其他一些因素对肝细胞球形聚集体培养的影响。最后,对肝细胞球形聚集体培养的研究进展进行了总结和展望。     

智能凝胶在细胞三维培养中的研究进展

与传统的体外二维细胞培养(2D培养)相比,体外三维细胞培养(3D培养)因能更好地模拟细胞外基质(ECM)而备受关注。智能水凝胶不仅具有良好的生物相容性,其特殊的结构性能能有效模拟细胞外基质,实现细胞3D培养,而且通过智能凝胶简单的响应性,可以改变细胞生长的微环境,实现在三维空间内对细胞进行特异性的培养和研究。本文基于智能凝胶和细胞3D培养,综述了智能凝胶的类型、在细胞3D培养中的应用,以及智能凝胶对细胞生长和行为的影响。