固定化细胞酶法拆分N-乙酰-D,L-3-甲氧基丙氨酸

利用氨基酰化酶固定化细胞酶法拆分了N-乙酰-D,L-3-甲氧基丙氨酸. 考察了温度、pH值、底物浓度、金属离子和拆分时间对酶促反应的影响. 确定了氨基酰化酶固定化细胞手性拆分N-乙酰-D,L-3-甲氧基丙氨酸的最佳工艺条件为pH=7.0, 反应温度50 ℃及底物浓度500 mmol/L. 10^-4 mol/L的Co²⁺和Mg²⁺对氨基酰化酶有显著激活作用, Cu²⁺和Zn²⁺对酶促反应有明显抑制作用. 在最佳条件下, 氨基酰化酶固定化细胞对N-乙酰-L-3-甲氧基丙氨酸的摩尔转化率达96%.     

聚苯乙烯支载N—烷基—N—苄基氨基吡啶的合成及催化活性研究

本文以聚苯乙烯氯球为原料，通过与4-氨基吡啶及烷基化试剂反应，制成聚苯乙烯支载N-烷基-N-苄基氨基吡啶催化剂。通过醇的酰化反应，对其催化活性进行了研究。     

树枝状大分子聚酰胺-胺用于氨基酰化酶的固定化研究

以树枝状大分子修饰的硅胶为载体,戊二醛为交联剂,对氨基酰化酶进行固定化研究。考察了树枝状大分子的代数、戊二醛浓度、反应温度与时间对氨基酰化酶固定化效果的影响,并且考察了该固定化酶的最佳酶解条件。结果表明,随着树枝状大分子代数的增加,固定化的酶量随之增大,同时,固定后的酶仍然保持较高的活性。     

高分子载体对米曲霉氨基酰化酶的固定化研究

合成了一系列不同结构的丙烯酸甲酯—二乙烯基苯交联共聚物,并用多乙烯多胺胺解制得了功能基化交联共聚物。研究了交联度、致孔剂用量和不同的功能基化试剂对这些载体固定化氨基酰化酶效果的影响。比较了固定化氨基酰化酶与溶液酶的酶学性质。用这种载体制成固定化酶柱,对N—乙酰—DL—蛋氨酸和N—乙酰—DL—苯丙氨酸进行连续拆分,得到了很好的效果。     

4-乙酰苯胺磺酸酯类化合物的合成研究

本文合成了新型离子负载双(三氟乙酰氧基)碘苯(BTI)试剂,并将其用于催化乙酰苯胺的磺酰化反应,以较高产率选择性合成了对甲苯磺酸4-乙酰氨基-苯基酯化合物。考察了氧化剂、溶剂、添加剂、温度等条件对乙酰苯胺的磺酰化反应的影响。反应完全后离子负载的BTI试剂可回收,经再生并循环利用三次后,其反应活性几乎保持不变。     

米曲霉氨基酰化酶在聚乙二醇/盐双水相系统中的分配

本文对氨基酰化酶在由聚乙二醇/盐组成的双水相系统中的分配进行了研究。氨基酰化酶在双水相系统中的分配系数受系统中聚乙二醇平均分子量及浓度、盐的种类及浓度、pH值、外加盐及带电聚乙二醇等因素的影响。它为大规模提取纯化氨基酰化酶提供了一种有希望的方法。     

大孔载体对米曲霉氨基酰化酶的固定化研究

用合成的大孔丙烯酸甲酯-—二乙烯苯交联共聚物(聚丙烯酸甲酯)、丙烯酰胺-N,N′-亚甲基双丙烯酰胺交联共聚物(聚丙烯酰胺)及它们的功能基化产物作为固定化氨基酰化酶的载体。考察了载体性质对固定化氨基酰化酶效果的影响。比较了底物浓度、pH、磷酸缓冲液浓度、温度对氨基酰化酶溶液酶及固定化酶的影响。利用其中一种载体制成固定化酶柱,对DL-蛋氨酸进行了连续拆分,考察固定化酶的操作稳定性。     

氨基酰化酶在脲溶液中变性时构象变化速度与失活速度的比较

应用了邹氏不可逆抑制动力学的方法,在变性剂存在的条件下,连续监测酶催化的底物反应过程,测定了氨基酰化酶在不同浓度脲溶液中失活的速度常数,并考察了底物的存在对酶失活的保护作用。同时,还比较了氨基酰化酶在不同浓度脲溶液中变性时失活和构象变化的速度。1mol/L,2mol/L脲变性时失活速度常数为为1.62×10~(-2)S~(-1)和2.05×10~(-2)S~(-1),但是酶分子的整体构象尚未发生明显变化。3mol/L脲变性时,失活速度常数为2.56×10~(-2)S~(-1),而变性速度常数为3.72×10~(-3)S~(-1)。失活速度比构象变化速度快大约一个数量级。在4mol/L,5mol/L,6mol/L脲溶液中变性时,酶分子快速失活,而其构象变化速度常数分别为5.27×10~(-3)S~(-1)。5.47×10~(-3)S~(-1),5.56×10~(-3)S~(-1)。可见,在相同浓度的脲溶液中,氨基酰化酶的失活速度明显快于酶分子整体构象变化的速度。上述结果表明,含有辅基金属离子Zn~(2+)的氨基酰化酶的活性部位较酶分子的整体结构也具有一定的柔性。     

核酸化学研究——Ⅱ.N-羧酰咪唑在酰化核糖核苷酸上的应用

N-羧酰咪唑作为酰化试剂单独与核糖核苷酸吡啶盐反应时,主要形成核糖核苷-2',3'-环磷酸或其与羧酸的混合酸酐,但是当有N,N'-二环已基吗福啉碳酰胺亚胺或无水氢氧化四乙基铵存在时,不仅可以抑制核苷酸的2',3'-环磷酰化,而且大大加快了核糖羟基和杂环氨基的酰化反应速度和反应的完全程度.羧酰咪唑试剂已应用于各种核糖核苷酸的乙酰化、异丁酰化、苯甲酰化反应.与羧酸酐和苯甲酰氰相比较,本试剂的优点在于反应速度快,副反应少,产物纯,得率高.根据产物的分离和鉴定以及³¹ P 脉冲核磁共振谱的变化初步证明,当苯甲酰咪唑与3'-尿核糖核苷酸吡啶盐在二甲基甲酰胺中反应时,一般情况下先迅速形成核苷酸-苯甲酸的混合酸酐,然后转化为核苷-2',3'-环磷酸,再进一步完成5'-羟基的苯甲酰化.若有N,N'-二环已基吗福啉碳酰胺亚胺或氢氧化四乙胺存在时,则核糖核苷酸的杂环氨基和核糖部分上的羟基都发生酰化,而且形成混合酸酐但不出现环核苷酸.     

水溶性双冠醚的合成

双冠醚与较大的金属离子能形成夹心型络合物,与相应的单冠醚相比较,它们具有更好的络合性和选择性。但双冠醚一般不溶于水中。本文用EDTA二酐与4'-氨基苯并-12-冠-4及4'-氨基苯并-15-冠-5反应,制得了两种在桥键上带有两个羧基的酰胺型双冠醚Ⅰ和Ⅱ。Ⅰ、Ⅱ未见报导,均能溶于水,这就可以象其它水溶性单冠醚一样,在水溶液中研究它们的络合行为。     

具有酰胺键的离子负载双(三氟乙酰氧基)碘苯对乙酰苯胺类化合物的乙酰氧基化反应

以氯乙酰氯、N-乙基对碘苯胺为原料,经酰化反应合成了N-乙基-N-(4-碘苯基)氯乙酰胺,接着与1-甲基咪唑反应,随后在水溶液中和四氟硼酸钠发生阴离子交换,合成了四氟硼酸1-甲基-3-(N-乙基-4-碘苯氨基甲酰甲基)咪唑鎓盐,该四氟硼酸盐在过氧化氢/三氟乙酸酐体系中氧化得到一种新的离子负载的双(三氟乙酰氧基)碘苯试剂四氟硼酸(1-甲基-3-{N-乙基-4-[双(三氟乙酰氧基)碘]苯氨基甲酰甲基}咪唑鎓盐)。所合成的碘苯试剂没有吸湿性,在空气中长期放置不变质。以这种新试剂为氧化剂,室温下乙酰苯胺及其衍生物与乙酸区域选择性地发生乙酰氧基化反应,产率较高。该离子负载型碘苯试剂可回收后再生,而再生试剂用于乙酰氧基化反应时活性几乎保持不变。     

天花粉蛋白中色氨酸肽键的化学降解研究

用BNPS-Skatole试剂,对琥珀酰化天花粉蛋白的胰白酶酶解肽片段TIG2进行了色氨酸肽键的化学降解。分离纯化了降解反应所生成的肽片段,并测定了新产生的N-端肽片段的氨基酸排列顺序。     

大孔阴离子树脂DEAE-E/H固定化氨基酰化酶的研究

以弱碱性大孔阴离子树脂DEAE-E/H为载体固定化氨基酰化酶.通过对影响固定化结果的几个因素,如树脂的离子类型、pH值、温度,以及自由酶液浓度等进行系统研究,得到了适宜的固定化条件:将DEAE-E/H转化为Ac-型;自由酶液浓度120U/ml,pH值6.5;固定化温度为常温.在此条件下制备的固定化氨基酰化酶比酶活可达1200U/g～1500U/g,酶活保留率超过60%.DEAE-E/H作为固定化载体,具有价格低廉,物理性能好,固定化方法简便等特点,具有很好的工业应用前景.     

膦酰化肟对乙酰胆碱酯酶的抑制作用及中毒酶重活化特性研究——基于效应标志物质谱定量分析技术

将对氧磷(Paraoxon)与肟类重活化剂双复磷(Obidoxime)反应制得膦酰化肟(DEP-obidoxime);利用基于效应标志物的质谱定量技术研究了膦酰化肟对乙酰胆碱酯酶(AChE)的抑制作用及中毒酶的重活化特性.结果表明,膦酰化肟具有极强的AChE抑制毒性,但因膦酰化肟中毒酶与原有机磷毒物中毒酶结构相同,故其膦酰化AChE仍可被经典重活化剂[如氯解磷定(Pralidoxime)、双复磷(Obidoxime)及酰胺磷定(HI-6)]重活化,根据EC_(50)表征结果,这3种重活化剂的重活化效果强弱顺序依次为氯解磷定HI-6双复磷.     

非水介质中曲克芦丁乙烯酯的酶促合成

在非水介质中,选择性催化曲克芦丁羟乙基上的伯羟基发生酯交换反应,合成一系列曲克芦丁乙烯酯.同时考察了酶源、酶量、反应介质、酰化试剂链长、溶剂含水量、反应时间等因素对曲克芦丁酶促酯交换反应区域选择性的影响.结果表明:以吡啶为溶剂,其含水量1%时,枯草杆菌碱性蛋白酶催化活性最高,随着酰基供体碳链的减少,产率增大,且反应达平衡的时间缩短.     

铜催化的5-氯-8-氨基喹啉导向的邻位磺酰化

砜是天然产物和活性分子中常见的结构,也是合成反应的重要中间体.利用5-氯-8-氨基喹啉(AQ')作为双齿导向基团,以各种芳基亚磺酸钠为磺酰化试剂,通过铜催化实现了邻位C(sp2)—H直接磺酰化.该反应具有较高的官能团兼容性和广泛的底物范围,适用于具有双取代基和稠环的底物.另外,AQ'作为双齿导向基团易于脱去,为合成砜类...     

亚油酸酰化胰岛素的制备及飞行质谱分析

胰岛素侧链氨基的酰化是胰岛素化学修饰较常用的方法。天然胰岛素分子中有三个裸露的氨基,即G lyA1、PheB1的α-氨基和LysB29的ε-氨基,都可作为胰岛素化学修饰的位点。酰化试剂通常经由N-羟基琥珀酰亚胺酯对胰岛素进行修饰。N-羟基琥珀酰亚胺酯可由羧酸与N-羟基琥珀酰亚胺(HOS     

酰异硫氰的研究——Ⅲ.芳酰异硫氰与酚类及活泼亚甲基化合物的反应

1. 芳酰异硫氰与酚类作用时,反应一般以两种类型进行,即酰化与加成。某些情况下酰化反应占优势。但是硝基酚能够顺利地与芳酰异硫氰起加成反应。所得到的酰氨基硫代甲酸酚酯均为有一定熔点的良好晶体。2. 鄰氨基酚与芳酰异硫氰作用时,由氨基起加成反应得到对应的芳酰基硫脲。3. 含活泼亚甲基的化合物,如乙酰乙酸乙酯及丙二酸二乙酯,与对溴苯甲酰异硫氰作用时,可以得到亚甲基上活泼氢原子与试剂起加成反应的产物。     

胆酸酯及其甲基丙烯酸衍生物的制备

以HCl为催化剂,合成了脂肪族二元醇单胆酸酯(2~5)。运用甲基丙烯酰氯和甲基丙烯酸酐作酰化试剂,三乙胺作缚酸剂,4-(二甲氨基)吡啶作催化剂,合成了分子中含有不同数量甲基丙酰基的胆酸衍生物(6~9)。实验结果表明,当用甲基丙烯酰氯作酰化剂时,2~5分子中羟基的反应活性顺序是:CH2-OH>3-OH>12-OH>7-OH。     

有机磺酰氯参与的磺酰化及脱磺酰化反应

作为一类活泼的亲电试剂,有机磺酰氯参与的脱磺酰化偶联反应已经发展成为一个新的研究热点.在适当的温度以及钯等过渡金属络合物的催化下,磺酰氯可以和多种亲核试剂发生脱磺酰化偶联反应,并在一些重要有机合成反应中显示出良好的应用前景.有鉴于此,特就过渡金属催化下磺酰氯的脱磺酰化交叉偶联的研究进展进行简要的评述,并与相应的磺酰化反应进行对照,以其找出脱磺酰化偶联的关键因素,为以后的相关研究提供参考.