天然抗癌药物-紫杉醇

紫杉醇是目前最新的具有很好疗效的抗癌药物，本文对自紫杉醇发现以来的研究进展进行了比较详尽的综述。包括以下几个部分：1．紫杉醇的发现和历史：2．紫杉醇的药效；3．紫杉醇的来源；4．紫杉醇的生物合成途径及其相关酶基因的研究。     

紫杉醇生物合成途径及其相关酶的研究进展

紫杉醇的生物合成过程已基本阐明,其合成以NB028牛儿基NB028牛儿基二磷酸为前体约需20步酶促反应,近一半的相关酶基因已得到克隆与表达.综述了紫杉醇生物合成及生物合成途径中9个酶基因的克隆和表达方面的研究进展,并指出随着紫杉醇生物合成分子生物学研究的不断深入,利用分子生物技术大规模生产紫杉醇将为期不远.     

天然抗癌药物--紫杉醇

介绍了人们在不断提高天然植物红豆杉——紫杉醇提取技术的同时，利用人工栽培、半合成、全合成、生物合成、真菌发酵、植物组织细胞培养等现代科技手段获取紫杉醇，为解决天然资源的严重不足和紫杉醇的临床应用提供了可能．     

肝素-紫杉醇抗癌药物系统的合成及其对癌细胞生长抑制的研究

为解决紫杉醇作为抗癌药物水溶性差毒性大的缺点,采用天然生物大分子肝素为载体,利用其具有良好的生物相容性、生物降解性以及良好的水溶性特征,选用三种带有不同a-取代基的氨基酸作为连接臂,设计合成了一类新型肝素-氨基酸-紫杉醇药物输送系统,目标产物用1H NMR进行了结构表征.体外水解动力学测试结果表明该系统水溶性好,MTT法测试结果表明所有化合对MCF-7(乳腺癌细胞)细胞毒活性优于紫杉醇.     

紫杉醇生物合成代谢调节方法的研究

通过实验研究了紫杉醇生物合成代谢调节方法衣一些相关调节因子的作用效果。结果表明,５’－ＡＭＰ对紫杉醇生物合成有显著抑制作用,而外加一定水平ＡＴＰ（５０ｍｇ／Ｌ）对紫杉醇合成有促进作用,因此,蛋白质磷酸化要比其去磷酸化调节更有利于紫杉醇合成。而生产培养基中加入２．５ｍｇ／Ｌ的三十烷醇使培养体系中紫杉醇产量提高１４倍,而加入１３．４ｍｇ／Ｌ的苹果酸使培养体系中紫杉醇产量提高了１５．２倍。此外,α－蒎烯     

抗癌药物长春新碱的研究进展

长春新碱是从草本植物长春花中提取出来的重要次生代谢产物,是应用最广的天然抗癌药物。综述长春新碱提取、分离纯化、含量测定、生物合成与代谢调控对其药效的影响,以期为长春新碱规模化生产和有效利用提供依据。     

细胞培养生产紫杉醇研究进展

紫杉醇是红豆杉植物所含有的最为有效的抗癌药物．介绍了对当前国内外利用红豆杉细胞培养生产紫杉醇的最新研究进展,其中着重介绍了提高紫杉醇含量的各种研究方法和研究技术,同时对细胞培养生产紫杉醇的规模化生产做出展望．     

紫杉醇生物合成代谢调节方法的研究

通过实验研究了紫杉醇生物合成代谢调节方法及一些相关调节因子的作用效果.结果表明,5＇-AMP对紫杉醇生物合成有显著抑制作用,而外加一定水平ATP(50mg/L)对紫杉醇合成有促进作用.因此,蛋白质磷酸化要比其去磷酸化调节更有利于紫杉醇合成.在生产培养基中加入2.5mg/L的三十烷醇使培养体系中紫杉醇产量提高了14倍,而加入13.4mg/L的苹果酸使培养体系中紫杉醇产量提高了15.2倍.此外,α-蒎烯与松油醇及樟脑三种物质同时添加对紫杉醇生物合成的促进作用比各物质单独使用效果更好.     

微生物发酵法生产紫杉醇研究进展

紫杉醇是目前最新的具有很好疗效的抗癌药物,其化学结构新颖,作用机理独特。生产制备它的方法很多,微生物发酵生产紫杉醇是最好的方法＾〖１〗。本文对国内外期刊有关微生物发酵生产紫杉醇的研究作了综述,并提出了几种有可能提高其表达率的方法。     

紫杉醇生物合成与营养物质消耗的相关性

为利用现代生物技术生产紫杉醇,研究细胞悬浮培养过程中紫杉醇的生物合成,研究了细胞生长与培养液中主要营养物质的消耗情况。在Gamborg'sB5培养液中加入诱导子,对本实验室诱导筛选出的东北红豆杉B10细胞进行悬浮培养。结果发现,在诱导子的作用下,细胞内紫杉醇的含量在4d内大幅度提高,其中主要是促进了紫杉醇的两种前体化合物向紫杉醇的转化;细胞内高含量紫杉醇影响细胞的生长,可以采用两段培养法来提高紫杉醇的产量;同时,培养液中蔗糖、氮、磷、钾、镁等主要营养物质的消耗与紫杉醇的生物合成也存在密切的联系。     

紫杉醇与褪黑素联合使用对HeLa细胞的生长影响研究

目的：研究紫杉醇与褪黑素联合应用对HeLa细胞的生长影响。方法：通过生长曲线、集落形成试验观察二者联合应用对HeLa的影响作用。结果：单独应用紫杉醇和褪黑素与二者联合应用其生长曲线、集落形成试验的结果无明显差别。结论：紫杉醇与褪黑素联合应用对HeLa细胞的生长影响与单独应用二者无明显差别。     

固定化微环境对南方红豆杉细胞生长

研究了固定化微环境对南方红豆杉细胞生长和紫杉醇合成的影响，结果表明：固定化细胞停滞期缩短，细胞膜脂氧合酶活性和脂过氧化产物含量远远高于悬浮细胞，同时苯丙氨酸解氨酶活性显著增加，微环境溶液内紫杉醇含量与悬浮细胞有显著性差异. 研究表明固定化微环境能促进红豆杉细胞紫杉醇含量增加但对细胞膜脂产生了过氧化.     

云南红豆杉细胞培养和紫杉醇生产

研究了在固体和液体培养条件下云南红豆杉 (Taxusyunnanensis)细胞系TY6生长和紫杉醇积累的动态及培养基中无机氮源形式对其生长的紫杉醇形成的影响 .结果表明 ,在固体和液体培养条件下 ,云南红豆杉细胞的生长和紫杉醇积累动态相似 ,但液体培养时细胞生长周期缩短了 7d,紫杉醇含量降低了 1倍 ;新形成的细胞需要经过一段时间生长后才有较高的紫杉醇合成能力 ;培养基中硝态氮浓度高有利于细胞生长 ,铵态氮浓度高有利于紫杉醇形成 ;在培养第 1 2d时用铵态氮培养基更换硝态氮培养基可使悬浮细胞的紫杉醇产量达到 8.5mg·L- 1 ,比对照高 1 .6倍     

南方红豆杉组织培养和紫杉醇含量测定

比较了从南方红豆杉的芽及幼茎诱导愈伤组织的情况,并对愈伤组织的增殖条件进行了研究,利用HPLC方法测定了愈伤组织合成紫杉醇的能力,结果表明以芽作为外植体在附加2．0mg/L 2,4-D 和0．5mg/L NAA的MS培养基上,产生愈伤组织的速度较快,诱导效果最好,第5天即有愈伤组织发生,且诱导率可达100％,附加0．5mg/L,2,4-D,1.0mg/L NAA和0．5mg/L KT的B5培养基较适合愈伤组织的增殖,生长率达7．74g/L,紫杉醇含量达干重的0．0098％。     

紫杉醇对体外大鼠肝细胞影响的实验研究

目的:在通过观察紫杉醇对体外培养大鼠肝细胞的影响来探讨紫杉醇自身毒副作用.方法:采用四唑盐(MTT)比色法及形态学方法观察紫杉醇在不同质量浓度下作用不同时间对肝细胞的影响;采用Hoechst 33258荧光染色法观察紫杉醇作用后,肝细胞的形态变化.结果:质量浓度分别为5、10、20、40、80μg/L的紫杉醇分别作用24、48、72 h后,随着质量浓度的增加、作用时间的延长对体外培养的肝细胞损伤加大、抑制率增加;相同质量浓度的紫杉醇不同作用时间的抑制率无时间效应关系;24 h的IC50质量浓度为28.5μg/L,并能诱导肝细胞发生凋亡.结论:紫杉醇在一定的质量浓度和长时间作用下对肝细胞有细胞毒作用.     

一株产紫杉醇真菌发酵条件的研究

研究了在一株产紫杉醇真菌的发酵培养中，初始糖浓度、碳源、氮源和前体饲喂对生物量和紫杉醇合成的影响。结果表明，一定氮源和前体饲喂对紫杉醇产量提高有显促进作用。在发酵过程中补加糖也有一定影响。     

质谱直接进样法定性定量检测紫杉醇

介绍了采用质谱直接进样技术测定紫杉醇的方法,与传统的液相法测定紫杉醇技术比较,可降低昂贵的标样使用量,免去流动相的费用.讨论了质谱运行条件的选择和操作中应注意的问题.     

Screening and characterization of a high taxol producing fungus by protoplast mutagenesis

The preparation,regeneration and mutagenesis of the taxol-producing fungus UV40-19 protoplasts werediscussed in the experiment.Totally 42 strains displayed hygromycin resistance.Six strains were found tobe positive mutants when screened on plate containing 90/ig/mL hygromycin.One hereditarily stablestrain UN0.5-6 was obtained,which raised the taxol yield from(376.38 ± 8.41)μg/L to(493.12 ± 11.36)μg/L.The optimal conditions for the preparation,regeneration and mutagenesis of the taxol producingfungus UV4...     

代谢途径的调节对紫杉醇生物合成的促进作用

通过采用一些代谢调节剂,研究了红豆杉细胞中一些初生代谢途径以及甲瓦龙酸（ＭＶＡ）途径与紫杉醇生物合成的关系,并对这些调节剂的协同作用进行了工艺研究．结果表明,第１５ｄ加入１００ｇ／Ｌ黄豆芽提取液、１００ｍｇ／Ｌ丙二酸钠和６．２ｍｇ／Ｌ硼酸,或第１５ｄ加入４２．７ｍｇ／ＬＣＣＣ,２５．６ｍｇ／Ｌα－蒎烯及１１．５ｍｇ／ＬＥＧＴＡ,其协同作用都能显著提高紫杉醇的产量．此外,试验结果表明真菌诱导物对细胞的影响与Ｃａ离子通道变化引起的信号传导有关．