八种海参体内皂苷类成分的SPE-HPLC分析比较

采用SPE-HPLC方法研究8种海参的总皂苷特征图谱,比较不同种海参间皂苷的组成及含量差异,为海参的品种鉴定提供依据.使用zorbax SB-C<,18>(4.6 mm×250mm,5μm)色谱柱,以乙腈-1g/L的三氟乙酸溶液为流动相梯度洗脱,柱温30℃,流速1.0mL/min,检测波长205nm.对不同海参体内皂苷类成分进行HPLC分析,所得图谱特征性强,8种海参的各皂苷成分均得到很好的色谱分离.结果表明不同海参体内的皂苷组成及含量有明显差异,所建立的方法可用于海参的品种鉴定.     

高效液相色谱法同时测定丹参提取物中4种成分的含量

建立反相高效液相色谱法同时测定丹参醇提物和超临界提取物中原儿茶醛、丹酚酸B、隐丹参酮和丹参酮ⅡA含量的方法.采用RP-HPLC梯度洗脱的方法进行测定,色谱条件为:Agilent C18柱(5 μm,4.6×250 mm);以1%醋酸乙腈-1%醋酸水为流动相进行梯度洗脱;检测波长:0～25 min (280 nm),25～60 min (270 nm);流速0.5 mL/min;柱温:35 ℃.测定了丹参醇提取及超临界提取物中以上4种成分的含量;4种成分线性关系均良好(r>0.9995),平均加样回收率均大于95.0%,RSD均小于3.0%.该方法一次进样,可以同时测定丹参中水溶性成分原儿茶醛和丹酚酸B、脂溶性成分隐丹参酮和丹参酮ⅡA的含量.     

高效液相色谱-串联质谱法同时测定辽东楤木不同部位中5种皂苷类成分的含量

建立了高效液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS/MS）用于测定辽东楤木不同部位中的楤木皂苷Ⅱ、楤木皂苷Ⅳ、楤木皂苷Ⅴ、楤木皂苷Ⅹ和楤木叶皂苷Ⅱ的含量,并比较了楤木不同部位中上述5种皂苷的含量差异。以Alltima C₁₈柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）为分析柱,以乙腈和0.1%（体积分数）甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速为0.8 mL/min。在电喷雾正离子多反应监测（MRM）模式下进行检测。结果表明该方法中楤木皂苷Ⅱ、楤木皂苷Ⅳ、楤木皂苷Ⅴ、楤木皂苷Ⅹ和楤木叶皂苷Ⅱ分别在0.17~108 μg/L、0.53~329 μg/L、0.77~480 μg/L、0.77~480 μg/L和0.82~510 μg/L范围内线性关系良好,相关系数（r²）均大于0.999,提取回收率为99.0%~100.2%。该方法简单、快速、灵敏,可用于测定辽东楤木药材不同部位中的皂苷类成分的含量。测定结果发现楤木不同部位中上述5种皂苷总量多少的顺序为根皮 >叶 >种子 >芽。     

UPLC法同时测定注射用丹参(冻干)中6种酚酸的含量

建立同时测定注射用丹参(冻干)中丹参素钠、原儿茶酸、原儿茶醛、异阿魏酸、丹酚酸G和迷迭香酸6种酚酸类成分含量的UPLC法。采用ACQUITY UPLCHSS T3(2.1 mm×100 mm,1.8μm)色谱柱,流动相为0.1%甲酸(A)-乙腈(B)系统梯度洗脱(0 min,100%A;0~5 min,0%B~8%B;5~10 min,8%B~20 B;10~20 min,20%B~45%B;20~24 min,45%B~100%B;24~25 min,100%B~100%A;25~30 min,100%A),流速0.3 mL/min,柱温30℃,检测波长254 nm。结果显示6种酚酸类成分在一定范围内(丹参素钠101.5~1624.0μg/mL、原儿茶酸0.846~13.540μg/mL、原儿茶醛82.60~1321.60μg/mL、异阿魏酸5.01~80.16μg/mL、丹酚酸G 8.97~143.52μg/mL、迷迭香酸8.67~138.72μg/mL)线性关系良好(r=0.9990~0.9998),平均加样回收率在95.1%~102.9%范围内,RSD均小于3.0%。该法经验证准确可靠,可用于该制剂中6种酚酸的含量测定,为其多成分质量控制提供了科学依据。     

微波辅助萃取/高效液相色谱串联质谱法对山银花中活性成分含量的测定

建立了微波辅助萃取/高效液相色谱串联质谱法(MAE/HPLC-MS/MS)同时测定山银花中10种活性成分含量的方法。山银花药材采用MAE萃取,萃取溶剂为乙醇-水(7∶3),固液比1∶30,萃取温度70℃,萃取时间10 min。采用HPLC-MS/MS测定萃取液中活性成分的含量,色谱柱采用Agilent Poroshell120 SB-C18(100 mm×2.1 mm,2.7μm),以0.5%甲酸-乙腈为流动相进行梯度洗脱,负离子多重反应离子监测模式检测。在优化条件下,10种成分的定量分析在10 min内完成。结果表明,10种活性成分的线性范围为0.05～500 mg/L,相关系数(r)不低于0.996 9,检出限和定量下限分别在69～4 413μg/kg和231～14709μg/kg范围,回收率为94%～105%。采用该方法检测6个不同产地的山银花样品,10种活性成分的含量在3.98～14 356.31 mg/kg范围。该方法快速、准确,可有效地用于山银花药材的质量控制。     

流速/溶剂双梯度反相高效液相色谱法快速同时测定复方丹参片中7种有效成分

采用整体柱建立了流速/溶剂双梯度反相高效液相色谱法快速同时测定复方丹参片中三七皂苷R1,人参皂苷Rg1,Re,Rb1,Rd,Rb2及丹参酮ⅡA 7种有效成分。通过对溶剂和流速双梯度体系的逐步优化,并应用色谱模拟软件Dry Lab,得到分离7种成分的最佳色谱条件。采用色谱柱Merck Chromolith Performance RP-18e(100 mm×4.6 mm),以乙腈-水为流动相体系,流速/溶剂双梯度洗脱,柱温30℃;片剂中的7种成分在21 min内达到基线分离;Rg1在60.60~242.40 mg/L(r=0.999 0)、丹参酮ⅡA在16.52~66.08 mg/L(r=0.999 9),其余皂苷在30.70~142.66 mg/L(r≥0.999 4)范围内具有良好的线性关系;定量下限(S/N=10)为21~124μg/kg,回收率为96.7%~100.1%。该方法能在短时间内同时分离不同极性的化合物,提高被测物的柱效,减少半峰宽和拖尾,可应用于复方丹参片中7种成分的含量分析。     

几种花类药材中芦丁含量的测定

为充分利用花类药材,建立马蔺花、桃花、月季等15种花类药材中芦丁含量测定的RP-HPLC方法,并比较它们的含量。本文首次采用反相高效液相色谱法分析并计算这15种花类药材中芦丁的含量。实验采用C18柱(4.6 mm×250 mm),以V(甲醇)∶V(0.1%H3PO4)=50∶50为流动相,柱温:30℃,流速:1.0 mL/min,检测波长:360 nm,检测时间20 min。测定结果,芦丁在马蔺花中含量最高。     

木通中共有成分木通酸和木通皂苷Stc的检测

应用薄层色谱和高效液相色谱技术,对木通属3种基源木通(五叶木通、三叶木通和白木通)的不同产地、不同生长期共20个样品进行检测分析,从中发现了共有成分木通酸和木通皂苷Stc。建立一种测定共有成分的反相高效液相色谱方法。采用Agilent SB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以V(乙腈)∶V(水)=65∶35为流动相,进样量20μL,流速1 mL/min,柱温25℃,检测波长203 nm,共有成分在50 min内得到较好分离,回收率符合含量测定要求。运用该方法对木通药材进行共有成分含量测定,结果显示,共有成分在20个样品中含量差别较大。经查阅文献表明,木通酸仅在木通科木通中存在,为木通的专属性成分。此研究结果可为中国药典木通质量标准修订提供参考。     

高效液相色谱-质谱法同时测定辛夷提取物中4种木脂素成分

建立了高效液相色谱-质谱-电雾式检测器( HPLC-MS-CAD)联用技术同时测定辛夷中4种木脂素类成分的定量分析方法。采用 YMC-Pack ODS-A(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,甲醇-水梯度洗脱,柱温25℃,流速1 mL/min,检测波长278 nm,紫外检测器后3：7分流,分别进入质谱和电雾式检测器进行检测。以木兰脂素为内参物,建立松脂素二甲醚、里立脂素B二甲醚和表木兰脂素A与内参物的相对校正因子,并进行含量计算,实现一测多评。同时采用外标法测定辛夷提取物中4种木脂素成分的含量,比较计算值与实测值的差异,验证所建立方法的准确定。本方法对松脂素二甲醚、木兰脂素、里立脂素B二甲醚和表木兰脂素A 4种木脂素类成分的检出限分别为0.34,0.55,0.50和0.58 mg/L,线性范围分别为6.8~270 mg/L,11~546 mg/L,2.0~100 mg/L 和2.3~116 mg/L,相关系数为0.9995~0.9998,加样回收率( n=9)为98.2％~99.5％,采用校正因子计算的含量值与外标法计算的含量值之间无显著差异,所建立的方法准确、可行,可用于中药辛夷的质量评价。     

超高效液相色谱法测定不同产地白芷中6种香豆素类成分

白芷样品粉末(约2.5g)用25mL甲醇浸泡过夜后超声提取30min,加入适量甲醇补足所失质量,提取液经0.22μm有机膜过滤,采用超高效液相色谱法测定滤液中6种香豆素类成分的含量。以Waters ACQUITY UPLC BEH-C_(18)色谱柱为分离柱,用乙腈和水以不同比例混合的溶液为流动相进行梯度洗脱,用紫外检测器测定。6种香豆素类成分的质量浓度在一定范围内与其对应的峰面积呈线性关系,检出限(3S/N)为0.034～0.091mg·L~(-1)。方法用于白芷样品的分析,加标回收率为93.2%～107%,测定值的相对标准偏差(n=6)为0.64%～1.7%。对9个不同产地的白芷样品中6种香豆素类成分的含量进行聚类分析和主成分分析,结果表明:聚类分析和主成分分析的结果一致,样品被分为3类。