核苷5'-硫代磷酰氨基酸酯电喷雾质谱研究

核苷磷酰氨基酸酯化合物是1类倍受重视的药物,特别是它可作为寡聚核苷酸的类似物用于反义药物[1].核苷逆转录酶抑制剂被批准用于治疗爱滋病(AIDS),目前普遍使用的抗HIV核苷类似物中,2',3'-双脱氧核苷(ddNs)具有良好的疗效[2],它的抗病毒的可能机理是在细胞激酶的作用下,5'-羟基发生相继的磷酸化生成三磷酸核苷,然后通过HIV-逆转录酶进入病毒DNA的合成,由于ddNs 3'-位没有相应的羟基存在,使得病毒DNA的合成得以终止.     

HIV整合酶抑制剂的研究进展

HIV整合酶是病毒DNA复制所必需的3个基本酶之一,是新批准上市的抗艾滋病药物Raltegravir(MK-0518,Isentress)的分子靶标.HIV整合酶抑制剂已经成为新一类治疗获得性免疫缺陷综合症的药物.对HIV整合酶抑制剂的研究进展进行了综述,为研究新型人类免疫缺陷病毒整合酶抑制剂提供参考.     

联苯-2,2'-二甲酸-2-甲酯的合成、结构及表征

最新的药理活性试验表明, 具有联苯结构单元的化合物对于肝癌的标记物甲胎蛋白(AFP) 及人免疫病毒(HIV)有一定的作用[1,2]. 在金属催化和新型磁性材料合成方面, 化学家对以联苯二甲酸类物质桥联的配合物已进行了广泛研究[3～6].     

痘苗病毒的装配与中间纤维的关系

本文用选择性抽提方法,结合非树脂包埋-去包埋剂电子显微镜技术(embedmentfree EM)与整装细胞(whole mount cell)制备方法能清楚地显示中间纤维-Lamina-核骨架体系(IF-Lamina-Nm System)。首次证明痘苗病毒工厂内有一个精细的中间纤维网架系统,它是胞质内中间纤维网络的组成部分。痘苗病毒的装配原料与亚结构均牢固地结合在中间纤维丝上。装配好的痘苗病毒与正在装配的病毒均固定在中间纤维的网络中,并可以观察到病毒结构与中间纤维的直接连接。根据上述事实,认为痘苗病毒的装配过程要依赖中间纤维为支架。     

一锅法合成O-(3-薯蓣甙元) -O′-[5′-(3′-叠氮-3′-脱氧胸苷)]-氢亚磷酸酯

3′-叠氮-3′-脱氧胸苷(1)(AZT结构见Scheme 1)是FDA批准的第一个用于治疗HIV感染的双脱氧核苷类药物, 已在临床上得到了广泛的使用[1]. 但作为一种有效的逆转录酶抑制剂, 该药物在临床使用过程中面临许多亟待解决的问题. 例如, 长期使用会引起核苷第一步磷酰化所需胸苷激酶的活性降低, 从而引起病毒对药物的耐受性, 降低治疗效果. 另外, 长期使用该药物会产生脊髓抑制的副作用, 如贫血和中性粒细胞减少, 因而使治疗不能持续[2,3].     

新型N-3位酰胺连噻唑烷-4-酮二芳基衍生物的设计合成及HIV逆转酶抑制活性

以氨基酸酯为原料,在微波辐射条件下合成了系列N-3位含酯基的噻唑烷-4-酮衍生物,经水解并酰胺缩合制备了N-3位酰胺键连接嘧啶胺的二芳基噻唑烷-4-酮衍生物.化合物通过人类免疫缺陷病毒(HIV)逆转酶(RT)试剂盒(比色法)评价了其酶抑制活性.活性结果表明,部分化合物如5bb,5bc,5cb和5cc能有效地抑制HIV逆转酶的活性,IC_(50)值分别为4.15,3.53,4.61和4.06μmol/L.构效关系表明N-3位2个碳的柔性侧链以及亲脂基如甲基的引入将有利于化合物的抗HIV逆转录酶活性.     

2',3'-双脱氢-2',3'-双脱氧胸苷(d4T)5'-硫代磷酰氨基酸酯的合成和谱学分析

HIV逆转录酶是治疗艾滋病的有效靶点，核苷-磷酰氨基酸酯是HIV逆转录酶的 有效抑制剂，但是这类化合物容易在体内被核酸酶水解。本研究设计合成了对核酸 酶具有抵抗作用的2',3'-双脱氢-2',3'-双脱氧胸苷5'-硫代磷酰氨基酸酯化合物， 这类化合物可以有效地透过细胞膜经过细胞激酶的作用，进入HIV逆转录酶的作用 位点，病毒实验表明该类化合物对MT-4细胞具有较好的抗HIV病毒活性。报道了2', 3'-双脱氢-2',3'-双脱氧胸苷5'-硫代磷酰氨基酸酯化合物的合成，及利用NMR， IR和ESI-MS谱进行的结构表征和构象分析。     

新型非拟肽磺胺类HIV蛋白酶抑制剂Darunavir的研究进展

综述新型非拟肽磺胺类人类免疫缺陷病毒(HIV)蛋白酶抑制剂Darunavir (TMC-114)的发现, 抗病毒的活性, 分子模拟以及结构优化的研究进展. Darunavir不但对野生型的HIV蛋白酶有很好的抑制活性, 而且对多种抗性突变的HIV蛋白酶也有良好的活性, 是针对耐药性HIV所开发的新药.     

A New Sphingolipid from the Fungus Paxillus panuoides

The ceramides, cleavage products of various sphingolipids, including gangliosides and cerebrosides, are in volved in various signal transduction pathways. Many extracellular stresses, such as tumor necrosis factors-α (TNFα) and human immunodeficiency virus (HIV) have been shown to activate sphingomyelinases that release ceramides which inhibit cell growth and induce apoptosis. Because of the importance of ceramides, chemistry and biology of ceramides have been the vital subject of the latest research in recent years. [1～4]     

2′,3′-乙氧甲撑基腺苷5′-硫代磷酰氨基酸酯的合成和谱学分析

核苷磷酰氨基酸酯化合物是一类倍受重视的药物 ,特别是它可作为寡聚核苷酸的类似物用于反义药物 [1] .HIV逆转录酶是治疗艾滋病的有效靶点 ,目前普遍使用的抗 HIV核苷类似物中 ,2′,3′-双脱氧核苷 (dd Ns)具有良好的疗效 [2 ] .苯氧基取代的核苷 -磷酰氨基酸酯是 HIV逆转录酶的有效抑制剂[3 ] ,其药物毒性比 dd Ns低 ,但容易在体内被核酸酶水解 .由于硫代磷酸对核酸酶具有抵抗性 ,它可以抑制核酸酶对它的水解 [4 ] ,因此我们设计合成了核苷 5′-硫代磷酰氨基酸酯化合物 ,希望开发出一种全新的 HIV逆转录酶抑制剂 .由于分子中引入氨基…     

铌取代型钨硅杂多酸盐的合成及抗病毒活性研究

杂多化合物因具有独特的结构和优异的抗病毒活性^[1,2],近年来受到普遍重视,但研究的热点主要集中在抗艾滋病毒(HIV)、疱疹病毒(HSV)、抗肿瘤等方面^[3,4],而忽视了对植物病毒防治的研究。     

反义人myc基因的表达对食管癌细胞恶性生长的抑制

本文构建了一个含有反义人c-myc基因片段(第三外显子及3’旁侧序列)的逆转录病毒载体——pDAM3.用磷酸钙沉淀法将pDAM3导入病毒包装细胞PA317,经过筛选获得病毒效价8×10~5CFU/ml的单克隆病毒包装细胞,DNA杂交分析证实病毒载体序列稳定地整合到PA317细胞中.利用DAM3病毒成功地感染了人食管癌细胞系EC8712,得到G418抗性细胞EC-DAM3,RNA杂交结果表明EC-DAM3细胞中存在着大量的反义mycRNA分子.EC-DAM3细胞的生长速率较之EC8712细胞下降50％,[~3H]胸腺嘧啶核苷掺入降低45％,细胞在裸鼠体内形成肿瘤的能力受到明显抑制.     

Increase of Calcium Levels at Interphase in NIH 3T3 Cells

The fluorescent calcium ion indicator dye Fluo-3 and DNA-binding dye Hoechst 33342 were employed to determine, in a quantitative microspectrofluorometric study, the intracellular calcium ion concentration ([Ca~(2+)]_i) and the DNA content of individual living NIH3T3 cells. The well-separated excitation and emission properties of these dyes allowed us to establish for each cell both the phase of the cell cycle using DNA content and [Ca~(2+)]_i. We found that the transition from G_1, through S, to the G_2 phase is accompanied by a two-fold increase in [Ca~(2+)]_i. The [Ca~(2+)]_i was inhomologous in each phase of the interphase (G_1, S and G_2) although [Ca~(2+)]_i in the S and G_2 phases was never lower than certain threshold values in the G_1 and S phases respectively. [Ca~(2+)]_i in G_0 cells was lower than that in G_2 cells. These changes in [Ca~(2+)]_i suggest that [Ca~(2+)]_i may be an import regulator of cell cycle progression.     

6-氟-色满酮-2-羧酸(酯)的选择催化氢化

具有色满环结构单元的化合物广泛应用于医药、香料和化妆品中[1].在临床上,这类衍生物做为钾离子和钙离子通道调节剂对心脏和血压起调节作用[2];有些化合物还表现出抗HIV和抗肿瘤活性[3].6-氟-色满-2-羧酸(酯)类衍生物在合成具有上述生物活性的化合物时可做为中间体被应用.     

抗HIV活性物质三取代(+)-cis-Khellactone衍生物的合成

具有(+)-cis-Khellactone骨架结构的天然产物Suksdorfin具有明显的抗HIV活性.在对Suksdorfin进行系统的结构修饰和优化过程中发现(3′R,4′R)-3′,4′-di-O-(S)-camphanoyl-(+)-cis-khellactone(DCK)的类似物对HIV-1在H9细胞中的复制有非常强的抑制活性.     

PREPARATION AND THE CULTURE OF LO2 CELLS ON PVA-BASED MICROCARRIERS

1. INTRODUCTION Biological artificial liver support systems have been extensively studied in treatment of hepatic failure [1]. In the device, cells included primary hepatocytes [2] and liver cell lines (i.e. C3A, HepG2 [3]) with relatively high differentiations, which are all attachment dependent cells; the cell density is crucially important for its efficiency in clinical application. Microcarrier -attached hepatocytes have been applied in the device in an attempt to raise the cell dens…     

反义核酸对小鼠腹水瘤病毒(反转录病毒)的抑制作用

本文研究了反义核酸(Antisense Nucleic Acids)对小鼠腹水瘤病毒(SRSV),M-MuLV反转录病毒之一种的抑制作用.设计和合成了不同序列,长度和核苷酸间磷酸根有无修饰等几种脱氧寡核苷酸片段,对经SRSV感染后的宿主细胞(NIH 3T3)的生长抑制和对无病感染的3T3正常细胞的毒性作用进行了试验.发现互补于病毒RNA基因5’端引物tRNA区序列的片段和均聚体脱氧胞嘧啶寡核苷酸片段(Homooligo-dC14)效果很好,病毒感染后宿主细胞生长抑制达到90％,并且在动物身上进行毒性试验,结果表明无毒性作用.对均聚体脱氧胞嘧啶寡核苷酸片段作了感染细胞内的反转录酶活力和细胞融合试验等,结果均与对照组有明显差别;并对它的作用机制进行了讨论. 提出上述效果很好的两种反义核酸片段是两种具有很大潜力的抑制SRSV反转录病毒的化合物.     

柠檬酸钆配合物对宫颈癌细胞作用的蛋白质组学研究

为研究稀土化合物抗癌作用及其机制,本文采用差异蛋白质组学方法研究钆对宫颈癌细胞(HeLa)的作用,以四噻唑蓝比色法(MTT法)检测柠檬酸钆配合物([Gd(Cit)2]3-)对HeLa细胞生长的影响,并用Hoechst 33258染色法观察细胞凋亡形态,利用双向凝胶电泳技术分离[Gd(Cit)2]3-作用HeLa细胞前后的蛋白,经图像分析后对蔗异点,进行MALDI-TOF-MS鉴定和数据检索.结果表明0.005～1 mmol·L-1浓度范围内的[Gd(Cit)2]3-对HeLa细胞生长的影响存在浓度依赖性.Hoechst 33258染色结果表明0.07 mmol·L-1[Gd(Cit)2]3-作用24 h对HeLa细胞的生长的抑制率为34%.质谱共鉴定出12个差异表达蛋白质点,包括延伸因子2、过氧化酶6、亲环蛋白A、烯醇酶1等在细胞中分别参与蛋白质转录与翻译、氧化应激、信号传导等过程的蛋白质.提示[Gd(Cit)2]3-可能通过调节胞内氧化应激水平,介导与调控信号转导与蛋白质表达等,从而诱导HeLa癌细胞凋亡.     

毕赤酵母表达的HIV-2外膜糖蛋白的纯化与活性测定

人免疫缺陷病毒(Human immunodeficiency virus,HIV)是艾滋病（AIDS）的病原体,其外膜蛋白是HIV侵入人体靶细胞的物质基础,对其结构与功能的深入研究不但能为彻底揭示HIV致病机理奠定基础,而且有助于抗感染免疫研究和治疗物的设计^[1,2],HIV－2ROD外膜蛋白gp105是一种高度糖基化的糖蛋白,近年来发展迅速的毕赤酵母（Pichia Pastoris）真核表达系统对分泌蛋白的糖基化修饰形式与天然的gp105相同^[3]。为实现大量制备有活性的gp105,我们用PCR法去除了gp105基因5′端28个密码子的非功能片段,以提高gp105的表达水平,并成功地在毕赤酵母中实现了gp105的高效分泌表达。本文对这一表面产物的纯化、性质及活性进行了研究,为尽快研制出有效的疫苗奠定基础。