碳量子点/曙红Y比率型荧光探针测定L-抗坏血酸

以天然生物质去皮的蓖麻为碳源,采用一步水热法合成了荧光性能优良的绿色荧光蓖麻碳量子点(CO-CQDs),对其形貌和发光性能进行了表征。通过将该CO-CQDs与荧光极强的卤代荧光素染料曙红Y(EY)复合,二者可形成荧光发射峰相距较远的新型CO-CQDs/EY复合物。在pH=4.00的Na₂HPO₄-柠檬酸缓冲溶液中,在320 nm的激发波长下,CO-CQDs/EY复合物于405 nm和540 nm处显示出两个独立的荧光发射峰。在该体系中加入Cr(Ⅵ),405 nm和540 nm两处的荧光信号均显著猝灭。L-抗坏血酸(L-ascorbic acid,AA)的加入可使复合物于540 nm的荧光信号恢复,而405 nm处的荧光强度基本不变。据此建立了一种以CO-CQDs/EY复合物为比率型荧光探针测定AA的新方法。实验测定了荧光信号恢复的最佳条件和影响荧光恢复的因素,初步探讨了反应机理。在优化的实验条件下,该探针于540 nm/405 nm两处的荧光强度比值与AA的浓度在5.0×10^-8～4.0×10^-6 ...     

吡啰红Y-共振荧光光谱法测定痕量甲醛

研究了吡口罗红Y的共振荧光光谱特征,基于硫酸介质中甲醛能催化溴酸钾氧化吡口罗红Y的反应,使其共振荧光强度减弱。据此建立了催化共振荧光分析法测定甲醛的新方法。方法的线性范围为0.02—1.20μg/mL,检出限为6.1×10-3μg/mL。样品加标回收率为96.5%—98.5%。新建方法简便快速,可用于环境水样中甲醛的测定。     

Investigation on the pH-dependent binding of Eosin Y and bovine serum albumin by spectral methods

In this paper, the pH-dependent binding of Eosin Y and bovine serum albumin (BSA) was investigated by spectral methods, including resonance light scattering (RLS), absorption and fluorescence spectrometry. Due to the pH-dependent structure of Eosin Y and BSA, the interaction of BSA and Eosin Y depended on the solution pH value. Especially at pH 2.6 and 9.2, the RLS intensity of BSA was obviously enhanced in the presence of Eosin Y. However, the fluorescence intensity of BSA was quenched in the presence of Eosin Y. To fully understand the pH-dependent binding of BSA and Eosin Y, fluorescence quenching technique was introduced. Based on the fluorescence data obtained, the style of binding, the binding constant, the binding site number and the thermodynamic parameters for the interaction of BSA and Eosin Y were studied. Based on Förster non-radiation energy transfer theory, the distance between donor BSA and acceptor Eosin Y was obtained.     

基于荧光光谱技术和GA-BP神经网络的对羟基苯甲酸甲酯钠含量的测定

对羟基苯甲酸甲酯钠是一种使用广泛的防腐剂,食用过量将会危害身体健康,因此各国对对羟基苯甲酸甲酯钠的用量有严格规定。采用FS920荧光光谱仪分析了对羟基苯甲酸甲酯钠在水和橙汁溶液中的荧光光谱特性,发现水溶液的荧光特征峰位于λ_ex/λ_em=380/510 nm,橙汁溶液两个荧光特征峰,分别位于λ_ex/λ_em=440/530 nm和470/530 nm,最佳激发波长为440 nm。从实验结果可以看出两者的特征峰发生了明显的变化。经分析得出,对羟基苯甲酸甲酯钠橙汁溶液与对羟基苯甲酸甲酯钠水溶液相比,荧光特征峰发生变化是由橙汁的荧光特性干扰引起的。为了准确测定鲜橙汁中对羟基苯甲酸甲酯钠含量,根据对羟基苯甲酸甲酯钠橙汁溶液在激发波长λ_ex=440 nm时的相对荧光强度和对羟基苯甲酸甲酯钠含量的关系,基于GA-BP神经网络构建了橙汁中对羟基苯甲酸甲酯钠含量检测数学模型,当网络训练过程中误差精度达到10-3时,网络输出与期望的相关系数为0.996,预测样本的平均回收率为99.52%,平均相对标准偏差为0.86%,预测结果较为理想。结果证明,当浓度范围为0.02~1.0 g·L-1时,荧光光谱技术和GA-BP神经网络相结合的方法能够准确地测定鲜橙汁中对羟基苯甲酸甲酯钠的含量,此方法具有新颖简便性,同时有望应用于一般饮品中对羟基苯甲酸酯类钠盐含量的快速测定。     

叠氮化钠对辣根过氧化物酶的荧光猝灭机制的研究

研究了辣根过氧化物酶 (HRP)和叠氮化钠 (NaN3 )作用前后的荧光光谱变化。探讨了HRP的荧光猝灭机制 ,首次运用了HRP的荧光猝灭行为确认了HRP和NaN3 之间生成了配合物。计算了HRP和NaN3 之间生成的配合物的形成常数为 7 9× 10 8L·mol-1,结合位点数为 1。研究还发现 ,NaN3 与HRP的结合 ,影响了分子构象 ,使酪氨酸和色氨酸残基的微环境受到不同程度的影响。     

十二烷基硫酸钠(SDS)增强若丹明6G水溶液激光激发荧光谱研究

报道了若丹明6G水溶液添加不同浓度的表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)时激光激发染料的变化,发现较低的掺入量导致R6G荧光减弱,适量SDS的加入使荧光增强,在5×10-5 mol·L-1的R6G水溶液中,加入6×10-2 mol·L-1 SDS,荧光增强因子达到3.1。当R6G浓度为1×10-4 mol·L-1时,加入2×10-2 mol·L-1,染料激光阈值显著降低。测量了不同浓度的R6G溶液的吸收光谱及加入不同浓度SDS后的荧光谱,分析了不同SDS加入量下R6G荧光减弱及增强的物理机制。     

维多利亚蓝B共振瑞利散射光谱法测定透明质酸钠

在pH3-4.5的HAc-Ac-酸性介质中,维多利亚蓝B与透明质酸钠作用形成结合产物时将导致溶液共振瑞利散射(RRS)大大增强并产生新的RRS光谱,其最大散射峰位于285.5nm处。透明质酸钠在0-5mg/L范围内与RRS强度成正比。据此,建立了一种新的测定透明质酸钠的分析法。该法具有高灵敏度,对透明质酸钠的检出限(3σ)为14.9μg/L;选择性也较好。应用于润舒氯霉素滴眼液和润洁滴眼露中透明质酸钠的测定,结果令人满意。     

Meso-5,10,15,20-四(4-甲氧基苯基)卟啉荧光熄灭法测定铅

基于铅对荧光试剂 Meso- 5 ,10 ,15 ,2 0 -四 (4 -甲氧基苯基 )卟啉 (TMOPP)的荧光熄灭 ,建立了测定微量铅的荧光分析方法。在 p H9.5的 Tris- HCl缓冲体系中 ,最大激发波长和发射波长分别为 4 2 4 nm和6 5 7nm,测定铅浓度的线性范围为 5 .5 0× 10 -7— 7.5 0× 10 -5mol/ L,检出限为 8.5 0× 10 -8mol/ L。用于环境水样中铅含量的分析 ,结果满意。     

基于磁微粒的荧光免疫分析法测定人血清中DNA甲基转移酶1

DNA甲基转移酶1(DNA methyltransferases1,DNMT1)负责维持DNA甲基化遗传稳定性,其表达量与多种肿瘤的发生发展密切相关,是一种重要的肿瘤分子标志物。DNA甲基化转移酶(DNA methyltransferases,DNMTs)的现有检测方法大多基于原核生物酶建立,且局限于实验室研究,因此建立一种高灵敏、高通量测定人血清中DNMT1含量的荧光免疫分析方法(FLISA),以期为癌症早期筛查及临床应用提供新思路。以Fe3O4磁珠为固相载体,采用碳二亚胺/N-羟基硫代琥珀酰亚胺(EDC/Sulfo-NHS)键合法分别制备磁性免疫捕获探针Fe3O4@DNMT1小鼠单克隆抗体(Fe3O4@McAbDNMT1)及荧光免疫检测探针5-羧基四甲基罗丹明@DNMT1兔多克隆抗体(5-TAMRA@PcAbDNMT1)。用红外光谱、紫外-可见(UV-Vis)光谱、 Zeta电位、免疫活性分别表征偶联产物的结构与活性。在此基础上,采用双抗体夹心法,检测黑色96微孔板中反应产物的荧光强度,根据荧光强度与DNMT1浓度的关系进行定量分析,并进行方法学评价与比较。实验结果显示,双探针偶联成功,并保持了原抗体的免疫活性。该方法的线性方程y=222.046+48.323x,线性范围0.05~80 ng·mL-1,相关系数为0.991 4,检出限为0.005 ng·mL-1,板内、板间的RSD分别为4.7%~8.8%, 1.6%~10.0%(n=6);板内、板间的回收率分别为91.3%~102.4%, 88.0%~98.8%(n=6);方法特异性良好。与酶联免疫吸附法(ELISA)和磁酶免疫吸附法(MELISA)相比, FLISA法的检出限最低,灵敏度最高,所需分析时间最短;FLISA法与商品化ELISA试剂盒对15例人血清样品进行分析,差异无统计学意义(p>0.05)。表明本研究所建立的FLISA方法灵敏快速,适用于大批量人血清样品中DNMT1的快速测定,在临床诊断方面具有重要的应用价值和广阔的应用前景。     

荧光层析法研究由胶束溶液分离出的两种抗菌素

喹诺酮药物是一类重要的化学合成抗菌素 ,其临床应用正在不断扩大[1] 。氧氟沙星 (OFLX)和环丙沙星 (CPLX)结构非常相似。本文采用胶束薄层色谱法分离了两种药物。加入 1%氨水的 0 0 0 15mol·L-1十六烷基三甲基溴化铵 (CTAB)和 1%十二烷基磺酸钠 (SDS)的等体积水溶液作为展开剂 ,聚酰胺薄膜作为固定相。考查了CTAB浓度 ,SDS浓度及氨水对氧氟沙星和环丙沙星Rf 值的影响。在选定条件下 ,Rf 值分别为 0 87和 0 76 ,在激发波长为 2 80nm处对其进行了荧光测定。测定了该方法的稳定性和灵敏度。本文首次使用胶束溶液分离了氧氟沙星和环丙沙星