体积排阻色谱法定量检测9种型别人乳头瘤病毒原液中病毒样颗粒

据统计,5％以上的人类癌症由人乳头瘤病毒(HPV)导致.HPV疫苗的使用,尤其是多价HPV疫苗的使用,可有效预防HPV感染和肿瘤的发生.例如,9价HPV疫苗可有效预防90％以上HPV相关癌前病变.人乳头瘤病毒样颗粒(VLP)是HPV疫苗的唯一抗原.VLP由360份衣壳蛋白L1组成.VLP的含量测定对HPV原液和HPV疫...     

带有人Ⅸ因子cDNA的反转录病毒载体的构建及其在血友病B患者皮肤成纤维细胞中的高效转移和表达

本文报道对血友病B实施基因治疗的可能性,首先将由SV40早期启动子,小鼠MT-1启动子和反转录病毒LTR启动子控制的Ⅸ因子cDNA构建到反转录病毒载体,然后用电穿孔法将构建的4个反转录病毒载体分别转入一株Amphotropic辅助细胞,PA317细胞,再用一株人纤维肉瘤细胞,HT1080细胞,测定这些辅助细胞的产病毒滴度,可得到2×10~4CFU/ml到5×10~5CFU/ml左右的病毒感染颗粒,用ELISA分别测定转有不同病毒载体的PA317细胞的Ⅸ因子蛋白产量,发现LTR启动子的表达效率最高,Ⅸ因子蛋白的分泌速率可达584ng/10~6细胞/24h,而SV40早期启动子和MT-1启动子的表达效率分别只有它的1/10和1/20,将表达效率最高的反转录病毒载体pXL—Ⅸ 1转入一株取自血友病B患者原代培养的皮肤成纤维细胞后同样能产生较高浓度的Ⅸ因子蛋白,其分泌速率可达549ng/10~6细胞/24h,其中75％以上的Ⅸ因子具有凝血活性,从而达到了首先在体外培养细胞纠正Ⅸ因子基因缺陷的目的,实现了血友病B基因治疗的第一步。     

富勒烯膦酸衍生物纳米水悬液对DNA限制性内切酶的抑制作用及其机理

富勒烯纳米颗粒水悬液的生物学效应正在引起人们的极大关注.采用具有EcoRⅠ、BamHⅠ、Cfr9Ⅰ和XmaⅠ单一酶切位点的pEGFP-N1超螺旋型质粒为底物,检测了单加成亚甲基富勒烯[60]二膦酸四乙酯（mono-methanophosphonate fullerene,MMPF）和二加成亚甲基富勒烯[60]二膦酸四乙酯（bis-methanophosphonate fullerene,BMPF）的纳米水悬液（分别表示为n-MMPF和n-BMPF）对各种DNA限制性内切酶的抑制作用.实验发现,n-MMPF和n-BMPF均对EcoRⅠ有抑制作用,但后者的作用更强些.加入n-BMPF后,对BamHⅠ酶切反应的半抑制浓度IC50值大于30μmol/L,而对EcoRⅠ的半抑制浓度IC50值仅为4.3μmol/L,对同工酶Cfr9Ⅰ和XmaⅠ的半抑制浓度IC50值分别为11.7和8.3μmol/L.当EcoRⅠ酶切反应完全被n-BMPF抑制时,在反应体系中增加底物pEGFP-N1的量,并不能观察到酶切产物线型质粒,但是在酶切体系中增加酶的量则能拮抗n-BMPF的作用.两种活性氧清除剂甘露醇和叠氮化钠在浓度为2-10mmol/L时,不能拮抗n-BMPF的作用,说明n-BMPF的抑制活性与活性氧无关.这些结果首次表明,富勒烯纳米颗粒水悬液具有作为DNA限制性内切酶抑制剂的生物活性.     

基于DNA功能化金属有机框架材料的荧光探针对瓣状核酸内切酶1的检测和成像研究

结构特异性核酸酶瓣状核酸内切酶1 (Flap enduclease 1, FEN1)在多种癌细胞中过度表达,被认为是癌症临床诊断的潜在生物标志物。FEN1的精确检测对于癌症早期诊断和预后具有重要意义。荧光法具有操作简单、灵敏度高等优势,被广泛应用于FEN1检测,但基于比率荧光信号检测FEN1的策略尚未见报道。本研究设计了一种基于DNA功能化金属有机框架材料(MOFs)的比率荧光探针(FAM-RhB@UiO-66-NH₂),用于细胞内FEN1的检测和成像。其中,罗丹明B(RhB)被封装在MOFs中,荧光团FAM修饰的DNA链通过Zr—O—P相互作用与MOFs结合,形成基于荧光共振能量转移(FRET)的纳米探针。在FEN1存在的情况下,DNA链被酶切割,FRET体系被破坏,荧光比率发生变化,从而可实现对FEN1的检测。在最佳实验条件下,检测FEN1的线性范围为0.01～3.0 U,线性方程为y=0.1314x+1.6107,检出限低至0.004 U(3σ)。将此探针用于细胞内FEN1成像,能够区分癌细胞和正常细胞。     

NaOH溶液配制与检测的自动控制技术

本文介绍了生产过程中所用浓ＮａＯＨ溶液的自动化配制与检测技术。采用Ｓｂ电极法和差压法，运用数学模型和计算机控制，使得浓ＮａＯＨ溶液的配制，检测实现连续化，自动化。     

DESIGN AND CONTROL OF SOAP-FREE HYDROPHILIC-HYDROPHOBIC CORE-SHELL LATEX PARTICLES WITH HIGH CARBOXYL CONTENT IN THE CORE OF THE PARTICLES

Soap-free hydrophilic-hydrophobic core-shell latex particles with high carboxyl content in the core of the particles were synthesized via the seeded emulsion polymerization using methyl methacrylate(MMA),butyl acrylate(BA), methacrylic acid(MAA),styrene(St)and ethylene glycol dimethacrylate(EGDMA)as monomers,and the influences of MMA content used in the core preparation on polymerization,particle size and morphology were investigated by transmission electron microscopy,dynamic light scattering and conductometric titration.The results showed that the seeded emulsion polymerization could be carried out smoothly using "starved monomer feeding process" when MAA content in the core preparation was equal to or less than 24 wt%,and the encapsulating efficiency of the hydrophilic P(MMA-BA-MAAEGDMA) core with the hydrophobic PSt shell decreased with the increase in MAA content.When an interlayer of P(MMAMAA -St)with moderate polarity was inserted between the P(MMA-BA-MAA-EGDMA)core and the PSt shell,well designed soap-free hydrophilic-hydrophobic core-shell latex particles with 24 wt%MAA content in the core preparation were obtained.     

鱼明胶介质中AgBr/I纳米粒子的生长与感光性能

本文以鱼明胶为分散介质,采用双注法制备AgBr/I纳米粒子乳剂,控制银盐与卤溶液的注入速率(R),以TEM观测了粒子的生长,据此探讨了该乳剂中AgBr/I纳米粒子平均粒径(d)及分布(±σ)与反应条件的关系.发现在R为1.3 mmol/min^-8 mmol/min范围内,随R增大,d减小,R-d间呈良好的线性关系.除个别外,±σ值变化不明显.对于该纳米粒子乳剂采用二氧化硫脲进行化学敏化,结果表明:适当增加二氧化硫脲的加入量和延长敏化时间,均可有效提高乳剂的感光度,并有助于改善其低照度互易律失效,此外还揭示了曝光光源色温对该乳剂感光性能的影响.     

纳米尖晶石型Co2MnO4的形成过程及其F-T反应性能

用溶胶凝胶法制备了尖晶石型Ｃｏ２ＭｎＯ４超细粒子，用ＤＴＡＴＧ，ＸＲＤ，ＴＥＭ，ＦＴＩＲ等手段研究了Ｃｏ２ＭｎＯ４超细粒子的形成过程，进而用反应评价结合ＸＲＤ，ＸＰＳ，ＢＥＴ比表面积测试研究了Ｃｏ２ＭｎＯ４催化剂的比表面积和表面结构与其ＦＴ反应性能间的关系．结果表明，Ｃｏ２ＭｎＯ４超细粒子可以在较低温度（２５０～３５０℃）下形成，并具有粒度小，分布均匀等特点．用该法制备的超细粒子Ｃｏ２ＭｎＯ４，其催化活性明显优于相同组成的大颗粒催化剂．     

甲基丙烯酸甲酯聚合动力学和分子量及分布的开放控制

在甲基丙烯酸甲酯聚合过程中 ,凝胶效应会导致转化率在短时间内出现突变 ,这对工业反应器非常危险 ,同时也导致分子量剧增、分子量分布加宽 .为了使聚合反应速度、分子量及分布同时得到控制 ,提出 3个控制目标 ,即热荷分布指数、预定分子量及变化、分子量分布指数 .在甲基丙烯酸甲酯半间歇聚合动力学和分子量模型的基础上 ,通过单体、溶剂和链转移剂 3种物料的流量和加料方式的仿真计算 ,对动力学、分子量及分布进行开放控制 ,并进行优化 ,得到热荷分布指数和分子量分布指数分别小于 2 0和 2 2的控制策略 ,且分子量达到预定要求 .选择两种优化策略进行实验验证 ,结果与开放控制仿真结果一致