氦氖激光诱导离体小鼠胸腺细胞凋亡的实验研究

实验发现随着低功率氦氖激光照射时间的延长 (激光剂量的增加 ) ,胸腺细胞凋亡的相对数相应增大 ,表现在其 DNA直方图上可见亚二倍体峰升高。     

双氢青蒿素体外诱导人乳腺癌细胞凋亡的电镜研究

目的:研究双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)在体外对人乳腺癌细胞的抗癌作用。方法:体外培养人乳腺癌细胞株MDA-MB-231,经不同浓度DHA处理后,应用透射电镜观察癌细胞的超微形态学变化。结果:不同浓度DHA处理后的癌细胞,随浓度的增加,呈现典型的细胞凋亡超微结构改变。结论:DHA能诱导乳腺癌MDAMB-231细胞的凋亡,有望成为抗乳腺癌的辅助化疗药物。     

He-Ne激光照射引起小鼠胸腺细胞早期凋亡的实验研究

用Ｈｅ－Ｎｅ激光照射引起离体小鼠胸腺细胞凋亡,利用流式细胞计定量检测ＡｎｎｅｘｉｎＶ－ＦＩＴＣ或Ｒｈ１２３和ＰＩ双标记早期凋亡的胸腺细胞,利用透射电子显微镜对凋亡细胞作形态观察。发现激光照射６０ｍｉｎ（光剂量为４７．６９４～５１．８２２Ｊ／ｃｍ２）,细胞早期凋亡明显增加,随着照射时间延长,光剂量增加,细胞早期凋亡百分率也随之增加,表明胸腺细胞经激光照射后,早期凋亡细胞膜上磷脂酰丝氨酸由质膜内侧外翻至质膜的外表面;同时线粒体功能损失,其跨膜电势下降。     

半导体激光诱导细胞凋亡脱毛及除腋臭的研究

目的 :通过动物实验观察能否诱导细胞凋亡导致脱毛 ,并探索激光诱导细胞凋亡的机制。同时 ,观察和探讨在脱腋毛的同时 ,大汗腺细胞有无因激光的光热作用或诱导的细胞凋亡受到破坏 ,为治疗腋臭寻找一新的无创伤的治疗方法。方法 :分别用半导体激光以不同剂量对黑毛狗进行脱毛。分别在治疗即刻、治疗后不同时期通过电镜、流式细胞术、TdT介导的RdUTP缺口末端标记法 (Tunel法 )对比治疗效果 ,观察组织变化及其可能存在的凋亡改变 ,并初步探讨诱导细胞凋亡的机制及临床治疗意义。结果 :半导体激光照射后毛囊上皮细胞及大汗腺腺体细胞中出现凋亡细胞 ;低剂量重复治疗凋亡现象增加。结论 :激光照射后 ,毛囊上皮细胞及大汗腺细胞中有细胞凋亡现象。     

HPPH光动力学治疗鼠G422脑胶质瘤诱导肿瘤细胞凋亡的实验观察

目的:通过对鼠G422脑胶质瘤脑及腋部皮下移植瘤模型的HPPH光动力学治疗,从电镜、FCM测定细胞凋亡率,观察各剂量组疗效,并与对照组及HpD-PDT作对比,寻找HPPH-PDT治疗鼠G422脑胶质瘤合适的HPPH剂量。方法:建立鼠G422脑胶质瘤脑及腋部皮下移植瘤模型,设立空白对照组、单注射HPPH 0.45 mg/kg组、单注射HpD组、单665 nm激光照射组、单630 nm激光照射组、HPPH-PDT各组(0.15、0.3、0.45 mg/kg组)、HpD-PDT 5 mg/kg组。单注射HPPH组、HPPH-PDT组和单注射HpD组、HpD-PDT组自尾静脉注入光敏剂,24 h后以波长665 nm的半导体激光照射HPPH-PDT组和单665 nm激光组肿瘤,功率密度200 mW/cm~2,每光斑照射17 min,能量密度为204 J/cm~2;以波长630 nm的半导体激光照射HpD-PDT组及单630nm激光照射组肿瘤,功率密度200 mW/cm~2,每光斑照射20 min,能量密度为240 J/cm~2。于PDT后9 d处死鼠,取肿瘤、肿瘤边缘、正常脑组织,作电镜、FCM细胞凋亡检查。结果:以流式细胞仪及电镜观察肿瘤细胞凋亡,显示鼠G422脑胶质瘤脑及皮下移植瘤HPPH-PDT各剂量组、HpD-PDT组与空白、单注药和单照光三组对照组比较,肿瘤细胞凋亡率明显升高,P<0.01,差别有统计学意义。HPPH-PDT各组细胞凋亡率高于HpD-PDT组,0.3 mg/kg、0.45 mg/kgHPPH-PDT组的细胞凋亡率明显高于0.15 mg/kgHPPH-PDT组,HpD-PDT组,P<0.01,差别有统计学意义,0.45 mg/kg HPPH-PDT组细胞凋亡率稍高于0.3 mg/kgHPPH-PDT组,P>0.05,差别无统计学意义。故HPPH0.3 mg/kg是适宜的HPPH-PDT光敏剂剂量。HPPH-PDT0.3 mg/kg组和HpD-PDT组比较,肿瘤细胞凋亡率明显升高,P<0.01,差别有统计学意义。故由肿瘤细胞凋亡率和电镜分析,HPPH-PDT能诱导鼠G422脑胶质瘤细胞凋亡,凋亡率与HPPH剂量相关,适宜的剂量为0.3 mg/kg;HPPH-PDT诱导鼠G422脑胶质瘤细胞凋亡的作用较HpD-PDT强。结论:从电镜、FCM观察HPPH-PDT对鼠G422脑胶质瘤生长有抑制作用,能诱导肿瘤细胞凋亡及死亡。凋亡率与HPPH剂量有关,适宜的剂量为0.3 mg/kg;HPPH-PDT诱导鼠G422脑胶质瘤细胞凋亡的作用较HpD-PDT强。     

毫米波辐照诱导鼻咽癌细胞凋亡及分子机制的实验研究

采用细胞计数、光镜和FOM等方法检测毫米波对人鼻咽癌CNE1细胞增殖、细胞凋亡及相关基因表达的影响,结果发现：波长为7.1mm,频率为42.2GHz,功率密度为1mW/cm^2的毫米波辐照,1次／日,30min／次,照射4次,能显著抑制CNE1细胞增殖和克隆形成;并诱导细胞凋亡,光镜下可见到明显的凋亡细胞,FCM示调亡百分比显著增加。FCM结果表明其增殖抑制作用与P21表达上调及Cyclin D1表达下调有关,其调亡诱导机制可能是非P53依赖的途径,而主要通过上调c-Myc、下调Bcl-2和Fas基因的表达来实现。     

低强度超声对鼻咽癌CNE2细胞增值和凋亡的影响

目的：观察低强度超声对人鼻咽癌CNF2细胞增殖和凋亡的影响。方法：以低强度超声（频率1．7MHz,剂量1．35W／cm2）辐照CNF2细胞,采用MTT观察超声对COCl细胞增殖的抑制作用;光镜观察细胞形态,细胞核荧光染色法检测凋亡细胞。结果：超声波能够显著抑制鼻咽癌CNE2细胞增殖,辐照后孵育18h,其MTT光吸收值与对照组相比监著降低：光镜下可见细胞形态学改变,同时Hoechst 33258荧光染色法观察到亮蓝色着染的凋亡细胞。结论：低强度超声辐照对人鼻咽癌CNE2细胞体外生长具有明显的抑制作用,并可诱导其凋亡。     

光敏化BPD-MA后膀胱癌细胞凋亡的研究

为了研究光动力抑癌作用机制,采用流式细胞仪和TUNEL法检测激光光敏化BPD-MA后人膀胱癌细胞株BIU-87细胞凋亡的发生状况.激光光敏化BPD-MA后人膀胱癌细胞株BIU-87组细胞凋亡发生率明显增高,许多细胞核呈棕黄色,高倍镜下可见细胞核内有大量棕褐色颗粒,与阳性对照中凋亡细胞核的特征相符合,而对照组此种细胞少见.TUNEL阴性对照中细胞核均呈蓝色.结果表明,激光激活BPD-MA光动力作用明显诱导人膀胱癌细胞株BIU-87细胞发生凋亡,这可能是其抑癌作用机制之一.     

低强度激光视网膜损伤效应的实验研究

目的:观察低强度氦氖激光照射后动物视网膜的病理结构变化,为探讨低能量激光眼损伤的机理提供理论依据。方法:建立氦氖激光的大鼠眼损伤模型,通过眼底镜观察、组织病理技术以及原位末端标记等方法,观察大鼠在激光照后眼底形态和视网膜细胞的结构变化。结果:眼底镜观察发现激光照后大鼠视网膜血管出现痉挛、充血等可恢复性的变化,HE染色显示激光照后视网膜出现了视网膜的局部隆起改变和组织结构的紊乱,同时伴有感光细胞的凋亡。结论:氦氖激光在一定的条件下可造成视网膜的病理性损伤,而内、外核层感光细胞的凋亡可能是低能量氦氖激光视网膜损伤的重要机制。     

XIAP表达水平对5-Fu诱导肝癌细胞凋亡的影响

目的研究XIAP mRNA及蛋白表达水平对不同剂量5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil,5-Fu）诱导人肝癌细胞HepG2凋亡的影响。方法脂质体介导含XIAP基因全长的质粒pef-XIAP转染人肝癌细胞HepG2,采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）及western blotting检测XIAP基因和蛋白表达水平。通过不同剂量5-Fu诱导细胞凋亡,使用CCK-8试剂通过比色法分析检测5-Fu对转染pef-XIAP的HepG2细胞生长活性的抑制作用。结果各组HepG2细胞在不同剂量的5-Fu诱导下发生凋亡、与普通HepG2细胞组比较．转染XIAP基因的HepG2细胞组的凋亡率显著降低。结论XIAP基因在人肝癌细胞HepG2中的高表达可以明显降低化疗药物5-Fu诱导的细胞凋亡,其可能在肝癌化疗耐药中起一定作用。     

铜蒸气激光照射对血管平滑肌细胞凋亡的诱导作用及对其增殖的影响

目的：研究510.6nm铜蒸气激光照射对体外培养的血管平滑肌细胞（VSMC）凋亡的诱导作用，以及对增殖细胞核抗原（PCNA）表达的影响，探讨铜蒸气激光照射在经皮冠状动脉成形术（PTCA）后再狭窄（RS）的防治作用。方法：贴块法培养兔VSMC，510.6nm铜蒸气激光照射后透射电镜观察凋亡细胞形态学改变，TUNEL法计数凋亡细胞，免疫组化染色法计数照光对PCNA阳性表达率的影响。结果：激光照射后，VSMC凋亡率较未照光组增加12.8倍，而PCNA表达阳性率降低27．9％倍；电镜下观察细胞呈典型的凋亡形态学改变。结论：铜蒸气激光照射可以诱导VSMC凋亡，而且抑制其增殖，在RS的防治中具有一定的作用。