DNA疫苗的佐剂研究综述

DNA疫苗是新发展起来的一种疫苗。它有许多传统疫苗所没有的特点，但是其免疫原性较弱限制了应用。本文探讨了传统与新型分子免疫佐剂在提高DNA疫苗的免疫效果方面发生的作用，其中主要从细胞因子、趋化因子、CpG序列三个方面来说明。     

感染性疾病DNA疫苗研究进展（综述）

简要介绍丙型肝炎,爱滋病,结核病,疟疾,麻疹等几种感染性疾病DNA疫苗的重要发现。     

云南省HIV感染的流行及防制

背景：云南省是中国ＨＩＶ感染流行疫情较严重省份,其流行开始主要是由于地理位置靠近毒品生产地金三角和缅甸所致,至今流行日趋严重。方法：（１）监测方法１９８９至１９９１年使用高危人群常规检测方法,１９９１年后主要以哨点监测为主,现患调查补充,确定不同地区...     

爱滋病疫苗的选择性

在首个关于爱滋病疫苗的大型实验中，研究人员发现疫苗无法防止高危人群感染HIV病毒。     

HIV感染及疾病进展,宿主遗传和免疫保护机制的细胞？…

宿主的免疫和遗传因素对接触ＨＩＶ后的结果和其后ＨＩＶ病的发展都起着重要的作用。ＨＩＶ主要是靠ｇｐ１２０与靶结构的ＣＤ４分子结合而进入细胞内的，而病毒与靶细胞膜的融合是通过ｇｐ１２０与共受体ＣＣＲ５（趋化因子受体）结合来完成的。现已证明，３２ｂｐ缺失的突变ＣＣＲ５基因（ＣＣＲ５－△３２）不但影响宿主对ＨＩＶ感染的第三性而且还影响ＨＩＶ感染个体的疾病进展。突变ＣＣＲ纯合子显示出对ＨＩＶ感染的完全性保护     

DNA疫苗经基因枪介导的免疫研究

将基因枪介导的DNA疫苗用于小鼠腹部免疫,并用免疫组化法检测gD抗原在接种部位的表达,利用ELISA检测血清中的抗gD抗体,并采用病毒攻击检测DNA疫苗对动物的保护效果。结果表明,基因枪可有效地将DNA质粒运送至小鼠皮肤组织,DNA疫苗携带的抗原保护基因gD2糖蛋白能在真皮和肌肉组织中高效表达。同时,免疫小鼠体内产生高滴度的中和抗体,能有效抵抗HSV2病毒的攻击。     

艾滋病的感染途径,临床症状及防治

人类第一次知识艾滋病，发现艾滋病病毒对今已有１０余年了。这期间，人类不仅认识了其元凶是人类免疫缺陷性病毒，还建立了有效的诊断方法，开发了ＡＺＴ、ｄｄＩ、ｄｄＣＴ３ＴＣ等药物。然而，令人遗憾的是，患者和感染人数却不断加剧，专家们预测艾滋病将是２１世纪人类最大的敌人。     

重组治疗性乙型肝炎疫苗（YIC）的实验研究

研制了抗原-抗体复合物型乙肝治疗性疫苗。用小鼠实验证明这一治疗性疫苗的作用机理为：通过复合物中抗体Fc段与抗原呈递细胞表面的Fc受体结合,促进了细胞摄取抗原。复合物中的抗原经呈递后可比单纯抗原更有效地激活T细胞增殖,释放更多的γ-干扰素和白细胞介素-2,属TH1类型应答。复合物可在小鼠中诱生较单纯抗原诱生的抗-HBs高10倍以上。复合物还可诱生更强的细胞免疫,表现为经特异的抗原刺激后,γ-干扰素的mRNA量增多。还发现复合物可在对HBsAg低应答鼠系中（B 10.S）诱生与正常应答鼠相当的抗体效价。在HBsAg阳性转基因鼠中,复合物可使部分鼠的HBsAg转为阴性,并可产生抗-HBs,反映这一疫苗具有疗效。为制备人用乙肝治疗性疫苗建立了用重组酵母菌表达的HBsAg与人高效价抗乙肝免疫球蛋白组建治疗性疫苗的工艺,以及产品标化及效力的参比实验技术。     

应用梭状芽孢杆菌口服疫苗载体表达HIV p24蛋白的研究

应用一种不产毒的梭状芽孢杆菌（Clostridium perfringens,C.P.）作为口服疫苗载体表达HIVp24蛋白。用PCR扩增HIVp24基因,酶切后插入到含有C.P.序列的pJRC200质粒的CPEORF中,将重组的cp24质粒转化无致病作用的ATCC3624菌株。使HIVp24基因在C.P.形成芽孢时大量表达。结果应用SDS_PAGE和West Blot分析HIVp24在重组C.P.繁殖体和芽孢中的表达情况,发现HIVp24蛋白在C.P.芽孢体中大量表达,而在C.P.繁殖体中却没有表达。证明在体外构建了含有HIVp24基因的重组pJRC200质粒,成功地表达了HIVp24蛋白并得到了HIVp24的高表达ATCC3624菌株。为成功研究C.P.作为一种口服HIV疫苗载体奠定了基础。     

体外快速筛选抗HIV药物的一种新方法

目的:介绍一种体外快速筛选抗H IV药物的新方法。方法:采用荧光染料钙荧光素(Cal-ce in-AM)标记H IV感染的慢性H9细胞(H9/H IV-1ⅢB)与不同稀释浓度的药物作用后,与靶细胞MT-2细胞混合培养,2 h后用荧光显微镜观察MT-2和H9/H IV-1ⅢB融合细胞的变化;孵育3 d后用MTT法检测药物对H IV感染细胞的保护作用和H IV-1p24抗原试剂盒检测药物作用后的细胞培养上清p24抗原含量的变化。结果:药物(双黄连粉针剂)能够抑制MT-2和H9/H IV-1ⅢB细胞融合(双黄连粉针剂抑制融合的EC50为3.18 mg/L,选择指数SI大于314.5);能够保护H IV感染细胞的死亡(EC50为10.59 mg/L,SI大于94.43)和减少H IV-1p24抗原的表达(EC50为23.29 mg/L,SI大于42.9)。结论:运用此方法4~6 h即可初步判断药物是否具有抗H IV的作用,此方法可简便直观,敏感快速进行抗H IV药物的筛选。     

Three Candidate Peptide-Vaccines in Combination To Induce High Levels of Multiantibodies Against HIV-1

IntroductionIt has been demonstrated that humanimmunodeficiency virus type1 ( HIV- 1 ) gp41 isinvolved in HIV- 1 entry into the cell. Recentcrystal structure analysis of gp41 revealed that thebinding of gp1 2 0 to CD4and a co- receptor inducesthe conformational changes of gp41 ,resulting inthe exposure of the N- and C- domains and creationof a fusion intermediate and then the fusionprocess[1,2 ] .Itis generally agreed thatthe V3loopof gp1 2 0 plays a major role in the binding of gp1 2 0wit…     

人免疫缺陷病毒跨膜蛋白gp41在大肠杆菌中的表达

为研究廉价的HIV血清学诊断系统,实现检测试剂国产化,用原核pET系统表达HIV跨膜蛋白gp41.研究发现,全长及缺失C端1／3的gp41在E.coli中均不能有效表达,仅保留N端1／3的gp41(包含gp41主要抗原决定簇,594－613氨基酸）有一定量的表达;通过金属螯合层析,产物得到部分纯化,Western blot显示产物有很好的反应原性,推测gp41在E.coli中较低表达量可能与mRNA的二级结构有关。     

北京MSM人群HIV传播的贝叶斯推断

从北京地区收集了44例年轻男男同性恋(men who have sex with men,MSM)性行为者的人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)-1基因序列,利用贝叶斯推断从中提取了一些有价值的流行病学信息,得到了传播动力学的重要参数:有效再生数Re.研究结果显示,200...     

一类具有时滞的HIV-1感染模型

研究了一类具有时滞和Holling Ⅱ型的人类免疫缺陷病毒HIV-1感染模型.运用一致持续生存理论和逐次迭代法,得到模型永久持续生存和地方病平衡点全局渐近稳定的条件,完善了相关文献中的结果.     

Poly(dimethylsiloxane) based microchip for DNA electrophoresis

A novel poly(dimethylsiloxane)(PDMS) -based microchip for DNA separation through electrophoresis has been developed using a micro-electro-mechanical-system(MEMS) technology. Unlike previous hybrid PDMS microchip, one PDMS film is first created on glass support by pressing method in our microchip. Thus, increased band-broadening phenomena, arising from the material nonuniformity at the walls of microchannel, can be avoided in electrophoresis process. A low-viscosity hydroxypropylmethylcellulose-100 (HPMC-100) is used as the separation medium for fluorescent intercalator-labeled double-stranded DNA (dsDNA) fragments. Mannitol is introduced to PDMS-based microchip as a separation medium additive to enhance separation efficiency. At applied electric field strength of 150 V/cm, excellent separations of the PCR marker could be achieved with an effective separation distance of 25mm .     

六种蝗虫基因组DNA多态性的RAPD标记研究

运用随机扩增多态 DNA技术对斑翅蝗科 Oedipodidae中三属六种蝗虫基因组DNA进行了多态性比较 ,共扩增出 2 2条特异性片断 ,分子量大小为 650～ 1 990 bp之间 ,并根据各种间片段共享度构建了 UPG聚类关系图 .研究结果表明 ,大垫尖翅蝗和甘蒙尖翅蝗的片段共享度为 0 .375;红翅皱膝蝗和鼓翅皱膝蝗的片段共享度为 0 .2 86;亚洲小车蝗和黄胫小车蝗的片段共享度也为 0 .2 86     

黄瓜外源 DNA 导入技术方法研究

依据黄瓜的花器结构及开花习性,研究了通过花粉管通径将外源DNA 导入黄瓜子房的方式以及DNA 溶液的浓度、用量、pH 值和黄瓜花粉粒的渗透压等因紊对导入效果的影响.采用花粉与DNA 溶液混合授粉和子房微量注射均可成功的获得10~(-2)～10~(-3)的高遗传转化率.证明了应用外源DNA 导入进行黄瓜分子育种的可行性.     

乌头基因组DNA提取与RAPD反应体系优化

采用改进方法提取乌头基因组DNA,建立乌头RAPD分析的PCR反应体系,成功地进行了RAPD扩增,筛选出乌头RAPD的最佳方案为:25μl反应体系中包括dNTPs 0.06 mmol·L-1,引物0.2μmol.μL-1,模板DNA40 ng,Taq酶1U,Mg2+ 4 mmol·L-1,10×buffer缓冲液2.5μl,其余部分为无菌超纯水。PCR扩增循环为95℃3 min,38 ℃1 min,72 ℃2min 1次循环;94 ℃=1 min,38℃1 min,72 ℃2 min,45次循环,最后72℃延伸10 min。