杨树叶片蛋白质组分析

从杨树叶片的双向电泳蛋白图谱上随机选取12个蛋白点,经电喷雾串联质谱(Electrospray ionization tandem mass spectrometry ,ESIMSMS)分析。结果显示,这12个蛋白点代表了5种不同的蛋白,其中包括：核酮糖二磷酸缩化酶/加氧酶(RuBisCO)、富甘氨酸RNA结合蛋白(Glycine rich RNA binding protein)、微管蛋白(alpha tubulin)、叶绿体磷酸甘油酸激酶(chloroplast phosphoglycerate kinase)以及光敏色素(phytochrome B2)蛋白等。     

适于双向电泳分析的银杏叶绿体蛋白质提取方法

【目的】获得银杏叶绿体蛋白质的提取方法,在蛋白质水平探讨银杏光合作用对环境的响应机制。【方法】建立一种适合银杏叶绿体蛋白双向电泳分离的实验体系,采用Tris-平衡酚抽提法对银杏叶绿体蛋白质进行提取,并与三氯乙酸(TCA)-丙酮沉降法进行对比分析。【结果】Percoll密度梯度离心法适用于银杏叶绿体的提取,提取的叶绿体平均完整率在85%左右。单向电泳结果显示,与TCA-丙酮沉降法相比,在用Tris-平衡酚抽提法分离的叶绿体蛋白质泳道中,低分子质量蛋白质条带更多、更清晰。进一步的双向电泳结果表明,用Tris-平衡酚抽提法对银杏叶绿体蛋白质进行提取,蛋白质产量更高,图谱清晰,所分离的蛋白点更多,形态更好,条纹影响相对较小。【结论】Tris-平衡酚抽提法可有效地提取高质量的叶绿体蛋白质并进行双向电泳,可用于银杏叶绿体的蛋白质组学分析。     

一种适用于胡杨叶片非变性蛋白质提取的方法

为探索适用于胡杨叶片非变性蛋白质的提取方法,以采自内蒙古额济纳旗天然胡杨林中胡杨成熟叶片为材料,采用咪唑法、Bis-Tris法、Tris-HCl法和新构建的Tris-SSAD法4种非变性蛋白质提取策略,分别用于提取胡杨叶片蛋白质样品;随后进行第一维非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(1~(st)-DE:Native-PAGE)。相比之下,只有Tris-SSAD法获得了清晰、条带数目较多的Native-PAGE图谱,且结合第二维变性凝胶电泳(2~(nd)-DE:SDS-PAGE)可成功分离出较多蛋白质复合体亚基或相互作用蛋白质分子,证明了Tris-SSAD法非变性温和提取特性。研究建立并优化了适用于胡杨叶片的非变性蛋白质提取方法,为后续进一步分析蛋白质与蛋白质相互作用及蛋白质复合体功能提供了实验基础。     

优化海兔肝蛋白质组提取与分离技术

为了提高海兔肝脏蛋白质组的提取及研究效率，本文描述和比较了3种提取海兔肝脏蛋白质组的方法：裂解液浸泡-超速离心，丙酮-TCA沉淀-裂解液浸泡，裂解液浸泡-丙酮-TCA-裂解液溶解．然后采用常规SDS-PAGE双向电泳对提取出的蛋白质进行检验，用Melanie 4 Trial软件分析电泳图谱，通过对蛋白质分辨率和斑点总数的比较，选出一种更适合海兔肝蛋白质的提取方法．结果表明采用丙酮-TCA沉淀-裂解液浸泡法提取海兔肝蛋白质所得的双向电泳图谱不论从蛋白质斑点分辨率还是总数上都优于其他两种方法，更适合提取分离海兔肝脏蛋白质．     

甘蔗叶片蛋白质组双向电泳技术优化

为了建立适合甘蔗叶片蛋白质组研究的双向电泳技术,对甘蔗叶蛋白质的溶解方法、IEF电泳、上样量等关键步骤进行了优化.结果表明:裂解液中有2 mmol/L的硫脲才能更充分地溶解蛋白;上样量1.0 mg时得到质量较好的凝胶图谱;甘蔗叶片蛋白质主要分布在pH4～7范围.通过对甘蔗叶片蛋白双向电泳技术的优化,提高了双向电泳图谱分...     

大豆蛋白质提取新工艺

该文针对普通工艺中大量使用碱液直接处理大豆而造成的原料中营养成分损害大，蛋白质产品产量低，纯度低等缺点，提出用离子强度为０．６的ＮａＣｌ溶液萃取大豆蛋白质和用ＨＣｌ溶液调聚大豆蛋白质的新工艺。     

优化海兔肝蛋白质组提取与分离技术

为了提高海兔肝脏蛋白质组的提取及研究效率,本文描述和比较了3种提取海兔肝脏蛋白质组的方法裂解液浸泡-超速离心,丙酮-TCA沉淀-裂解液浸泡,裂解液浸泡-丙酮-TCA-裂解液溶解.然后采用常规SDS-PAGE双向电泳对提取出的蛋白质进行检验,用Melanie 4 Trial软件分析电泳图谱,通过对蛋白质分辨率和斑点总数的比较,选出一种更适合海兔肝蛋白质的提取方法.结果表明采用丙酮-TCA沉淀-裂解液浸泡法提取海兔肝蛋白质所得的双向电泳图谱不论从蛋白质斑点分辨率还是总数上都优于其他两种方法,更适合提取分离海兔肝脏蛋白质.     

佤族民间药用动物红蚂蚁蛋白质的提取方法改进

以红蚂蚁为原料,采用单因素实验法,分别用3种盐对红蚂蚁蛋白质的提取条件进行了研究.结果表明,最适合的盐是硫酸铵;最好的提取条件为:固液比(w/v)=1:10、盐浓度为1%、pH=4.0、抽提时间为2h,所得的蛋白质提取率最高为为36%,最低为13%.     

板蓝根生药中蛋白质提取方法的比较

分别以40％乙醇、20％乙醇和0．02mol／L盐酸3种提取液来提取生药板蓝根中的蛋白质，并以Tris-HCl缓冲液为对照，用752紫外分光光度计测定各样品提取液的O．D值，计算蛋白质的含量：蛋白质浓度(mg／mL)=1．45D280-0．74D260，同时测定各样品的血凝活性，并对板蓝根中蛋白质含量与血凝活性的相关性进行了分析．实验结果表明：3种提取液对同一种板蓝根生药中蛋白质的提取量存在显著差异，其中以40％乙醇为提取液所测得的蛋白质含量最高，但蛋白质含量多少与血凝活性之间并无明显相关性．     

蚂蚁蛋白质提取方法的比较研究

以铺道蚁(Tetramorium caespitum)为实验材料,采用正交试验法,对蚂蚁蛋白质的提取条件进行了研究.实验分别采用碱提蛋白法、盐提蛋白法、Tris-HCl缓冲液提蛋白法等3种提取方法.对其主要条件:不同浓度、浸提温度、浸提时间、固液比以及Tris-HCl液的pH值等进行了研究.结果表明,碱提蛋白法的最佳条件为:碱液浓度为1%,固液比为1∶15,浸提时间为60 min,浸提温度为80℃;盐提蛋白法的最佳条件为:盐液浓度为1.5%,固液比为1∶15,浸提时间为60 min,浸提温度为50℃;Tris-HCl缓冲液提蛋白法的最佳条件为:pH值为8.3,固液比为1∶15,浸提时间为90 min,浸提温度为20℃.在这3种方法中,碱提蛋白法的蛋白质得率最高,其次为盐提蛋白法,而Tris-HCl缓冲液提蛋白法最低.     

一种适用于盐生植物的RNA提取方法

介绍了一种红树ＲＮＡ提取方法，此法无需特殊试剂和贵重仪器设备，可有效地排除红树细胞中大量存在的胶质和多糖类物质的干扰，所得ＲＮＡ样品经紫外分光光度计检测和１％琼脂糖凝胶电泳分析证明具有较高的纯度和完整性，可满足多数分子生物学实验的需要，尤其适用于提取多糖含量较高的植物细胞的ＲＮＡ．     

白芥叶片总RNA提取方法的比较研究

以白芥为材料,分别采用柱式植物总RNA抽提纯化试剂盒法、RNAisoPlus法和CTAB-异丙醇法3种方法提取白芥叶片总RNA,通过琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度计及RT-PCR反应进行检测,最后对3种方法得到的结果进行分析比较．结果表明,RNAisoPlus法提取出的总RNA条带与其他方法相比更为清晰,A260／A280比值介于1．9～2．1之间,该方法更适合用于白芥叶片总RNA的提取．     

竹叶多糖的提取工艺

目的：筛选竹叶多糖提取优化的最佳工艺.方法：以竹叶多糖为工艺筛选指标,采用正交实验设计方法筛选最佳提取工艺及其条件.结果：竹叶多糖最佳提取工艺为石油醚回流2 h,滤渣用95%乙醇回流2 h,再用30倍量的水回流3次浸提多糖.用Sevage法除蛋白,加入乙醇使含醇量为80%,于冰箱静置12 h,得多糖沉淀.采用优化后的工艺提取竹叶多糖粗品的得率约0.51%.结论：采用该提取工艺,竹叶多糖的提取率较高.     

鲜竹叶中叶绿素的超声波萃取

研究了利用超声波萃取鲜竹叶中叶绿素的新方法.以分光光度计定量测定所萃取的叶绿素.结果表明,与常用的有机溶剂提取法相比,超声波萃取法不仅萃取率高、速度快、效率高,而且是室温提取,无需加热,节约能源.     

银杏叶中总黄酮的提取

分别以不同比例的四氢呋喃-乙醇、乙醇-水为溶剂,采用水浴回流和浸泡法提取银杏叶中总黄酮,用分光光度法测定提取率.结果表明:采用水浴回流法时,以体积比为3∶1的四氢呋喃/乙醇为溶剂,银杏叶质量(g)与溶剂体积(mL)比为1∶13.3、水浴温度为50℃、时间为2 h,提取率可达14.7%;采用浸泡法时,以体积比为3∶1的乙醇/水为溶剂,银杏叶质量(g)与溶剂体积(mL)比为1∶10、浸泡时间为24 h,提取率最高达9.3%.     

超声波辅助提取莴笋叶中黄酮类物质工艺的研究

在单因素试验基础上,采用正交试验法,对超声波辅助提取莴笋叶中黄酮类物质的工艺进行了优化.确定其最佳提取工艺为:90%乙醇作为浸提剂,超声功率500 W,超声时间50 min,液料比4 mL/g.在此条件下,黄酮类物质的提取率为0.35%.     

醇提-酯萃法提取竹叶中的总黄酮

研究了醇提-酯萃法提取竹叶中总黄酮的各种影响因素，采用正交试验寻找最佳提取条件，实验结果表明：15倍原料重的75%乙醇在70 ℃温度下提取5 h为最佳.     

湖南废次烟叶中茄尼醇的提取工艺研究

采用有机溶剂浸取法提取湖南废次烟叶中的茄尼醇,单因素实验获得了其较佳工艺条件为：正己烷为溶剂,浸取温度为30℃,浸取2个小时,重复浸取2次.在该较佳工艺条件下进行实验,提取率为1.25%,得率为90%.