猪垂体Poly（A）~＋RNA的制备及其体外翻译

本文用ＬｉＣｌ沉淀法提取了猪垂体总ＲＮＡ，经。ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）－ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ柱亲和层析，分离纯化了猪垂体Ｐｏｌｙ（Ａ）＋ＲＮＡ．用自制的兔网织红细胞体外翻译体系鉴定，表明该Ｐｏｌｙ／（Ａ）＋ＲＮＡ具有较高的翻译活性．ＳＤＳ－ＰＡＯＥ，放射自显影分析翻译产物提示，在制各的猪垂体Ｐｏｌｙ（Ａ）＋ＲＮＡ中，编码猪生长激素前体的ｍＲＮＡ占有较高的比例．     

胃癌抗体、胎儿胃粘膜抗体及免疫活性碎片研究

胃癌对人类的危害是目前国内外密切注意的问题。H(?)kkinen认为胎儿硫糖蛋白是胃癌胃液特异的糖蛋白抗原,它存在于胃癌细胞及癌组织周围的粘液细胞内。为进一步阐明癌细胞与抗体的结合特性,有必要对抗原存在的部位及抗体的性质进行深入的了解。我们制备特异性抗体,用间接免疫萤光技术以识别胃的正常细胞及癌变细胞,探讨胃癌细胞表面抗原存在的部位。并比较了胃癌抗体、胎儿胃粘膜抗体及其碎片的性质。     

尤文肉瘤细胞总RNA转染的DC疫苗体外诱导尤文肉瘤患者特异性抗肿瘤免疫的实验研究

为了探讨尤文肉瘤细胞总RNA转染的DC疫苗体外诱导特异性抗肿瘤免疫的能力,采用分离尤文肉瘤患者外周血单核细胞体外诱导DC细胞,Trizol法提取患者尤文肉瘤细胞总RNA,用总RNA转染DC并诱导特异性CTL的扩增,用RT-PCR方法检测肿瘤总RNA加载的DC细胞的表达,用MTT法检测淋巴细胞的增殖和CTL的杀伤活性.结果RT-PCR测定显示尤文肉瘤细胞总RNA转染的DC细胞可以呈递肿瘤特异性抗原,并特异性地表达其特有序列EWS-FLI1.经尤文肉瘤细胞总RNA转染的DC特异性表面标志及功能相关分子表达均上调,转染后的DC可显著刺激自体T淋巴细胞增殖.诱导的特异性CTL对携带EWS-FLI1抗原的靶细胞的杀伤率显著高于LAK细胞和未经转染的DC.说明尤文肉瘤细胞总RNA转染的DC疫苗可在体外诱导出特异性抗肿瘤免疫.     

二次免疫后家猫抗体形成细胞发育分化的免疫组织化学研究

用辣根过氧化物酶（HRP）作为抗原，与福氏佐剂一起对家猫进行二次免疫，追踪淋巴结中抗体形成细胞的发育和分化，并与已建立的细胞发育动力学模型进行分析比较，二次免疫后2－3d，淋纠结的皮、髓两区同时出现阳性反应细胞，免疫后7－9d两区阳性细胞连成一片，数量达到高峰，随后两区阳性细胞数下降，早期阳性细胞以淋巴细胞为主，高峰期则以前浆细胞和浆细胞为主，且各种类型细胞均匀分布，抗体形成细胞的形态学结果与已建立的数量模型和变异系数模型极为相符。     

SARS冠状病毒RNA聚合酶基因片段体外组装和siRNA干扰研究

为了安全便捷地获取严重急性呼吸系统综合征冠状病毒(Severe Acute Respiratory Syndrome coronavirus,SARS coronavirus)的RdRp基因,作者合成了26条寡聚核苷酸片段,利用组装PCR(assembly PCR)在体外构建了SARS病毒的RdRp基因片段,并建立了基于Vero E6细胞的SARS RdRp基因的稳定表达株.之后设计了4对针对SARS RdRp基因的siRNA,基因干扰表明这4对siRNA均能高效干扰SARS RdRp基因在Vero E6细胞中的表达.至此,本文提供了一种安全便捷地获取病毒基因的方法.     

鸡新城疫母源抗体的消长规律及其免疫效果研究

为探讨科学的鸡新城疫免疫程序,对1～28日龄的土杂肉鸡和罗曼蛋鸡进行新城疫母源抗体的检测,并对两种雏鸡接种新城疫冻干疫苗和油乳剂疫苗后的HI抗体水平进行了检测。结果表明,两种雏鸡的母源抗体水平在1日龄时均达最高值,然后逐渐下降;肉鸡11日龄后降低到5.2log2以下,蛋鸡28日龄后降低到4.3log2以下。分别对肉鸡在12日龄时进行首免,蛋鸡在11日龄时进行提前首免可获得较高的抗体水平,根据试验所用的免疫方案,可有效预防鸡新城疫的发生。     

未免疫猪乙型脑炎抗体消长规律动态研究

文章旨在了解未免疫猪群乙型脑炎病毒的感染以及抗体消长规律,2008年6月～10月期间选定甘肃省某猪场40头未进行乙型脑炎免疫的猪,分别采集脐带血、15、30、45、60、75、90、120、150日龄血清,采用间接Elisa检测乙型脑炎抗体含量并绘制曲线.结果有效数据32份,抗体总阳性率为96.88%,抗体平均OD值曲线,出现3个波峰和2个波谷.通过分析,3个波峰分别来源于母乳、第一次感染和第二次感染,母源抗体维持时间较短,感染病毒后抗体强度和维持时间逐渐加强.因此在今后应该重视乙型脑炎病毒感染的严重性,加强管理和免疫,不但保护猪群,并且对公共卫生体系的建立也有重要的意义.     

共价固定乙肝表面抗体电容型免疫传感器研究

利用硫脲中的硫原子和金之间强的共价效应,以及氨基与醛基的键合作用,将乙肝表面抗体(HBsAb)牢牢的固定在金电极表面,同时通过十二硫醇封闭电极,从而制得高灵敏、高稳定电容型乙肝表面抗原(HBsAg)免疫传感器。通过交流阻抗技术考察了溶液pH值和离子强度对电极性能的影响。结果表明:该免疫传感器操作简便,易于再生,电容响应与乙肝表面抗原浓度在7.5~750 ng.mL-1范围内呈线性关系,检出限为1.9 ng/mL。     

重用抗体优良片断的免疫进化算法

基于克隆选择原理与算法,通过分析具体现象阐述了改进克隆选择算法的思想来源,设计了挖掘抗体中优秀决定基因并生成记忆集、封装优秀决定基片段、用变异抗体群中亲和度高的抗体按概率替换记忆抗体群中低亲和度抗体的方法,获得了重用抗体优良片断的克隆选择算法.借鉴强度Pareto进化算法的进化框架,提出了重用抗体优良片断的免疫进化算法.该算法通过克隆选择替代选择、交叉、重组等遗传操作.在一组0/1背包问题上的测试结果表明,所提出的算法可以有效保持种群多样性,获得较高质量的Pareto非劣解集.
     

国产第一代β-hCG避孕疫苗免疫恒河猴的抗体反应及免疫安全性研究

用国产第一代ｈＣＧ避孕疫苗（以β－ｈＣＧ－ＴＴ为免疫原制备的氢氧化铝吸附制剂）免疫成年雌性恒河猴,评价疫苗在实验猴体内诱发抗ｈＣＧ抗体的能力和免疫安全性．结果显示疫苗能在实验猴诱发抗ｈＣＧ抗体,但抗体滴度较低（峰滴度为１４０００）,持续时间较短,加入Ｆｒｅｕｎｄ’ｓ佐剂免疫能显著增强动物的抗体反应（峰滴度可达１６４０００）,免疫猴对强化免疫有较好的记忆反应．免疫前后各免疫猴血液红细胞数、血红蛋白含量、白细胞数、白细胞分类计数均未见异常,血清谷丙转氨酶、总蛋白、白蛋白等肝脏功能指标也未见异常．免疫猴心、肝、肾、脾、胰腺、腺垂体、卵巢、子宫等器官未发现组织病理学改变．．     

体外诱导骨肉瘤特异性抗肿瘤的免疫实验

采用分离骨肉瘤患者外周血单核细胞体外诱导DC细胞,Trizol法提取患者骨肉瘤细胞总RNA,用总RNA转染DC并诱导特异性CTL的扩增,用MTT法检测淋巴细胞的增殖和CTL的杀伤活性。探讨骨肉瘤细胞总RNA转染的DC疫苗体外诱导特异性抗肿瘤免疫的能力。经骨肉瘤细胞总RNA转染的DC特异性表面标志及功能相关分子表达均上调,转染后的DC可显著刺激自体T淋巴细胞增殖,诱导的特异性CTL对靶细胞的杀伤率显著高于单纯淋巴细胞和未经转染的DC。说明骨肉瘤细胞总RNA转染的DC疫苗可在体外诱导出特异性抗肿瘤免疫。     

基于免疫与神经网络的 RNA 二级结构预测

RNA二级结构预测是生物信息学领域的一个热点问题，通过计算机仿真模拟和数学建模计算来“预测”这些结构信息，具有较好的参考价值以及可信度，并能够节省大量的时间与成本。本文通过改进传统的RNA二级结构预测算法，提出了混沌Hopfield神经网络算法算法。算法以茎区作为神经元，同时采用相似距离函数、对神经元的初始值进行优化，在获得初步结果后，通过使用混沌函数优化结果，使得其跳出局部最优解，提高了全局搜索能力，能简单、快速规范的获得最优解。仿真结果表明，本算法能够有效的对RNA二级结构进行预测，有较好的的预测效果。     

鸡禽流感母源抗体的消长规律及其免疫效果研究

为探讨科学的鸡禽流感免疫程序,对1～28日龄的土杂肉鸡和罗曼蛋鸡进行禽流感母源抗体检测,以及对雏鸡 接种禽流感油乳剂疫苗后的HI抗体水平变化进行了监测。结果表明,两种雏鸡的母源抗体水平在1日龄时均达最高值,然后 逐渐下降;肉鸡11日龄后H5、H9抗体滴度分别降低到4.2log2和4.3log2以下;蛋鸡28日龄后H5、H9抗体滴度分别降低到 4.2log2和4.8log2以下;分别对肉鸡在11日龄时进行首免,蛋鸡在7日龄时进行提前首免后均可获得较高的抗体水平;同时 根据试验所用的免疫方案,可有效预防鸡禽流感的发生。     

鸡禽流感母源抗体的消长规律及其免疫效果研究

为探讨科学的鸡禽流感免疫程序,对1～28日龄的土杂肉鸡和罗曼蛋鸡进行禽流感母源抗体检测,以及对雏鸡接种禽流感油乳剂疫苗后的HI抗体水平变化进行了监测。结果表明,两种雏鸡的母源抗体水平在1日龄时均达最高值,然后逐渐下降;肉鸡11日龄后H5、H9抗体滴度分别降低到4.2log2和4.3log2以下;蛋鸡28日龄后H5、H9...     

一次免疫后抗体形成细胞发育的免疫细胞化学研究

本文以辣根过氧化物酶(HRP)与福氏完全佐剂混合成的乳液对雄性豚鼠作一次免疫,追踪腘淋巴结中抗体形成细胞的分化途径和变化。一次免疫后抗体形成细胞分化的途径与前文所述的二次免疫是相同的,只是免疫应答开始时间较二次免疫晚。在免疫后8天的皮质区和髓质区,同时出现分散的含抗体的阳性细胞,主要是浅棕色的小淋巴细胞和中淋巴细胞。从10天起,这二个区域的阳性细胞明显增加,细胞染色加深,至24天,阳性细胞大量增多达高峰,以棕色和栋褐色的前浆细胞和浆细胞为主,淋巴结的大部分区域充满着阳性细胞。从30天起,阳性细胞在皮质和髓质区都急副下降,至50天,淋巴结中只存在少数分散的阳性细胞,部分细胞成为不规则形的残留浆细胞。     

RNA研究的新进展

RNA研究的新成果不断出现和有关RNA操作新技术的应用是进入21世纪以来分子生物学研究的重要突破之一。依据国内外的大量最新资料,主要述评RNA研究中所揭示的新理念、反义RNA技术应用进展、RNA干扰等新突破和新技术的研究进展,包括植物、动物、医学等各个领域的内容。     

新型肿瘤细胞膜重组脂质体体外免疫激活作用的实验研究

将肿瘤细胞膜与人工脂质体重组,制备新型重组复合体并探索其体外免疫活性.热处理S180细胞并收集裂解细胞膜,重组于人工脂质体得重组复合体,电镜和Weston杂交鉴定重组复合体.体外培养观察该复合体对小鼠树突状细胞及淋巴细胞的影响,流式细胞仪分析CD11c,CD80,CD86等表面标志,3H-TdR掺入测定淋巴细胞增殖.设立单纯细胞膜碎片及单纯脂质体组为对照.裂解肿瘤细胞膜可以重组复合于人工脂质体,形成稳定的复合物,可刺激DC成熟,促进淋巴细胞增殖,与对照组均有显著差异(P<0.05).肿瘤细胞膜重组脂质体可以显著改善肿瘤的体外免疫原性,为快速的个体化肿瘤免疫治疗提供了新思路.     

不育相关抗精子抗体的免疫印迹分析

目的；分析与不育相关的抗精子抗体。方法：用精子膜抗的Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ法，对７８例生育、１９８例不孕、２２例流产及４４ 晚期妊娠孕妇血清抗精子抗体进行研究，分析与不育相关的ＡｓＡｂ。结果：抗分子量８５０００、５１０００、３００００精子抗胡的ＡｓＡｂ与不孕相关；抗分子量８５０００、７９０００、６９０００、５１０００精子抗原的ＡｓＡｂ与女性不孕相关；不孕女性ＡｓＡｂ种类明显多于生育女性，抗分子     

免疫微球吸附实验的建立——II关于抗体吸附力的研究

通过凝胶层析法对新型免疫微球Ｌａｔｅｘ－ｐｓ８７的抗体吸附率进行研究，结果表明：该微球表面对抗体有较强的吸附能力，吸附程度达９０％以上，适合用作免疫诊断的抗原或抗体的载体。