1-萘酚诱导人血清白蛋白和牛血清白蛋白构象的变化

采用稳态荧光光谱、同步荧光光谱、荧光共振能量转移技术结合分子对接法,探究了1-萘酚(1-OHNap)诱导人血清白蛋白(HSA)和牛血清白蛋白(BSA)构象变化的差异.结果 表明,与1-OHNap的结合作用使HSA中荧光团周围微环境极性发生改变,BSA中Trp残基周围微环境的极性增加;同时,与1-OHNap的结合作用使H...     

Reversible Dimerization of Human Serum Albumin

Pulsed Dipolar Spectroscopy (PDS) methods of Electron Paramagnetic Resonance (EPR) were used to detect and characterize reversible non-covalent dimers of Human Serum Albumin (HSA), the most abundant protein in human plasma. The spin labels, MTSL and OX063, were attached to Cys-34 and these chemical modifications of Cys-34 did affect the dimerization of HSA, indicating that other post-translational modifications can modulate dimer formation. At physiologically relevant concentrations, HSA does form weak, non-covalent dimers with a well-defined structure. Dimer formation is readily reversible into monomers. Dimerization is very relevant to the role of HSA in the transport, binding, and other physiological processes.     

厚朴酚与人血清白蛋白的相互作用研究

利用荧光光谱、CD和FTIR技术研究了模拟生理条件下厚朴酚与人血清白蛋白的相互作用,计算了反应的结合常数、结合位点数和热力学参数。厚朴酚在人血清白蛋白上的结合位置与色氨酸残基间的距离为2.34 nm。分子模型研究表明,厚朴酚与HSA在亚结构域IIA结合,二者间的作用力主要为疏水作用。CD结果表明,厚朴酚与HSA的键合使HSA中α-螺旋结构含量从46.6%降到39.9%。     

Inside Back Cover: Allosteric Modulation of Human Serum Albumin Induced by Peptide Ligand (Chin. J. Chem. 8/2017)

The inside back cover picture shows the allosteric modulation of human serum albumin (HSA) induced by the Peptide SA06 ligand. Peptide SA06 is a reported peptide ligand comprising 20 amino acids, and is known to non‐covalently bind with HSA to extend the lifetime and improve the pharmacokinetic performance of drug molecules. The structural evidence on the allosteric interaction between peptide ligand and HSA, and the structure‐affinity relations of the binding mechanism have been revealed in this work, which can also shed light on optimization of therapeutic properties in the affinity‐controlled delivery systems. More details are discussed in the article by Wang et al. on page 1270–1277.

     

荧光法研究氢氯噻嗪与人血清白蛋白的相互作用

采用荧光光度法研究了不同酸度下,降压利尿药氢氯噻嗪(Hydrochlomthiazide)与人血清白蛋白(HSA)间的相互作用。求得不同酸度下药物与人血清白蛋白相互作用的形成常数,讨论了微量金属离子对药物与血清白蛋白形成常数的影响,并根据热力学常数确定了该药物与血清白蛋白之间的作用力类型,在此基础上依据福斯特Foerster非辐射能量转移机理探讨了氢氯噻嗪与人血清白蛋白相互结合时其给体-受体间的距离和能量转移效率。从而证实了氢氯噻嗪与人血清白蛋白结合作用为静态猝灭过程,且阐明了其猝灭机制是通过能量转移产生的。     

牛血清白蛋白-Cu2＋结合过程中盐酸小檗碱的变构效应

用核磁共振(1H NMR)、圆二色谱(CD)、荧光光谱(FS)以及紫外光谱(UV)技术考察了中药有效成分盐酸小檗碱(BC)对牛血清白蛋白(BSA)-Cu2＋结合过程的变构效应, 得到分别表征BSA内源荧光猝灭、BSA-Cu2＋复合物稳定性以及Cu2＋在BSA分子上的结合位点发生变构的定量效应参数βQ (βA和βn)和效率参数γQ (γA和γn). 结果表明, BC对Cu2＋猝灭BSA内源荧光呈负变构效应(0＜βQ＜1), 而对BSA-Cu2＋复合物稳定性以及Cu2＋在BSA分子上的结合位点呈正变构效应(βA＞1, βn＞1); 变构效应随BC浓度增加而增强, BC对BSA-Cu2＋复合物稳定性的变构效率明显高于其对荧光猝灭和结合位点的变构; BSA分子构象转变是变构效应的主要原因.     

用铍试剂测定人血清白蛋白的分光光度法

在pH3.6的缓冲溶液中，铍试剂Ⅲ与人血清白蛋白（HSA）能形成复合物，吸光度与HSA的含量呈线性关系；复合物的最大吸收峰波长λmax=460nm,比铍试剂本身紫移80nm左右；HSA标准曲线线性范围为20－140mg/L；实验表明该反应选择性、重复性很好，操作简便，适用测定含量范围宽，测定结果与传统的考马斯亮蓝法结果相吻合。     

分析型色谱饼对人血清白蛋白的快速纯化

采用分析型色谱饼对标准蛋白混合物进行了分离,结果表明装填有小颗粒填料的色谱饼在高流速条件下仍然具有良好的分离能力。在较大流速(5 mL/min)条件下,在10 min内对人血清白蛋白样品进行了快速纯化,其纯化后的人血清白蛋白的纯度大于85%,回收率为65%,说明分析型色谱饼可以用于快速分离纯化生物大分子。     

利用光学生物传感器研究阿霉素与人血清白蛋白的相互作用

用IAsys光生物传感器研究了阿霉素以及阿霉素铁配合物与人血清白蛋白的相互作用．求出了五个不同温度下．结合和解离的动力学平衡常数,并且对阿霉素与人血清白蛋白相互作用的热力学进行了研究,结果表明：随温度的升高,阿霉素与人血清白蛋白的结合作用逐渐增强,说明温度升高有利于结合反应的进行;相同温度下,阿霉素铁配合物与人血清白蛋白结合的平衡常数是阿霉素与该蛋白结合常数的7倍．阿霉素与人血清白蛋白的结合过程是一个吸热的熵驱动的过程,水分子重组在结合过程中起了重要作用,它们之间的作用力主要为疏水作用力．     

黄芩苷与人血清白蛋白的相互作用研究

利用紫外光谱、荧光光谱、傅立叶红外谱、圆二色谱及分子模型等技术,在生理pH条件下,研究了黄芩苷与人血清白蛋白(HSA)的相互作用,并计算了其结合常数和热力学参数.分子模型研究表明,黄芩苷与HSA在亚结构域ⅡA结合,二者间的作用主要为静电作用和疏水作用,与荧光光谱结果基本一致.红外光谱和圆二色谱显示黄芩苷与HSA结合后未...     

人血清白蛋白和牛血清白蛋白荧光量子产率的测量

以L-色氨酸荧光量子产率0．14为标准,测量了人血清白蛋白和牛血清白蛋白水溶液在不同激发波长下的荧光量子产率。在pH6．4和25℃条件下,人血清白蛋白和牛血清白蛋白在最大激发波长280nm的荧光量子产率分别为0．132和0．130。实验发现,pH对蛋白质荧光强度有明显影响,溶解氧对荧光量子产率基本没有影响。     

光谱法研究根皮苷与人血清白蛋白相互作用

在模拟生理条件下,采用荧光光谱、紫外光谱和同步荧光光谱法研究了根皮苷(Phlorizin)与人血清白蛋白(HSA)的相互作用。结果表明:根皮苷能使HSA发生内源荧光猝灭,属静态猝灭。在293、303 K和313 K下,根皮苷与HSA的结合常数分别为3.163 5×105、1.774 8×105、1.193 5×105L.mol-1,结合位点数n近似为1;热力学分析表明根皮苷与HSA间的结合力为氢键及范德华力;根据Frster非辐射能量转移理论求得二者结合距离为3.97 nm;同步荧光光谱表明根皮苷主要与HSA中的色氨酸残基发生相互作用,改变色氨酸周围的局部构象;金属离子的介入会影响根皮苷与HSA的结合能力。     

甲磺酸培氟沙星与人血清白蛋白相互作用研究

以光谱技术和微量热技术相结合的方法研究水溶液中甲磺酸培氟沙星分子及其铜离子存在时与人血清白蛋白之间结合作用的机制,用荧光淬灭法测得两反应的结合常数分别为K＝1.7 × l0⁵L.mol^-1和1.61×10⁵L.mol^-1，结合位点数1.05和1.5。甲磺酸培氟沙星对人血清白蛋白的猝灭为静态猝灭。依据Fōrster非辐射能量转移机制，得到甲磺酸培氟沙星—人血清白蛋白间的结合距离。用同步荧光技术考察甲磺酸培氟沙星对人血清白蛋白构象的影响。微量热法测得甲磺酸培氟沙星与人血清白蛋白反应的△H≈0, △S﹥0 表明其作用力主要为疏水力,而甲磺酸培氟沙星分子在铜离子存在时与人血清白蛋白反应的△H﹤0并且△S﹥0表明主要是静电作用。由于焓熵互补的作用,两反应的自由能没有发生大的变化。     

荧光光谱法研究双醋瑞因与人血清白蛋白的相互作用

在模拟人体生理条件下（pH=7.40）,采用荧光光谱法研究双醋瑞因与人血清白蛋白的相互作用。 采用2种方法计算不同温度下其结合常数KA、结合位点数n,同时对2种计算方法进行了比较;并根据热力学参数确定了双醋瑞因与人血清白蛋白之间的作用力类型。 根据Forster非辐射能量转移原理,确定了双醋瑞因与人血清白蛋白相互结合时供能体 受能体间的作用距离和能量转移效率,并用同步荧光光谱研究了双醋瑞因对人血清白蛋白构象的影响。 结果表明,双醋瑞因与人血清白蛋白之间主要是以静态猝灭为主;结合距离r=2.88 nm,能量转移效率E=0.273 8,二者主要凭借氢键和范德华力进行结合。     

A Thermodynamic Study on the Binding of Human Serum Albumin with Lanthanum Ion

Thermodynamics of the interaction between lanthanum(III) ion, La³⁺, and human serum albumin (HSA), was investigated at pH 7.0 and 300 K in Tris‐HCl buffer by isothermal titration calorimetry. A solvation model was used to reproduce the enthalpies of HSA interaction with La³⁺. The solvation parameters recovered from our new model were attributed to the structural change of HSA and its biological activity. The interaction of HSA with La³⁺ showed a set of two binding sites with negative cooperativity.     

利用光生物传感器研究阳离子卟啉与人血清白蛋白的相互作用

An optical biosensor with a stirred cuvette has been used to monitor the interaction between immobilized human serum albumin （HSA） and three water-soluble cationic porphyrins. The binding constants at 25℃ obtained from biosensor analysis were compared with those from fluorescence spectroscopy. The interactions were further investigated at temperatures from 15℃ to 30℃. The thermodynamics parameters, changes of free energy （△G）, enthalpy （△H） and entropy （△S）, were evaluated from equilibrium data. It appeared that the binding process was governed primarily by electrostatic forces.     

三元FA-HSA-MTO靶向给药体系的研究

本论文设计了一种叶酸－人血清白蛋白－米托蒽醌（即FA-HSA-MTO)三元靶向给药体系,其中,由于叶酸和米托蒽醌能同时结合于人血清白蛋白的不同位点而被人血清白蛋白运输到体内,再利用叶酸与其受体的特异性结合而使肿瘤细胞更有效地摄取米托蒽醌。紫外吸收光谱、荧光光谱和核磁共振实验数据都证实了FA-HSA-MTO三元体系的形成。而且,细胞毒试验显示,FA-HSA-MTO三元体系的细胞毒性达79.95％,比HSA-MTO二元体系高出30％。本论文证明：叶酸－人血清白蛋白－米托蒽醌三元靶向给药体系是可行的也是有效的。     

贝加因黄酮与不同异构体人血清白蛋白相互作用机制研究

贝加因黄酮具有广泛的生理和药理活性, 它与蛋白质相互作用机制的研究对于深入了解其药理药效具有重要的意义. 采用紫外和荧光光谱等手段对贝加因黄酮与不同异构体的人血清白蛋白复合物的结构进行了表征. 在弱碱性条件下, 贝加因的紫外吸收光谱发生了明显的变化, 说明其A环上的羟基发生了解离, 而在pH值4.5～2.0范围内, 贝加因的结构基本保持不变. 贝加因与不同异构体的人血清白蛋白作用后, 其紫外光谱吸收I带发生显著的红移, 显示出药物与蛋白质发生了特异性的结合. 贝加因对不同异构体的荧光猝灭机制主要为静态猝灭过程, 通过药物对蛋白质的荧光猝灭实验, 计算了它们之间的结合常数. 研究结果表明, 药物与蛋白质的结合常数随pH值的降低而减小, 这可能与蛋白质的结构变化有关. 研究还发现, 与不同异构体蛋白质作用后, 药物的荧光发射峰有显著的增强效应. 上述实验结果充分证明贝加因与不同异构体的蛋白质之间形成了复合物, 药物分子结合在蛋白质IIA亚域邻近色氨酸残基的Site I结合位点. 结合计算机分子模拟, 对药物与蛋白质的结合模式进行了讨论.     

蒽醌类药物与人血清白蛋白相互作用的研究

介绍了自行组装的波长检测型表面等离子体子共振(SPR)传感装置的原理和构造。应用此SPR传感器研究了三种蒽醌类药物与人血清白蛋白的相互作用,并分别计算了它们作用的动力学常数、热力学常数及结合百分率。结果表明,这些蒽醌类药物与人血清白蛋白都有不同程度的结合。