硫堇与DNA相互作用及DNA光散射/荧光比率测定方法

在pH4.56的BR缓冲溶液中,DNA能使硫堇的光散射增强,荧光发生猝灭。本实验基于硫堇的三维光谱讨论了其发光属性,并通过在普通荧光光度计上单次扫描同时获得的539nm处的光散射强度(I539)与630nm处的荧光强度(F630)之比,建立了测定痕量DNA的光散射/荧光比率法。当硫堇的浓度为1.0×10-4mol/L时,方法的线性范围为0.1~1.6mg/L,检测限为(3σ)为12.0μg/L。将所建立的方法用于DNA合成样品的测定,回收率为94.9%~107.0%,相对标准偏差小于3.0%。     

光谱法研究铬(Ⅵ)与血红蛋白的相互作用

运用荧光光谱、紫外光谱、CD光谱法研究了K₂Cr₂O₇与牛血红蛋白(BHb)的相互作用。紫外光谱表明,加入铬(Ⅵ)酸根离子后,BHb分子中Soret带的吸收持续降低, 峰位红移,说明铬(Ⅵ)酸根离子可能使部分血红素辅基从BHb的空腔中脱离出来,部分转变为高铁血红蛋白。荧光光谱表明,铬(Ⅵ)酸根离子与BHb形成基态复合物导致BHb内源荧光猝灭,猝灭机理主要为静态猝灭。测定了不同温度下该反应的热力学参数,表明上述作用过程是一个熵增加、自由能降低的自发分子间作用过程,铬(Ⅵ)酸根离子与BHb之间以氢键和范徳华力相互作用为主;并用同步荧光和CD光谱技术考察了铬(Ⅵ)对BHb结构的影响。     

溴甲酚绿与DNA相互作用的分光光度研究

用UV-Vis分光光度法研究了溴甲酚绿(BCG)与DNA基本的反应条件,BCG与DNA结合物的最大吸收波长是444nm,反应的最佳酸度为pH5.23;测定了反应时间、温度、离子强度、表面活性物质等因素对体系的影响;求出了BCG与DNA反应生成物的线性范围:(0.61～7.30)×10-7mol/L,表观摩尔吸光系数:1.29×105L·cm-1·mol-1,结合数:43,离解度:0.16,检出限为7.74×10-8mol/L,建立了DNA的反应体系。     

线性扫描伏安法研究美托拉腙与DNA的相互作用

在NaOH(pH 10.0)介质中,美托拉腙分别在-1.810 V和-2.075 V处具有2个还原峰,DNA的加入导致美托拉腙的2个还原峰峰电位正移,峰电流下降,表明美托拉腙与DNA之间发生了相互作用,形成了非电活性的化合物.考察了时间、温度、扫描速率、离子强度等条件对该相互作用的影响;结合DNA对美托拉腙紫外吸收光谱的影响,推断美托拉腙分子与DNA分子的相互作用是通过嵌插方式结合.在优化条件下,反应体系在-2.075 V处的还原峰电流I_(pa)与DNA的质量浓度在6 ～36 mg/L范围内呈较好的线性关系,相关系数为0.994 8,检出限为3 mg/L;通过对反应机制的研究,得到美托拉腙与DNA间的结合常数β为1.334×10~4 L/mol,结合数为2.     

寡聚酰胺PyPyPyβDp与DNA相互作用的荧光动力学

通过稳态吸收光谱、荧光光谱和时间分辨荧光光谱对寡聚酰胺分子PyPyPy(Dp(简称PPP)的光物理性质进行了详细研究. 发现PPP的激发态性质受溶剂环境影响较大, 在TKMC缓冲液中, PPP有较弱的荧光, 其荧光寿命为16 ps; 随着溶剂极性逐渐降低, 荧光光谱蓝移, 荧光强度增加, 相应荧光寿命增长. 通过对PPP与DNA双螺旋分子相互作用的荧光动力学研究表明, PPP与DNA相互作用后, 荧光强度增强, 荧光寿命从16 ps增加到32 ps, 证实了存在PPP与双螺旋DNA的结合相互作用.     

5-O-甲基山柰酚的合成与黄酮醇的波谱特征

山柰酚甲基化衍生物具有抗炎、抗动脉粥样硬化以及诱导脂肪细胞凋亡等多种生物活性,但植物含量较少.以资源丰富的山柰酚为原料,经过羟基的苄基保护、O-甲基化和催化氢化三步反应,以79％的总收率合成了5-O-甲基山柰酚.用高分辨质谱、红外光谱以及核磁共振氢谱、碳谱和二维HMBC谱,对所合成化合物的结构进行了确证.以5-O-甲基...     

寡聚酰胺PyPyPybDp与DNA相互作用的荧光动力学

通过稳态吸收光谱、荧光光谱和时间分辨荧光光谱对寡聚酰胺分子PyPyPybDp(简称PPP)的光物理性质进行了详细研究. 发现PPP的激发态性质受溶剂环境影响较大, 在TKMC缓冲液中, PPP有较弱的荧光, 其荧光寿命为16 ps; 随着溶剂极性逐渐降低, 荧光光谱蓝移, 荧光强度增加, 相应荧光寿命增长. 通过对PPP与DNA双螺旋分子相互作用的荧光动力学研究表明, PPP与DNA相互作用后, 荧光强度增强, 荧光寿命从16 ps增加到32 ps, 证实了存在PPP与双螺旋DNA的结合相互作用.     

葛根素与DNA相互作用的光谱法研究

以中性红为光谱探针,采用荧光光谱和紫外-可见光谱法研究了葛根素与DNA的相互作用,考察了离子强度和I-离子浓度对葛根素与DNA作用的影响。结果表明,在生理条件下(pH 7.4),葛根素通过沟槽结合方式与DNA发生作用,DNA对葛根素荧光猝灭属于静态猝灭,测得其结合常数为4.81×104L/mol。     

药物与DNA的相互作用研究——Ⅰ.小檗碱作为DNA的发光开关及pH的影响

用荧光光谱法研究了小檗碱与DNA的键合作用。发现小檗碱插入到DNA双螺旋中使小檗碱较弱的荧光带(λ_em=520 nm)的荧光强度显著提高。在pH=3.00附近，小檗碱-DNA体系的荧光增强到原来发射强度的69倍(I/I₀)。在pH=3.00和pH=7.20时，测得小檗碱与DNA的本征键合常数分别为3.00×10⁵和2.04×10⁵，二者的键合比分别为每分子小檗碱11.05和4.78个碱基对。     

烷基酚与DNA相互作用的荧光光谱法研究

用荧光光谱法研究了环境激素辛基酚(OP)、壬基酚(NP)与小牛胸腺DNA(ctDNA)的相互作用.实验发现,随着ctDNA的加入,辛基酚、壬基酚的荧光光谱产生了有规律地猝灭,且最大发射峰红移.其中荧光猝灭是由于形成了烷基酚-DNA加合物而引起的静态猝灭.辛基酚、壬基酚与ctDNA均以插嵌模式相互作用,其结合常数分别为5.1×105 L·mol-1 和1.4×106 L·mol-1 ,结合位点分别为1.31和1.45.热力学参数确定了辛基酚及壬基酚与ctDNA的作用力类型主要是疏水作用力.     

柔红霉素与DNA相互作用的机理研究

本文以循环伏安、光谱电化学和原子力显微镜方法从DNA角度研究柔红霉素与天然鱼精DNA和热变性DNA之间相互作用的机理。并对柔红霉素与鱼精DNA和热变性DNA复合物的组成及复合物的形成常数作了测定。研究发现嵌入作用是柔红霉素和天然DNA之间的主要作用方式；并且柔红霉素和天然DNA之间的作用要强于和热变性单链DNA之间的作用。对这两种复合物的光谱电化学和原子力显微镜研究表明，在体内氧化还原代谢条件下，柔红霉素还原过程中产生的半醌自由基可引发自由基链反应，造成DNA链的解链、断裂等损伤。     

表柔比星-铜体系与DNA作用的光谱和电化学法研究

表柔比星是临床上广泛用于治疗增殖很快的肿瘤. 应用紫外、荧光、黏度、循环伏安等方法研究了表柔比星及表柔比星-Cu^2＋体系与DNA的作用. 结果发现: 在pH＝7.4时, 表柔比星可与Cu^2＋形成稳定体系. 加入DNA后表柔比星-Cu^2＋体系的紫外吸收明显降低; Scatchard图表明表柔比星-Cu^2＋体系对溴化乙锭(EB)与DNA的结合为竞争性抑制; 同时此体系可使DNA-EB体系荧光偏振度增大; 使DNA的热变性温度(t_m)上升; 黏度增大; 循环伏安法表明DNA的加入使得表柔比星及表柔比星-Cu^2＋体系的式量电位正移; 凝胶电泳表明表柔比星-Cu^2＋体系对pBR322 DNA有非常好的水解切割活性. 综合以上结果得出: 表柔比星及表柔比星-Cu^2＋体系与DNA之间均为嵌插作用; 表柔比星-Cu^2＋体系具有更好的水解切割活性. 这些结果可为合理改善药效、降低抗癌药物毒性和设计新药提供依据.     

Electrochemical Studies of Anticancer Herbal Drug Sophoridine and Its Interaction with DNA

Sophoridine is a new anticancer herbal drug with remarkable antitumor effect and lower toxicity. In this paper, the electrochemical investigation of sophoridine and its interaction with DNA is reported. In 0.1 mol L^?1 phosphate buffer solution (pH 7.0), sophoridine exhibited excellent electrochemical activity. In the presence of DNA, the peak current of sophoridine decreased in a quantitative fashion and the peak potential shifted to a more positive potential value. It suggests the dominance of intercalative interaction. Importantly, as to the interaction between sophoridine and DNA in solution, characteristic parameters such as the binding stoichiometry and association equilibrium constant according to the Hill model for cooperative binding have been determined.     

Spectroscopic Study of DNA Hydrolysis,DNA Intercalative,and Electrostatic Interaction Activity Exerted by Drug Based Coordination Compounds

Our work emphasized on synthesizing and characterizing neutral mononuclear copper(II) complexes with second generation fluoroquinolone drug ciprofloxacin (CFL) and some bipyridine derivatives (Aⁿ) of type [Cu(CFL)(Aⁿ)Cl] · 2H₂O. The DNA binding free energies were evaluated by studying the effect of salt concentrations on DNA binding. DNA interactions were investigated by using DNA melting temperature studies, viscosity measurements, absorption titration, and gel electrophoresis experiments. Also superoxide dismutase (SOD)‐like activity (IC₅₀ values) and antibacterial activity of metal complexes were studied. To validate the proper mechanistic pathway for plasmid DNA cleavage, gel electrophoresis experiments were carried out in presence of radical scavenging agents. The bactericidal activity of metal complexes was evaluated in terms of colony forming unit.     

Electrochemical and Spectroscopic Study of the Interaction of Indirubin with DNA

The interaction of indirubin with DNA was studied by differential pulse voltammetry (DPV) and linear sweep voltammetry (LSV) at the bare or DNA‐modified electrode and UV‐vis or IR spectra. As a result of intercalating of this drug into the double helical structure of DNA, the DPV of indirubin shows that peak potentials shift and peak currents decrease with the addition of DNA. UV‐vis spectra exhibits that the absorption intensity of indirubin at 538.7 nm^?1 decreases, which indicates that the anticancer herbal drug indirubin binds DNA. In addition, IR‐spectra of DNA and DNA‐indirubin adduct imply indirubin interacts with the phosphate groups of DNA by hydrogen bond or electrostatic interaction. Under our experiment conditions, the decrease of peak current is proportional to DNA concentration, which can be applied to estimate DNA concentration. The results indicate that the herbal drug indirubin can interfere with the DNA by intercalating into the double helix of DNA and interacting with the phosphate groups of DNA.     

表柔比星-铁体系与DNA作用的光谱和电化学法研究

表柔比星是临床上广泛用于治疗增殖很快肿瘤的药物.应用紫外、荧光、园二色、黏度、循环伏安等方法研究了表柔比星及表柔比星-Fe2+体系与DNA的作用.结果发现,在pH=7.4时表柔比星可与Fe2+形成稳定体系,加入DNA后表柔比星-Fe2+体系的紫外吸收明显降低.Scatchard图表明,表柔比星-Fe2+体系对溴化乙锭(EB)与DNA的结合为竞争性抑制,同时此体系可使DNA-EB体系荧光偏振度增大,使DNA的热变性温度(tm)上升,黏度增大.循环伏安法表明,DNA的加入使得表柔比星及表柔比星-Fe2+体系的式量电位正移.园二色谱法表明,随着表柔比星-Fe2+体系的加入,DNA碱基间作用能迅速减弱.综合以上结果得出:表柔比星及表柔比星-Fe2+体系与DNA之间均为嵌插作用,而且表柔比星-Fe2+体系具有比单纯表柔比星更好的嵌插效果.这些结果可为合理改善药效、降低抗癌药物毒性和设计新药提供依据.     

DNA与5-氟尿嘧啶相互作用的电化学和谱学研究

以电位控制共价组装法制得的DNA修饰电极为工作电极, 采用循环伏安和方波脉冲伏安法, 以亚甲蓝(MB)为电活性指示剂, 研究了非电活性抗癌药物5-氟尿嘧啶(5-FU)与DNA的相互作用, 还结合紫外-可见光谱进一步研究了这种相互作用. 循环伏安测试结果表明: 5-FU与DNA在电极表面反应的过程为可逆电化学反应-化学反应偶合(EC)过程. 当扫描速度较低时, EC反应是扩散控制过程; DNA与电活性物质MB通过静电吸附相互结合, 抗癌药物5-FU与DNA通过插入作用相互结合. 本研究对于遗传工程中以DNA为靶标的药物设计有重要的意义.     

光谱法及分子模拟法研究杨梅素与ct-DNA的相互作用

采用紫外光谱、荧光光谱结合亚甲基蓝荧光探针(MB)、圆二色谱(CD)以及分子模拟等技术研究了生理条件下杨梅素与小牛胸腺DNA(ct-DNA)的相互作用,探索了其可能的结合位点与作用机制。热力学参数显示ΔH0、ΔS0,说明杨梅素与ct-DNA通过氢键和范德华力发生相互作用。光谱研究显示,ct-DNA能够猝灭杨梅素的内源荧光,猝灭方式为静态猝灭,两者的结合常数为1.86×103mol-1,结合位点数为1。在竞争性实验中杨梅素未能将MB从MB-DNA复合体系中游离出来,说明其与ct-DNA的作用方式为沟槽结合。圆二色光谱研究表明,杨梅素的加入未能破坏ct-DNA的双螺旋结构,两者的作用方式为沟槽结合。进一步通过分子模拟研究得到杨梅素与DNA结合的最低能量构象,杨梅素A环7-O和B环3’-O分别与DNA的碱基DA18和DA6在边缘小沟处通过氢键结合,周围富含碱基A和T,与光谱学研究结果一致,结合距离分别为2.061和1.918。     

Molecular Spectroscopic Study on the Interaction between Heparin and Neutral Red

The interaction between heparin and neutral red was investigated by molecular spectroscopic methods. The change of all spectra suggested that positively charged neutral red had interacted with negatively charged heparin. The study of influence factors indicated that electrostatic force and hydrophobic bond might be involved in the interaction. The total binding number per disaccharide unit and intrinsic binding constant were obtained using Scatchard model.     

噻嗪酮与牛血清白蛋白相互作用的光谱法研究

用荧光光谱和紫外光谱,在模拟生理条件下研究噻嗪酮与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用.研究发现,噻嗪酮与牛血清白蛋白的猝灭机制为静态猝灭;298 K、303 K和308 K时的结合常数分别1.80×103、1.54×103和1.05×103L·moL-1,结合位点数n近似为1;由热力学参数推测噻嗪酮与牛血清白蛋白间结合力...