微乳液相色谱法测定人血浆中丙泊酚浓度

建立了基于微乳液相色谱(MELC)的人血浆中丙泊酚浓度的测定方法。采用Hypersil BDS C18色谱柱分离,并考察了微乳流动相中各组分对溶质洗脱的影响。优化的色谱条件: 以0.5%醋酸（含有3.0%十二烷基硫酸钠（SDS）,0.8%正庚烷,6.0%正丁醇）微乳为流动相,流速为1.0 mL/min,荧光检测器激发波长(λex)为274 nm、发射波长(λem)为312 nm,柱温为室温。人血浆样品用流动相稀释并离心后,直接进样分析。丙泊酚在0.25～10 μg/mL质量浓度范围内呈良好的线性关系,方法的回收率为(98.2±1.9)%～(104.6±2.2)%;日内测定峰面积的相对标准偏差(RSD)为1.42%～2.43%,日间测定峰面积的RSD为2.75%～4.79%。该方法简便可行、重复性好,可用于人血浆中丙泊酚浓度的测定。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定犬血浆中利培酮和帕潘立酮及药代动力学研究

建立了超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定犬血浆中利培酮和帕潘立酮的浓度.血浆样品用乙腈沉淀蛋白后,用Zorbax SB-C18柱分离,以乙腈-10 mmol/L乙酸铵溶液(65∶35,V/V)为流动相,在电喷雾离子源正离子模式下以多反应监测(MRM)方式进行检测.利培酮、帕潘立酮分别在0.05～30.0 ng/mL和0.10～30.0 ng/mL范围内线性关系良好(r2＞0.99),定量限分别为0.05 ng/mL和0.10 ng/mL,回收率分别为91.2％～95.1％和93.1％～97.5％.该方法精密、准确、快速,适用于临床血药浓度的监测及利培酮缓释微球药动学的研究.     

反相高效液相色谱法测定人尿中利凡诺

建立了运用反相高效液相色谱法测定人尿中利凡诺的方法.采用Spherisorb C18色谱柱(250 mm×4.6 mm i.d.,5 μm);流动相: V(甲醇)∶V(乙腈)∶V(0.2 mol/L NH4Ac)=60∶37∶3;流速: 1.0 mL/min;柱温: 40 ℃;荧光检测器: 激发波长360 nm,发射波长500 nm.在5 ng/mL～1 μg/mL质量浓度范围内,呈现良好线性(r=0.9999),检出限为1 ng/mL.     

高效液相色谱法测定叔丁基对苯二酚的含量

建立了HPLC测定叔丁基对苯二酚含量的方法:色谱柱:Shim-pack VpODS(150 mmt×4.6 mm,5μm)接C18保护柱(20 mm×4.6 mm,5μm);以V(乙腈):V(水)=32:68(含1%乙酸)作为流动相;流速:0.8 mL/min;检测波长:290 mm;柱温:25℃.结果表明TBHQ质量浓度在2×10-4～1.0 mg/mL范围内与峰面积线性关系良好r≥0.9999,最低检测限为4 ng,并建立了回收率及日内和日见精密度实验.     

高效液相色谱法测定人血浆中奥美拉唑对映体的浓度

考察了奥美拉唑对映体在多糖类手性色谱柱(Chiralpak AD柱、Chiralcel OJ柱、Chiralpak AS柱和Chiralcel OD柱)上的分离行为及流动相组成对对映体分离的影响,建立了血浆中奥美拉唑对映体的分析方法。血浆样品采用Agilent BON DODS-C18固相萃取柱提取,以Chiralpak AD(250mm×4.6mm,10μm)为色谱柱;流动相:V(正己烷):V(乙醇)=30:70;流速:0.5mL/min;检测波长:302nm;柱温:25℃。方法的相对回收率为(-)-(S)-奥美拉唑96.7%～100.4%,(+)-(R)-奥美拉唑97.4%～100.2%;日内RSD4.7%,日间RSD3.3%;奥美拉唑对映体在5～1000ng/mL范围内线性关系良好(n=5,r=0.9997),最低检测浓度(S/N=3)2ng/mL。方法可用于奥美拉唑对映体人体药代动力学研究。     

高效液相色谱-三重四极杆/复合离子阱质谱测定大鼠血浆中11种合成大麻素

建立并验证了一种用于定量检测大鼠血浆中11种合成大麻素(SCs)的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)方法。选择Waters UPLC HSS T3(150 mm×2.1 mm,1.8μm)色谱柱,以乙腈为蛋白沉淀剂(血浆∶乙腈=1∶9,V/V),实现了11种目标物质的色谱分离和检测。方法学验证数据表明,本方法在0.05～10 ng/mL范围内具有良好线性(R²>0.991),基质效应为69.5%～119.0%,回收率为43.8%～131.5%,相对标准偏差为4.0%～28.3%,定量限为0.05～1 ng/mL。本方法适用于血浆中SCs的定性定量检测。     

高效液相色谱法用于普萘洛尔与β_2肾上腺素受体结合实验研究

建立了用高效液相色谱检测红细胞混悬液中盐酸普萘洛尔的方法并用于红细胞膜β2受体-配体结合实验研究。通过1500 r/m in离心5 m in的方法将试样中游离普萘洛尔和含受体-普萘洛尔复合物的红细胞分离,采用HypersilBDS?C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm)为分析色谱柱;流动相为20 mmol/LKH2PO4溶液(其中含0.25%三乙胺,pH 5.1)?甲醇(65∶35,V/V),流速为1.0 mL/m in;276 nm波长处检测;柱温30℃;进样量20μL。普萘洛尔在5~150 ng/mL范围内线性关系良好,相关系数为0.9998。样品测定的重复性相对标准偏差为1.05%;检出限为1.5 ng/mL。样品测定结果表明普萘洛尔的特异性结合量随其加入量的增加而增大,然后达到饱和。该方法可用于受体配体结合实验的研究。     

HPLC法测定盐酸美他环素片的含量

建立用外标法测定盐酸美他环素片含量的简单高效液相色谱方法.采用PurospherStar C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μgm);流动相为:V(甲醇):V(水)=50:50混合后用H3PO4调节pH至3.0±0.02;检测波长:280nm;进样量:20μL,流量:0.7 mL/min;温度35℃.美他环素在20.02～200.2μg/mL浓度范围内线性关系良好(r=0.99999);平均回收率为98.6%,回收率的RSD为0.6%.本方法可用于盐酸美他环素片的含量测定.     

LC-MS/MS法快速测定吡罗昔康制剂中吡罗昔康含量

建立了快速液相色谱-质谱/质谱联用法测定吡罗昔康制剂中吡罗昔康含量的方法。样品以0.1 mol/L盐酸甲醇溶液提取、微孔滤膜过滤、离心后,通过电喷雾离子化(ESI),采用多反应检测(MRM)方式进行正离子检测,用于定量分析的检测离子为m/z 332.2→94.8。采用Shim-pack XR-ODS(3.0 mm×75mm,2.0μm)柱分离,以乙腈-水-甲酸(60:40:0.1,V/V/V)为流动相,流速为0.40 mL/min,在3 min内完成吡罗昔康定量分析。线性范围为2.5～1000.0ng/mL,最低检测限为2.5 ng/mL;日内测定的相对标准偏差小于3.2%,日间测定的相对标准偏差小于3.8%。方法可作为吡罗昔康制剂的质量中吡罗昔康控制方法,并可用于少量血浆样品的测定,也适用于药物代谢动力学研究。     

液相色谱-串联质谱法测定人血浆中儿茶酚胺的含量

建立人血浆中儿茶酚胺液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)的检测方法。采用Agilent Zorbax Eclipse XDB-C18(4.6 mm×150 mm,5μm)柱子,柱温25℃,流动相为V(乙腈)∶V(0.1%甲酸溶液)=10∶90,流速0.6 mL/min,进样量20μL;电喷雾离子源(ESI),正离子检测,采用多反应监测(MRM)方式进行定量分析。肾上腺素、去甲肾上腺素和多巴胺的最小检测限(LOD)在4.3,2.4和6.6ng/mL之间,浓度在0~500 ng/mL范围内线性良好(r=0.9921),平均回收率在85.8%~93.4%之间,日内、日间精密度RSD为9%(n=5)。结果表明该方法专属性强、灵敏及准确,可以适用于人血浆儿茶酚胺的快速分析。     

反相离子对高效液相色谱法测定SD大鼠血浆中河豚毒素的含量

建立了大鼠血浆中河豚毒素(TTX)反相离子对高效液相色谱测定方法。血浆样品加水涡漩,再加沉淀剂V(乙腈)∶V(含0.5%HAc的甲醇液)=3∶1),旋涡离心后取上清液进样测定。色谱柱为Agilent ZorbaxSB C18柱(150 mm×4.6 mm×5μm);流动相为10?N-90%的8 mmol/L庚烷磺酸钠与0.005%TFA混合溶液,配好后调到pH5.0;紫外检测波长196 nm;流速1.0 mL/min;柱温为室温。本方法TTX标准品检出限为1.055 mg/L,血浆中TTX的检出限为0.1055 mg/L。血浆中TTX的线性范围为21.1~211 mg/L,r=0.9989。日内和日间精密度RSD均小于3%。本方该法准确、专属性强,适用于血浆中TTX的浓度测定。     

氟甲砜霉素注射液含量及其有关物质的HPLC测定

为建立测定氟甲砜霉素注射液含量的方法,采用高效液相色谱法,选用Agilent EclipseXDB-C8柱(4.6 mm×250 mm,5μm),Lab Alliance C8保护柱(4.6 mm×10 mm,5μm),流动相为(V乙腈) V(水)=35 65,流量1.0 mL.min-1,检测波长224 nm,进量样20μL,柱温为室温。结果表明,方法的线性范围为10.0～400μg.mL-1(r=0.999 6),最低检测限2.0 ng。回收率98.7%～101.2%,RSD 0.30%～1.22%(n=5)。方法简便灵敏,结果准确可靠,可用于氟甲砜霉素注射液的质量控制。     

HPLC法测定脂质体松萝酸中松萝酸的含量

建立了HPLC测定脂质体松萝酸中药物松萝酸的方法。以Kromasil C18反相色谱柱(250 mmⅹ4.6 mm,5μm)为分离柱,流动相组成为V(甲醇)∶V(磷酸盐缓冲液(pH 5.0))=7∶3,流速1 mL/min,紫外检测,波长284 nm。松萝酸在10~50μg/mL的范围内有很好的线性关系(r=0.9994)。加样回收率为100.1%±0.6%,RSD为0.54%±0.07%。本方法适用于脂质体松萝酸中药物松萝酸的测定。     

微乳液相色谱法同时测定降压中成药及保健品中添加的10种化学药物

建立了微乳液相色谱(MELC)同时测定中成药及保健品中添加的10种降压药物的分析方法。考察了微乳流动相的组成成分(包括表面活性剂、助表面活性剂、油相的种类及质量分数)、pH值和固定相种类对分离效果的影响。同时利用星点设计-响应面优化法进一步优化微乳组成。实验得到的最佳分离条件:色谱柱为Agela Promosil C18(2)(250 mm×4.6 mm,5μm);微乳流动相为5.6%(质量分数)十二烷基聚乙二醇醚(Brij35)-0.17%(质量分数)十二烷基硫酸钠(SDS)-5.1%(质量分数)正丁醇-0.46%(质量分数)环己烷-水(pH 3.0);流速为1.0mL/min;检测波长为230 nm;柱温为30℃。该方法具有灵敏度高、稳定性好和环保的优点。     

肉类及水产品中四环素类抗生素残留量的高效液相色谱测定方法

建立了肉类中土霉素(OTC)、四环素(TC)、金霉素(CTC)残留量的高效液相色谱荧光检测方法.样品经5%HClO4除蛋白后,离心过滤.采用Waters XTerra RP18(5 μm,4.6×150 mm)色谱柱,以V(甲醇):V(CaCl2缓冲液)=30:70(pH 6.6)为流动相,等度洗脱,流速0.8 mL/min,柱温25℃.经CaCl2缓冲液衍生化,在激发波长(Zx)350 nm和发射波长(Zm)520nm处检测土霉素、四环素和金霉素的残留量.结果表明,在此条件下,测得上述3种抗生素在0.09～4.64μg/mL范围内线性良好,土霉素的最小检测限为1.48 ng/mL,四环素为1.20ng/mL,金霉素为2.32 ng/mL,方法的精密度为0.69%～1.23%,加样回收率为64.63%～90.89%.实验证明本方法可用于检测肉类中土霉素、四环素和金霉素的残留量.     

反相高效液相色谱同时测定动物营养液中脂溶性维生素A、D3和E

建立了反相高效液相色谱法同时测定动物营养液中脂溶性维生素A、D3和E的方法。采用ZORBAX SB-C18柱(150×2.1 mm,5μm),以异丙醇-水(65∶35,V/V)为流动相,流速0.3 mL/min,在325 nm、265 nm和290 nm三波长下测定。结果表明:该方法的回收率为:VA 94.0%~102.0%;VD390.9%~99.6%;VE 88.6%~92.3%。RSD(n=6)分别为:VA,1.09%;VD3,1.42%;VE,1.23%。检出限为:VA,0.31 ng;VD3,0.71 ng;VE,0.82 ng。     

多功能柱净化-高效液相色谱法检测麦类中赭曲霉毒素A

本文提出了一种采用高效液相色谱/荧光检测法(HPLC/FLD)测定麦类样品中赭曲霉毒素A的方法.样品经V(乙腈):V(水)=84:16提取,多功能柱净化,C18色谱柱(4.6×250 mm,5μm)分离,V(水):V(乙腈):V(乙酸)=102:96:2作流动相,流速1.0 mL/min.结果表明,标准工作液在浓度1.0～50.0μg/L范围内,峰面积与浓度成良好的线性关系,线性相关系数＞0.9999,样品在3.0,10.0,50.0 ng/g添加水平的回收率为60%～85%,相对标准偏差为7.9%～8.8%(n=8),方法检出限为3.0 ng/g(S/N＞10).本法快速、准确、操作简单,可满足大批麦类样品的检测需要.     

高效液相色谱法同时测定血浆中吲哚美辛和布洛芬的浓度

建立了同时测定血浆中吲哚美辛和布洛芬两种非甾体抗炎药的HPLC测定方法。样品采用乙腈沉淀蛋白提取后离心,上清液用氮气吹干流动相复溶,以乙腈:20 mmol/L乙酸铵水溶液(甲酸调节p H为3.5)=85:15(V/V)进行洗脱,在ZORBAX SB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱上分离,流速为1 m L/min,检测波长220 nm,采用内标法定量,吲哚美辛和布洛芬互为内标。结果表明吲哚美辛和布洛芬在0.1~50μg/m L范围内呈良好的线性关系,吲哚美辛和布洛芬的检出限(S/N=3)分别为1.3 ng和2.0 ng。回收率在86.3%~102.0%之间,日内精密度RSD3.4%。经方法学验证,该方法适用于血浆样品中吲哚美辛和布洛芬的测定,且方法专属性好、简便快捷。     

超高压液相色谱法测定水产品中甲基睾酮的残留量

建立了超高压液相色谱法测定水产品中甲基睾酮残留量的方法。样品采用乙酸乙酯超声波提取,石油醚去脂,乙酸乙酯反萃取,旋转蒸发后用流动相溶解残渣,过滤后上机分析。以V(甲醇):V(水)=60:40为流动相,以C18柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm)为色谱分离柱在254nm波长进行测定。方法在5.0~250 ng/mL范围内线性良好(R2=0.9997),在5,30和100μg/kg添加水平下,方法回收率大于91%,相对标准偏差小于7%,定量限为5μg/kg。     

柱切换高效液相色谱法测定人血浆中布洛芬对映体浓度

建立了柱切换高效液相色谱法测定人血浆中布洛芬对映体浓度的方法。以对溴苯甲酸为内标,样品经醋酸钠缓冲液酸化后,用V(正己烷)∶V(异丙醇)=95∶5萃取。以Chiralcel OJ-H柱(Daicel Chemicals,250mm×4.6mm,5μm)为分析柱,UltimateTM SiO柱(50mm×4.6mm,5μm)为预处理柱;流动相为V(正己烷)∶V(异丙醇)∶V(三氟醋酸)=96.5∶3.5∶0.1,流速为0.5mL/min;预处理流动相为V(正己烷)∶V(异丙醇)=99.5∶1,流速为1mL/min;柱切换时间为1.70~4.09min;紫外检测波长为230nm。布洛芬消旋体和S-( )-布洛芬标准曲线线性范围分别为0.21~20mg/L和0.10~10mg/L;日内RSD小于6.5%,日间RSD小于6.1%;方法回收率为93.3%~107.1%,萃取回收率为80.0%~86.6%。本法简便、准确,重现性好,可用于布洛芬对映体人体药代动力学研究。