1.9分辨率(D-Ala)~(B_0)猪胰岛素晶体结构的研究

本文应用差值Fourier技术和制约立体化学参数最小二乘技术以二锌猪胰岛素模型为起点测定了1.9分辨率的(D-Ala)~(B0)猪胰岛素晶体结构,R因子为0.211,键长均方差为0.057。B_0残基的电子密度表现清晰。B_0的引入降低了B链N端肽段构象的运动性,使分子在晶体中的堆积更加紧密。(D-Ala)~(B0)猪胰岛素和二锌猪胰岛素结构的主要差异在于分子可能的受体结合表面中部分极性基团的构象和分子IA链两段螺旋的组装。(D-Ala)~(B0)猪胰岛素B链N端晶体学微环境与(Trp)~(B1)猪胰岛素和去B_1牛胰岛素有很大的差异。本文还简单地讨论了胰岛素分子结构与免疫功能的关系。     

胰岛素介体的作用——调节腺苷酸环化酶的胰岛素介体

本文证明用胰岛素(50—300μu/ml)处理猪肝细胞膜后,从膜释放出不止一种的胰岛素化学介体。它们对肝细胞膜上的腺苷酸环化酶有调节作用。一种是介体组份1,分子量为3700—4000D,有直接促进该酶活性的作用;另一种是介体组份2,分子量为1000 D左右,表现出明显抑制该酶活性的作用。两种介体释放的比率与保温的激素浓度相关。当胰岛素在生理浓度下(50一100μu/ml)诱导产生介体组份2为主,而在高于生理浓度下(200—300μu/ml)则诱导产生介体组份1为主。介体组份1对肝细胞膜腺苷酸环化酶活性的作用表现出双相性,组份2对该酶活性仅出现单相作用。两种介体组份分别与Gpp(NH)p和福司可林(forskolin)合并作用表明,胰岛素介体可能作用于腺苷酸环化酶的GTP调节蛋白组份而调节该酶的活性。     

促进和抑制脂肪合成的胰岛素介体

猪肝细胞膜与猪胰岛素(50—300μU/ml)保温后,从膜上释放出一种分子量为3700D的物质,称为介体组份1,有促进大白鼠的脂肪细胞的脂肪合成作用。另一种分子量为1000D左右的物质,称为介体组份2,有抑制脂肪合成作用。两种介体释放的比率与保温的激素浓度、生物活性密切相关。用不同生物活性的胰岛素类似物处理猪肝细胞膜诱导介体释放,可得到上述用不同浓度激素处理的同样结果。进一步证明胰岛素介体的产生依赖于诱导激素的生物活性,而与激素及其类似物与受体的结合活力无关。     

色氨酸胰岛素类似物的荧光研究

本文通过测定[L-Trp]~(A1)胰岛素、[D-Trp]~(A1)胰岛素、[L-Trp]~(B1)胰岛素以及去Phe~(B1)[L-Trp]~(B2)胰岛素的荧光随pH的变化等性质,探讨分子氨基末端的微环境及其侧链取向.3种L型色氨酸胰岛素类似物在pH2—13 的范围内的荧光行为类似,只显示一个在pH9的荧光强度峰,但[D-Trp]~(A1)胰岛素却有在pH9.8和pH5.5 两个荧光强度峰.从两种A1色氨酸胰岛素类似物的荧光特性推测到它们溶液构象的差别,很可能是造成它们生物活力不同的原因之一。     

带保护基的胰岛素A链羧端十二肽的合成

已知合成的胰岛素A链羧端带保护基的十二肽酯Ⅰ在不同条件下皂化,得十二肽Ⅱ,其物理性质略有差异,经制成牛胰岛素A链井进一步制成半合成牛胰岛素粗产物后,其生物活力相当于天然胰岛素的1—4％。根据二条不同的路线直接合成了带保护基的胰岛素A链羧端十二肽Ⅱ,路线一:由已知的四肽Ⅲ制成其酰肼衍生物,再转变为相应的迭氮化物后与脱N-苄氧羰基和γ-叔丁基的五肽Ⅴ(即Vb)缩合成九肽Ⅵ,Ⅵ经脱除N-保护基后与已知的三肽酰肼Ⅶ以迭氮化物法缩合郎得十二肽Ⅱ.路线二:三肽酰肼Ⅶ先制成迭氮化物再与脱N-保护基的已知二肽酯ⅩⅩⅢ反应成五肽酯ⅩⅩⅣ,再经肼解得五肽酰肼ⅩⅩⅤ,然后按迭氮化物法与脱苄氧羰基的二肽Ⅹ缩合成七肽酯ⅩⅩⅥ,再肼解得七肽酰肼ⅩⅩⅦ,最后通过迭氮化物法与五肽V_b缩合,亦得相同的十二肽Ⅱ.由这两种方法直接合成的十二肽Ⅱ,其质量较皂化所得为优,并已用于牛胰岛素A链的合成与结晶牛胰岛素的半合成和全合成。五肽Ⅴ和七肽ⅩⅩⅥ都曾各按二条不同的路线合成,而得到相同的产物,本文报导的合成肽段均经分析证明为化学纯的均一物质。     

硼化合物的研究——Ⅴ.氢硼酸π-芳烃-π-环戊二烯基铁的合成和性质

本文研究了氢硼酸根(B_(12)H_(12)~(2-)、B_(10)H_(10)~(1-)、B_(11)H_(14)~-)和π-芳烃-π-环戊二烯基铁阳离子的反应,合成了36个氢硼酸π-芳烃-π-环戊二烯基铁化合物。通过元素分析和红外光谱测定确定了化合物的组成。部份化合物还作了~1H NMR鉴定。对化合物的性质,包括它们的热行为,进行了较详细的研究。DTA仪测得的结果表明,(1)当阳离子相同时,化合物的热稳定性的顺序为:[ArFeC_5H_5]_2B_(12)H_(12)>[ArFeC_5H_5]_2B_(10)H_(10)>[ArFeC_5H_5]B_(11)H_(14);(2)当氢硼酸根相同时,其热稳定性受芳环上取代基的影响。     

胰岛素介体的功能——调节细胞的cAMP和脂肪合成及糖尿病的影响

本文报道用猪、小白鼠和大白鼠肝细胞质膜与胰岛素(100—150μU/ml)保温后,从膜至少释放两种胰岛素介体(Insulin mediator或Insulin chemical mediator),即组份1和组份3。它们能抑制脂解激素和福司可林(Forskolin)所刺激的脂肪细胞的cAMP形成及促进细胞的脂肪合成。组份1的分子量约为3700—4000,组份3约1000—1500dalton。组份1胰岛素介体为本文第一次报道的新发现的化合物。糖尿病小白鼠或大白鼠的肝细胞膜产生此种介体比正常动物的明显下降,但经体内注射胰岛素治疗后,则介体的释放可恢复正常。     

胰岛素B链螺旋片段构象能量的研究

本文作为胰岛素及其化学修饰物分子构象能量系列研究工作的组成部分,以2Zn-、(D-Ala)~(B0)-和(L-Leu)~(B1)-猪胰岛素晶体结构为依据,报告分子B9-B19螺旋(化学序列为S·H·L·V·G·A·L·Y·L·V·C)六种X射线晶体学构象能量的研究结果。构象二面角的定义和计算遵循IUPAC-IUB规则。构象总能量(包括静电能EES,非键能ENB和扭角势能ETOR三项)的计算使用程序ECEPP/2,键长和键角取标准值(由     

硼化合物的研究——Ⅺ.氢硼酸π-环戊二烯基-烷撑双(二苯基膦)合镍(Ⅱ)的合成和性质

本文以C_5H_5NiPPh_3Cl与Ph_2P(CH_2)_nPPh_2为起始物合成了C_5H_5NiPh_2P(CH_2)nPPh_2Cl·C_6H_6,再进一步与氢硼酸季铵盐反应,合成了12个氢硼酸π-环戊二烯基-烷撑双(二苯基膦)合镍(Ⅱ)化合物。对这些化合物进行了元素分析、红外光谱鉴定,并测定了氯化物的~1H NMR谱。所有含硼化合物于室温下对空气是稳定的,而它们的热稳定性与阳离子中螯合环的大小和氢硼酸根结构有关,即氢硼酸根相同的化合物,热稳定性随着螯合环的增大而降低;阳离子相同时,热稳定性次序是:[C_5H_5NiPh_2P(CH_2)_nPPh_2]_2B_(12)H_(12)>[C_5H_5NiPh_2P(CH_2)_nPPh_2]_2B_(10)H_(10)>C_5H_5NiPh_2P(CH_2)_nPPh_2B_(11)H_(14)>C_5H_5NiPh_2P(CH_2)_nPPh_2B_3H_8。     

硼化合物研究(ⅩⅥ)——氢硼酸π-环戊二烯基双(三苯基膦)镍(Ⅱ)的合成

MCArdle和Akker等人分别合成了[π-C_5H_5Ni(PPh_3)_2)SnCl_3·S[S=CH_2Cl_2,(CH_3)_2O)租[π-C_5H_5Ni(PPh_3)_2]F等化合物.本文报告七个新的氢硼酸根(B_(12)H_(12)~(2-)、B_(10)H_(10)~(2-)、B_(11)H_(14)~-、B_3H_3~-、B_(10)Cl_(10)~(2-)B_(10)H_2Br_8~(2-)、B_(10)H_4I_6~(2-))的π-一环戊二烯基双(三苯基膦)镍(Ⅱ)的合成和性质研究。     

C~(14)-标记牛胰岛素A链和C~(14)-标记牛胰岛素的合成

根据前文叙述的方法,我们用[1-C~(14)]-甘氨酸制备了带保护基的牛胰岛素A链氨端五肽Ⅰ(Z-1-C~(14)-Gly-Ile-Val-Glu(OBu~t)-Glu(NH_2)-NHNHBOC)和氨端九肽Ⅱ(Z-1-C~(14)-Gly-Ile-Val-Glu-Glu(NH_2)-Cys(BZL)-Cys(BZL)-Ala-Ser(OAc)-NHNH_2)。又根据牛胰岛素A链的合成和牛胰岛素的半合成及全合成的方法,我们用Ⅱ制得了[1-C_(gly)~(14)]-牛胰岛素A链S-磺酸盐Ⅸ(H-1-C~(14)-Gly-Ile-Val-Glu-Glu(NH_2)-Cys(SS_3~-)-Cys(SSO_3~-)-Ala-Ser-Val-Cys(SSO_3~-)-Ser-Leu-Tyr-Glu(NH_2)-Leu-Glu-Asp(NH_2)-Tyr-Cys(SSO_3~-)-     

1.5分辨率去五肽(B26—B30)胰岛素结构的精化

本文报道1.5分辨率去五肽(B26—B30)胰岛素结构的精化。用重新培养晶体所收集的衍射数据,约束参数最小二乘精化和模型重建工作交替进行。对2.4分辨率的原有模型作了广泛的精化,模型的某些部分作了较大的修正。晶体所含的镉配位结构已经很好地确定,它相当接近于一个理想的正八面体。精化后测定了84个水氧原子,为去五肽胰岛素晶体中水结构的研究提供了详细的信息.对于10—1.5分辨率范围内的5678个独立可观测(>1.5σ(F_0))反射,其最后的晶体学可靠性因子R为0.144;精化的模型同标准键长的均方根偏差为0.04。     

以二维核磁共振解析S-磺酸型胰岛素B链残基质子自旋体系

胰岛素~1H谱的谱峰识别,是以核磁共振方法研究其溶液构象的基础。由于胰岛素复杂的聚合行为,使谱峰变宽,难以作谱峰识别。S-磺酸型胰岛素A及B链有分辨良好的氢谱。本文报道以500MHz二维相关谱(绝对值型)、400MHz双量子滤波相关谱、接力相干转移相关谱、核Overhauser二维谱,对S-磺酸型B链在重水中~1H谱的残基质子自旋体系的解析;报道了B_3Asn,B_9 Ser,B_(16)Tyr,B_(22)Arg,B_(26)Tyr,B_(27)Thr,B_(28)Pro及B_(29)Lys谱峰的专一识别。由碱侧pH滴定,测得B_(16)Tyr,B_(26)Tyr的pK值分别为10.65及10.60。     

放线菌素D新类似物的设计、合成与体外抗肿瘤活性

为了提高临床抗肿瘤药物放线菌素D(AMD)的抗肿瘤效果和治疗指数,在AMD构效关系研究基础上,设计全合成了包括9个新类似物在内的两类共13个AMD类似物.保持环肽2位D-Val不变,环肽5位分别用Sar,D-Me-Leu和Me-Ile等氨基酸替换以改变侧链基团长度,合成了类似物8b～8e;以环肽2位D-Phe替换的低毒性类似物[D-Phe2]2AMD为基础,在环肽5位进行氨基酸替换,改变侧链基团长度和空间指向,并引入芳香族氨基酸等,合成了类似物8f～8m.优化了类似物的合成中的反应条件,提高了五肽环化产率,避免了消旋产物的生成.所有类似物经[α]D,1HNMR和高分辨质谱表征后,采用MTT法进行了体外抗肿瘤活性筛选,结果表明,保留环肽2位D-Val及延长5位氨基酸侧链基团能显著提高类似物的抗肿瘤活性,而2位D-Phe替换后类似物的抗肿瘤活性普遍下降.     

1—（2—羟基—3,5—二硝基苯基）—3—[4—（苯基偶氮）苯基]—三氮烯与镉的显色反应

研究了新合成的1-(2-羟基-3,5-二硝基苯基)-3-[4-(苯基偶氮)苯基]-三氟烯(HDNPAPF)试剂,在乳化剂OP存在下与镉的显色反应。在pH为10.30～10.80的Na_2B_4O_7-NaOH介质中,镉与HDNPAPT形成1:1的红色配合物,表观摩尔吸光系数ε_(530)=1.85×10~5L/(mol·cm),镉浓度在0～0.6mg/L范围内符合比尔定律。该方法可用于电镀废水和环境水样中微量镉的测定。     

新试剂5-(2''-氨基-4''-羟基苯偶氮)邻苯二甲酰肼(AHPP) 的合成及其光度法测定钴

本文报道新试剂5-(2′-氨基-4′-羟基苯偶氮)邻苯二甲酰肼的合成,并研究了该试剂用于光度法测定钴的反应条件.钴与试剂在 pH7.7～9.0(0.06mol·L~(-1)Na_2B_4O_7-HCl缓冲介质)时形成稳定配合物,最大吸收位于542nm处,摩尔吸光率为5.7×10~3L·mol~(-1)·cm~(-1),配合物的组成为 1:2的 Co:AHPP,钴浓度在0～1.02×10~(-4)mol·L~(-1)范围内符合Beer′s law.试验了共存离子的影响,发现除Cu(Ⅱ),Ni(Ⅱ)略有干扰(可掩蔽)外,其它常见离子均允许大量存在,该法已直接用于不锈钢和维生素B_(12)中钴的测定.     

液相色谱-质谱联用技术分析固相合成胸腺五肽及其副产物

利用反相高效液相色谱(RP-HPLC)与电喷雾质谱(ESI-MS/MS)联用技术,分析用芴甲氧羰基(Fmoc)固相合成方法在WANG树脂上手工合成的胸腺五肽(H2N-Arg-Lys-Asp-Val-Tyr-COOH)粗产物,RP-HPLC结果显示:合成粗产物含有一个主要成分,三个次要成分和多个微量成分;与之联用的电喷雾质谱同步得出相应的某些信息,可对各成分的结构进行分析。结果证明,粗产物中的主成分即为目标五肽,另外几个主要副产物为五肽合成过程中去保护未完全的副产物。     

四硫富瓦烯为介体的碳纤维束葡萄糖氧化酶微电极的研究

本文研究了一种将电子介体四硫富瓦烯(TTF,Tetrathiafulalene)引入葡萄糖氧化酶微电极的新方法,制成了TTF为介体的碳纤维束葡萄糖氧化酶微电极。该电极制作简单,响应迅速、灵敏,电极寿命可达15天。葡萄糖浓度在1。0×10~(-4)～1.5×10~(-3)mol/L范围内有线性关系。检出限为7×10~(-5)mol/L。用于人体血样中葡萄糖测定获得满意结果。     

1.5分辨率去五肽(B26—30)胰岛素晶体中的水结构

本文报道1.5分辨率去五肽(B 26—30)胰岛素晶体中的水结构。根据扩充F_0的最后的(2F_o—F_c)Fourier图的检验,所讨论的水模型包括81个水分子(电子密度>0.4 e/~3),约占晶体溶剂的三分之二。以2.4—3.2为氢键范围,51个水分子同蛋白质原子成氢键,占水的63％,其中有12个以单水桥接相邻蛋白质分子,更多的以双水桥接相邻蛋白质分子。在蛋白质分子间的一长狭缝中有一个紧凑的水网,两头两个Cd原子通过三个水分子(配位体)像木桩一样支撑着这个水网,表明Cd原子和水网在分子密堆积中的重要作用。     

硼化合物研究——ⅩⅪ.H[B12H11NH2COR]与Ln2O3的反应——一类新型的含硼希土(Ⅲ)化合物的合成

将硼烷衍生物(C_2H_5)_4NB_(12)H_(11)NH_2COR[R=-CH-3,—CH=CH_2]经离子交换而得到的酸H[B_(12)H_(11)NH_2COR]与希土氧化物作用,制得一系列分子式为L-n[B_(12)H_(11)NH_2COR]_3·5H_2O的化合物,再用氧化吡啶(pyO)与上述化合物反应,就得到了分子式为[Ln(pyO)_6](B_(12)H_(11)NH_2COR)_3的新型化合物。